[發明專利]一種蓖麻脫毒組培快繁的方法

在審

• 申請號: 201410800385.X
• 申請日: 2014-12-19
• 公開（公告）號: CN105746344A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 岳蘭蘭
• 申請（專利權）人: 岳蘭蘭
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及植物脫毒組培快繁技術，尤其涉及一種蓖麻脫毒組培快繁的方

背景技術

蓖麻是大戟科蓖麻屬一年生或多年生草本植物，目前蓖麻栽培用于提取醫藥及工業用油，或用作風景樹以觀賞其葉。其中，藥用價值主要體現在蓖麻毒蛋白上，具有敗毒抗癌、消腫通滯的功效；蓖麻油用于精細化工，可制表面活性劑、脂肪酸甘油脂、脂肪二醇、干性油、癸二酸、聚合用的穩定劑和增塑劑、泡沫塑料及彈性橡膠等。蓖麻油粘度大，比重高(0.958～0.968)，在-18℃低溫下不凝固,在500～600℃的高溫下不變質、不燃燒，是高級潤滑油的重要原料。

蓖麻是世界十大油料作物之一，全世界種植面積約150萬hm²，平均單產1000kg/hm²,總產籽150萬噸。我國蓖麻種植面積約為30萬hm²，總產值25～30萬噸，占據世界總量的1/5。近年來，隨著資源用油儲蓄量的減少，我國農科院將蓖麻油作為一種可再生，并可代替石化能源的生物質能源植物進行研究。蓖麻油作為能源物質，其具有以下優勢：1)適應性強、耐旱抗逆，我國絕大部分地區都可種植；2)生長強勢、根深葉茂，可改善生態環境，防止水土流失，增加綠化面積；3)蓖麻用途廣泛，可作為能源作物利用，也可用于工業、醫藥、養蠶業以及軍事用途。由此可見，蓖麻種植具有廣闊的市場前景和良好的經濟效益。

目前，蓖麻種植主要采用大田直播，出苗率低，病毒感染嚴重，極大限制了藥用及油量產出，影響蓖麻的應用品質。因此，有必要提供一種病毒感染率低、產品品質高的脫毒組培快繁的方法。

發明內容

本發明目的是克服以上存在不足，提出一種無需切取微小植物莖尖，即能大量快繁蓖麻脫毒組培苗的方法。

本發明目的通過以下技術方案來實現：

一種蓖麻脫毒組培快繁的方法，按如下步驟進行：

1)培養基的配制，包括基本培養基和組培各階段培養基，各培養基的組分為：

①基本培養基：選用MS培養基，蔗糖或白糖20～30g/L，卡拉膠5～7g/L，pH6.0～7.2；

②誘導培養基：MS中添加6-BA0.5～1.5mg/L、NAA0.15～0.5mg/L和小球藻粉0.5～1.2mg/L；

③愈傷組織分化培養基：MS中添加6-BA2.5～3.0mg/L、NAA0.2～0.3mg/L和小球藻粉0.5～1.2mg/L；

④增殖培養基：MS中添加6-BAl.0mg/L和NAAO.5mg/L；

⑤生根培養基：1/2MS中添加NAAO.1mg/L和ABT生物菌生根粉O.1mg/L。

2)外植體的選取與滅菌：取蓖麻的種子，沙磨去殼后，經滅菌處理，作為脫毒組培用的外植體；

3)誘導培養：將步驟2)滅菌處理后的種子接種在誘導培養基上，直接形成無根組培苗或先形成愈傷組織，再將愈傷組織移植至分化培養基誘導出叢芽，形成無根組培苗、珠芽和小塊根；

4)增殖培養：將步驟3)直接形成的無根組培苗或先形成愈傷組織，再經分化培養基誘導形成的無根組培苗、珠芽和小塊根接種在增殖培養基上，誘導出叢芽，形成無根組培苗、珠芽和小塊根；

5)生根培養：將步驟4)增殖形成的無根組培苗、珠芽和小塊根接種在生根培養基中進行生根培養；

6)移栽：當步驟5)的生根組培苗生長至8～10cm以上、生根珠芽0.5～0.7cm以上，生根小塊根直徑0.5～1.0cm以上，移栽基質培養至成苗；

7)病毒檢測：利用RT-PCR擴增技術，構建其基因組序列克隆，原核表達制備病毒特異性的抗血清，建立ELISA檢測技術進行蓖麻大豆花葉病毒、芋花葉病毒、馬蹄蓮花葉病毒的檢測。

進一步，所述的蓖麻種子是當年生的成熟種子，采用蓖麻種子：粗砂為1：5～8的配比混合后，中速研磨去殼，篩去粗砂，溫水清洗2～3次。

進一步，所述的滅菌處理是經75％酒精浸泡0.5～l.0min，再用2％的次氯酸鈉水溶液滅菌20～30min，最后用無菌水沖洗3～5次。

進一步，所述的移栽基質是田土：珍珠巖：蛭石：水銹石按體積比3：1：1：0.5配制而成。

本發明的有益效果是：