[發明專利]一種毛棉杜鵑的組培快繁方法

在審

• 申請號: 201410795987.0
• 申請日: 2014-12-11
• 公開（公告）號: CN104885932A
• 公開（公告）日: 2015-09-09
• 發明（設計）人: 莊雪影;孫朝輝;趙富群;洪文君
• 申請（專利權）人: 華南農業大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種花卉繁殖技術領域，具體涉及一種毛棉杜鵑的組織培養、快速繁殖方法。

背景技術

毛棉杜鵑Rhododendron?moulmainense為杜鵑花科常綠小喬木，自然分布于中國、印度、印尼、馬來西亞和緬甸，在我國主要分布在長江流域以南海拔400-1500m的森林和灌叢中。毛棉杜鵑花朵艷麗、新葉紅嫩，是營造花叢和花群景觀的優良樹種。但其實生苗在常規條件下生長緩慢，幼苗變異大。扦插擴繁的研究雖已有報道，但其擴繁量受母株材料和繁殖季節的影響，且難以達到規模化快速繁殖的要求。組織培養繁育技術具有繁殖系數高、繁殖速度快、不受季節影響和易于產業化等優點，為了更好地保護、開發與利用毛棉杜鵑資源，研究毛棉杜鵑的組織培養技術具有重要意義。

因此，本申請針對毛棉杜鵑組培快繁技術的關鍵環節，開展了基本培養基、蔗糖、生長素、細胞分裂素、煉苗等關鍵技術篩選研究，建立了一套毛棉杜鵑植物組織培養體系。

發明內容

本發明的目的在于：提供一種培養周期短、不受季節影響、產量較高的毛棉杜鵑的組培快繁方法，以克服現有技術的不足，促進毛棉杜鵑的大規模應用。

本發明的技術方案是：一種毛棉杜鵑的組培快繁方法，其特征在于：包括如下步驟：

A.無菌苗的獲得：選取飽滿種子包在紗布中，先置于自來水下沖洗2h，用75％酒精浸泡2min，無菌水沖洗5遍，再用0.1％升汞加吐溫2滴消毒90s，無菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干種子表面的殘留水分，接種于僅添加了0.6％瓊脂、25％蔗糖，pH為5.8的基本培養基中。

B.增殖培養：將外植體叢生芽接種于以Read培養基為基本培養基的增殖培養基中培養，每60d繼代一次。

C.生根培養：將增殖培養得到的健壯幼苗切段，接種于以1/2WPM培養基為基本培養基的生根培養基中培養誘導生根。

優選地，所述增殖培養基為Read+1.0mg/L?ZT+0.02mg/L?IBA+2.5％-3.5％蔗糖，其增殖倍數達4.5。

優選地，所述生根培養基為1/2WPM+1.5mg/L?IBA，其生根率可達80.17％；添加活性炭0.1％可促進生根數和根長生長。。

此外，還包括煉苗與移栽步驟，具體方法為：生根培養15d后，將培養瓶移至室溫環境、自然光照環境下培養3-5d后，將培養瓶蓋子擰松，7d后移苗；在流水下洗去植株根部培養基，將洗凈的植株根部浸泡于一定濃度的藥劑內2-2.5h，以泥炭土和珍珠巖體積比3∶1為移栽基質，移栽于32穴的穴盤中，移栽后的前10d內，遮膜保濕，控制相對濕度75％-85％，第10d后，逐漸撤膜。所述藥劑為：5-氨基乙酰丙酸溶液，其濃度為5ppm。

撤膜15d后，澆灌濃度為50ppm的5-氨基乙酰丙酸的溶液，此后，每隔15d重復澆灌一次，直至下次換盆移苗。

附圖說明

圖1為Read培養基處理組。

圖2為煉苗處理組。

圖3為不添加細胞生長素處理組。

圖4為添加細胞生長素處理組。

圖5為生根處理組。

圖6為活性炭處理組。

具體實施方式

以下結合附圖實對本發明作進一步描述。

A.無菌苗的獲得：選取飽滿種子包在紗布中，先置于自來水下沖洗2h，用75％酒精浸泡2min，無菌水沖洗5遍，再用0.1％升汞加吐溫2滴消毒90s，無菌水沖洗5次，用滅菌濾紙吸干種子表面的殘留水分，將滅菌后的種子接種于添加1/4MS、0.6％瓊脂、25％蔗糖，pH?5.8的基本培養基中。

B.增殖培養：將外植體叢生芽接種于Read+1.0mg/L?ZT+0.02mg/L?IBA+2.5％-3.5％蔗糖的增殖培養基中，每60d繼代一次，增殖倍數達4.5。

C.生根培養：將增殖培養得到的健壯幼苗切段，接種于為1/2WPM+1.5mg/L?IBA的生根培養基中，其生根率可達80.17％，添加活性炭0.1％可促進生根數和根長生長。

D.煉苗與移栽：生根培養15d后，將培養瓶移至室溫環境、自然光照環境下培養3-5d后，將培養瓶蓋子擰松，擰松，7d后移苗；在流水下洗去植株根部培養基，將洗凈的植株根部浸泡于濃度為5ppm的5-氨基乙酰丙酸溶液內2.5h，以泥炭土和珍珠巖體積比3∶1為移栽基質，移栽于32穴的穴盤中，移栽后的前10d內，遮膜保濕，控制相對濕度80％，第10d后，逐漸撤膜。撤膜15d后，澆灌濃度為50ppm的5-氨基乙酰丙酸的溶液，此后，每隔15d重復澆灌一次，直至下次換盆移苗。