[發明專利]一種制備穿心蓮內酯的方法及用途

在審

• 申請號: 201410792641.5
• 申請日: 2014-12-19
• 公開（公告）號: CN104557819A
• 公開（公告）日: 2015-04-29
• 發明（設計）人: 陳勇;郭貝貝;欒連軍;談滿良;劉雪松;李小冬;李頁瑞;吳永江;王龍虎
• 申請（專利權）人: 浙江大學
• 主分類號: C07D307/60
• 分類號: C07D307/60
• 代理公司: 杭州求是專利事務所有限公司 33200
• 代理人: 張法高;趙杭麗

技術領域

本發明屬于中藥提取物提取純化加工領域，涉及一種制備穿心蓮內酯的方法。

背景技術

穿心蓮內酯為爵床科植物穿心蓮中提取得到的二萜內酯類化合物，分子式為C₂₀H₃₀O₅，在沸乙醇中溶解，在甲醇或乙醇中略溶，在水中幾乎不溶。現代藥理研究表明穿心蓮內酯具有抗菌、抗炎、抗病毒、治療心腦血管疾病、免疫調節、保肝利膽等作用，并有低毒性、價格低的特點。最近研究報道穿心蓮內酯對前列腺癌、食道癌、結腸癌和白血病等具有較好的抗腫瘤作用，有希望成為一種新的抗癌藥物。

傳統的穿心蓮內酯的提取純化方法為乙醇提取，活性炭回流脫色除雜，濃縮回收乙醇，經過多步結晶的制備方法。活性炭脫色造成大量內酯被活性炭吸附，加熱濃縮的過程中穿心蓮內酯易分解，因此傳統方法造成穿心蓮內酯的大量損失，且活性炭不可重復利用，后期處理較復雜且污染環境。

文獻報道了穿心蓮內酯的醇提和堿水提取等方法：

中國專利《穿心蓮內酯及其制備方法（CN103145660B）》即采用乙醇提取，活性炭脫色，加熱回收溶劑的生產方式。專利《穿心蓮總內酯與新穿心蓮內酯、脫水穿心蓮內酯、去氧穿心蓮內酯的生產工藝（CN101559088）》采用石油醚脫除葉綠素等脂溶性雜質，將其熱溶于低級醇或含水低級醇，以活性炭回流脫色的方式生產。專利《一種從穿心蓮中提取穿心蓮內酯的方法（CN103435578A）》采用植物組織破碎提取法結合酶解、超聲波~微波輔助提取，石油醚萃取，后用大孔吸附樹脂純化，減壓濃縮；以上方法中均涉及使用大量活性炭脫色，采用加熱濃縮，造成內酯大量損失。

專利《一種穿心蓮內酯的制備方法（CN?1935798B）》采用大孔樹脂柱及硅膠柱純化方法，操作復雜，且過程中使用丙酮等溶劑，易造成有毒溶劑殘留，該方法生產效率較低。

發明內容

本發明的目的是提供一種制備穿心蓮內酯的方法，是應用多級膜分離技術純化穿心蓮內酯，克服現有生產方法脫色中活性炭的大量使用，濃縮中需加熱，能耗大，且穿心蓮內酯損失嚴重問題。本方法工藝簡便，適于工業化生產。

本說明方法通過以下步驟實現：

（1）取穿心蓮的地上生長部分為原料進行干燥并粉碎，將干燥粉碎后的穿心蓮原料加入乙醇溶液進行浸提、過濾，得穿心蓮提取液，然后濃縮，將所述濃縮液液加水稀釋，將稀釋后的濃縮液經陶瓷膜過濾，過濾掉提取液中的部分雜質，得到濾過液；

（2）將所述濾過液過超濾膜過濾，除去所述濾過液中的色素多糖及蛋白大分子物質，得到超濾液；然后將該超濾液過納濾膜進行濃縮，得納濾濃縮液；

（3）將所述納濾濃縮液減壓濃縮，經過至少兩次結晶然后干燥即獲得穿心蓮內酯晶體。

其中，步驟（1）中所述的乙醇溶液中乙醇濃度為80~95%（v/v），所述提取料液的體積為所加干穿心蓮原料重量的6~10倍；所述提取液濃縮至原體積的30%~80%；所述稀釋時的加水量為所述濃縮液體積的0.5~2倍；所述的過濾用陶瓷膜的孔徑為0.01~0.4μm，過濾溫度為20~45℃，過濾壓力為0.1~0.3?Mpa。

步驟（1）中所述的乙醇溶液中乙醇的體積分數為80~95%，所述提取料液的體積為所加干穿心蓮原料重量的6~10倍；所述提取液濃縮至原體積的30%~80%；所述稀釋時的加水量為所述濃縮液體積的0.5~2倍；所述的過濾用陶瓷膜的孔徑為0.01~0.4μm，過濾溫度為20~45℃，過濾壓力為0.1~0.3?Mpa。

步驟（2）中所述的超濾膜截留分子量為2000~20000，過濾溫度為20~45℃，過濾壓力為0.1~0.5?Mpa；所述的納濾膜截留分子量為100~500，過濾溫度為20~45℃，過濾壓力為1.0~3.0Mpa。

步驟（3）包括以下步驟：

（a）將所述納濾濃縮液濃縮至呈稀糊狀，靜置結晶，然后過濾該結晶體，得一次晶體；

（b）將所述一次晶體加入乙醇進行回流溶解，然后將乙醇降溫，低速攪拌含有一次晶體的乙醇使之結晶，過濾該結晶體，得二次晶體；

（c）將所述二次晶體繼續加入乙醇進行回流溶解，靜置結晶，然后過濾該結晶體并干燥，得穿心蓮內酯晶體。

其中，步驟（a）中所述的靜置結晶時間為8~12小時，結晶溫度為15~30?℃。

步驟（b）中乙醇的用量為所述一次晶體的重量的2~5倍；結晶時間為8~12小時，攪拌速度為10~100?r/min，結晶溫度為15~30?℃。