[發明專利]以超臨界流體技術分離與純化胎盤中機能成分的方法

在審

• 申請號: 201410788698.8
• 申請日: 2014-12-17
• 公開（公告）號: CN105748524A
• 公開（公告）日: 2016-07-13
• 發明（設計）人: 余哲仁;王璧娟;林淑美;林華經;莊明熙;劉曲婷;游宜龍;彭秋瑩;莊淋翔
• 申請（專利權）人: 超康生物科技股份有限公司;超微體生醫科技股份有限公司
• 主分類號: A61K35/50
• 分類號: A61K35/50
• 代理公司: 北京北新智誠知識產權代理有限公司 11100
• 代理人: 郭佩蘭

技術領域

本發明與分離胎盤中活性成分的技術有關，更詳而言之是指一種以超臨界流體技術分離與純化胎盤中機能成分的方法。

背景技術

胎盤是胎兒與母體組織之間的結合結構，提供胚胎所有營養物質和保護，科學研究發現，胎盤中含有豐富的生長因子、激素、蛋白質、勝肽、核酸、抗體和其他濃縮營養成分，可以促進身體組織的健康。它含有豐富的生長因子如肝細胞生長因子、神經生長因子、表皮纖維細胞因子、胰島素生長因子、血小板衍生生長因子、造血細胞生長因子、血管內皮細胞因子等促進干細胞的生長因子，這些生長因子具有調節自主神經系統，改善心血管循環，傷口組織愈合，增強神經再生，平衡多種荷爾蒙，免疫增強功能(抗過敏)，鎮痛作用和腸道健康的改善。

已知從胎盤中萃取生物活性勝肽成分的方法甚多，如美國專利US3409605以離子交換樹脂吸附、濃縮和純化胎盤中生長因子，美國專利US4169139則以丙酮、稀醋酸鉛和稀硫酸銨分離沉淀組織中的蛋白質成分，中國CN1298736C與CN102488713B專利采用新鮮胎盤以無菌水清洗，加入10-100倍食鹽水，高速組織均質化，先經透析脫鹽與超過濾膜澄清處理，得到一種無色或微帶黃色透明液體，再經陰離子交換層析、凝膠排阻層析、逆相高效液相層析多重步驟分離純化，透析凍干得到萃取純化的成品。也有如中國CN101658534A專利，其采用液態氮冷凍解凍法，高速研磨后，再經過透析脫鹽與超過濾膜澄清處理，以離子交換樹脂吸附和洗脫條件下，得到活性勝肽成分。

現有萃取與純化胎盤相關機能成分的方法繁雜，分離與純化胎盤中的勝肽、蛋白質與活化因子等機能成分較為耗時，且需使用大量的有機溶劑，在制作過程中有機溶劑可能會與機能成分產生化學反應的情形，不僅制作完成后溶劑去除與濃縮過程中，加熱蒸發溶劑易造成機能成分部分破壞，且溶劑易殘留于分離物或純化物中，造成機能成分純度不足的情形，顯有改進之處。

發明內容

本發明的主要目的在于提供一種以超臨界流體技術分離與純化胎盤中機能成分的方法，其可分離與純化胎盤中的活性成分，不但成本低，制作簡單、操作性強、適合于規模化生產，且能保持胎盤中生物活性成分的活性，不需再經繁復的溶劑去除與濃縮、分離程序，且超臨界流體可回收再利用，不需再經濃縮過程去除溶劑的步驟，無溶劑殘留等安全疑慮，甚為環保、安全，具實用價值。

為達成前述的目的，本發明提供一種以超臨界流體技術分離與純化胎盤中機能成分的方法，其至少包含以下步驟：萃取：在預定溫度與壓力的操作條件下，以預定的流速持續將胎盤萃取液與超臨界狀態溶劑通入一分餾槽內，用以自胎盤萃取液萃取出勝肽與蛋白質等機能成分；純化：持續在預定溫度與低于前述壓力的操作條件下分離超臨界狀態溶劑，將該分餾槽內萃取出的機能成分依序輸送至若干分離槽進行純化，以獲得胎盤萃取液中的勝肽、蛋白質與活化因子等機能成分。

所述純化的步驟中，將所述分餾槽內萃取出的機能成分依序輸送經過連接的三個分離槽并逐步降壓，以進行選擇性分離、區分與純化，從而提升胎盤勝肽與蛋白質的含量與純度。

所述萃取的步驟中，胎盤萃取液以1:10(W/V)的比例將胎盤粉末與乙醇混合離心而成。

胎盤粉末為干燥的人體或羊、豬、鹿的胎盤粉末。

所述萃取的步驟中，在壓力2000-4000Psi、溫度40℃或60℃的操作條件下，將胎盤萃取液放置于所述分餾槽，超臨界狀態溶劑為超臨界二氧化碳/乙醇，以超臨界流體流速3-9L/hr、胎盤萃取液流速1-3L/hr流入所述分餾槽。

所述純化的步驟中，在溫度40℃或60℃下，依序分別以3000、2000、1000psi的壓力在三個分離槽快速降壓分離超臨界狀態溶劑。

所述萃取的步驟中，最適的操作條件為：壓力為4000Psi、溫度為40℃。

所述純化的步驟中，最適的操作條件為：溫度為60℃、壓力為3000psi時，最適于將胎盤勝肽與蛋白質純化區分于三個所述分離槽中。

本發明的有益效果在于：

本發明所提供以超臨界流體技術分離與純化胎盤中機能成分的方法，其采用安全無毒的超臨界狀態溶劑，配合物理方式的萃取與純化的步驟，可將胎盤萃取液分離出活性成分-勝肽與蛋白質，且無溶劑殘留等安全疑慮，環保、安全，超臨界狀態溶劑更可回收再利用，相較于已知萃取與分離胎盤勝肽與蛋白質的方法，本發明更可量產、連續式運作，具實用價值。

附圖說明

圖1為本發明一較佳實施例的流程圖。

圖2為本發明一較佳實施例的壓力-胎盤勝肽分離效率分析圖。