[發明專利]一種提高白僵蠶得率的孢子懸液及其應用

在審

• 申請號: 201410788630.X
• 申請日: 2014-12-17
• 公開（公告）號: CN104430212A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 邢東旭;楊瓊;李麗;羅國慶;肖陽;李慶榮;葉明強;劉新濤
• 申請（專利權）人: 廣東省農業科學院蠶業與農產品加工研究所
• 主分類號: A01K67/04
• 分類號: A01K67/04;C12N1/14
• 代理公司: 北京紐樂康知識產權代理事務所(普通合伙) 11210
• 代理人: 覃莉

技術領域

本發明屬于中藥生產技術領域，具體涉及一種提高白僵蠶得率的孢子懸液及其應用。

背景技術

僵蠶是一種優良的中藥材，具有息風止痙、祛風止痛、化痰散結的功效，在中成藥和中藥方劑中應用廣泛。據統計，在513種人用成藥中有49種含白僵蠶，64種兒科成藥中含白僵蠶的有29種。隨著僵蠶藥理成分和功能研究的深入，發現僵蠶水提物或醇提物在美白祛斑、抗驚厥、抗凝、降糖降脂等方面也表現出良好的功效。近年來，僵蠶相關產品的研發也開始起步，進一步拓展了僵蠶在藥食領域的應用，最新資料表明，僵蠶國內年需求量已達2500-3000噸，僵蠶需求呈逐年增加的趨勢，僵蠶的生產和加工具有廣闊的市場前景。

僵蠶人工生產的步驟是：家蠶飼養至五齡起蠶，體表噴灑白僵菌孢子懸液，待病原充分粘附后開始喂食桑葉，一般在5-6天內家蠶出現大批量死亡，死蠶進一步僵化，最后曬干或烘干后獲得僵蠶。

一般的家蠶品種在五齡期食桑七日即成熟蠶，第7天開始吐絲結繭。因此，家蠶若在第6天還不發病，一般都會在結繭過程中死亡，或者成為僵蛹，不僅降低了僵蠶得率，還增加了僵蠶收獲的難度。白僵菌在保存過程中孢子活力出現一定程度地下降，往往造成僵蠶延遲發病，影響到僵蠶的得率和產量。另一方面，家蠶發病太早則會影響僵蠶收獲的質量，導致收獲的白僵蠶較小，因為家蠶在五齡第3-5天為盛食期，所以，提高家蠶在第5、6天的發病率對于提高白僵蠶的質量有很大影響，這就對白僵菌的粘附性、感染率、單位濃度和單位施用量等都有較大的要求。

申請號為“CN201010536189.8”的中國專利中，公開了名稱為“一種用添加營養物質提高球孢白僵菌孢子萌發率的方法”的發明專利，該發明以球孢白僵菌(Beauveriabassiana)(保藏編號為CCTCC?No：M209238)為發酵菌株，將其產生的孢子配制成一定濃度的孢子懸浮液，在該孢子懸浮液中添加最終濃度為0.5%-10%的麩皮浸出液，在適當的條件下(250mL的三角瓶，裝液量50mL；25℃、180rpm搖床12h)進行培養。該添加麩皮浸出液的方式能夠提升白僵菌孢子的萌芽率，然而該方式只能單方面的提高白僵菌孢子的萌芽率，對于白僵菌孢子的活力的保持效果和粘附性提升不明顯，且每次使用都需重新發酵，時間跨度大。

申請號為“CN201110025267.2”的中國專利中，公開了名稱為“一種球孢白僵菌殺蟲劑懸乳劑及其制備方法”的發明專利，其特征在于按重量份數由以下成分組成：球孢白僵菌孢子粉：20-80份；乳化分散劑：10-60份；增稠劑：10-30份；懸浮穩定劑：10-30份；展著劑：10-30份；糖：10-60份；蛋白胨：1-10份；所述的球孢白僵菌孢子粉的白僵菌含孢量為500億/克。該球孢白僵菌殺蟲劑中球孢白僵菌孢子粉的配比較高，主要用做殺蟲劑，不能控制家蠶的發病時間，不適合作為白僵蠶的生產。

發明內容

為了解決上述問題，本發明公開了一種提高白僵蠶得率的孢子懸液及其應用，以解決現有的白僵蠶在生產中出現的白僵蠶的產量和質量的問題，提供了一種能夠顯著提高白僵蠶得率的白僵菌孢子懸液，對白僵菌懸液的濃度進行了優化，同時提高了白僵菌懸液的粘附性和活力，提高其發芽率，對于白僵蠶的生產在產量和質量方面都有著顯著提升。

一種提高白僵蠶得率的孢子懸液，其原料組分包括：白僵菌孢子粉、聚山梨酯-80、蔗糖、蛋白胨、輔料物質、無菌水，所述孢子懸液中各成分的占比為：白僵菌孢子?1×10⁶-5×10⁶個/mL、聚山梨酯-80?0.2份（質量百分比）、蔗糖?1-3份、蛋白胨?0.4-0.6份、輔料物質?0.05份、其余為無菌水。

作為一種優選方式，所述輔料物質可以是硫酸鎂、氯霉素、硫酸鏈霉素。

作為一種優選方式，其原料及配比包括：白僵菌孢子?3×10⁶個/mL、聚山梨酯-80?0.2份（質量百分比）、蔗糖?2份、蛋白胨?0.5份、輔料物質?1份，其余為無菌水。

一種提高白僵蠶得率的孢子懸液的制作方法，包括以下配置步驟：（1）使用聚山梨酯-80、白僵菌孢子粉和無菌水配制孢子初步懸液，可采用血球計數法進行濃度確定；（2）在所述孢子初步懸液中加入蔗糖、蛋白胨及輔料物質，混合充分溶解。