[發明專利]一種檢測蝦青素含量的測定方法

在審

• 申請號: 201410787109.4
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104502289A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 周蕊;吳朝艷;滕春娟
• 申請（專利權）人: 貴州航天烏江機電設備有限責任公司
• 主分類號: G01N21/31
• 分類號: G01N21/31
• 代理公司: 貴陽中新專利商標事務所 52100
• 代理人: 劉楠;李亮

技術領域

本發明涉及植物色素的生產工藝，尤其是一種檢測精制蝦青素含量的測定方法。

背景技術

目前，提取天然蝦青素的方法多采用物理粉碎、溶劑浸提、減壓蒸餾等手段進行提取和精制。現有的提取方法需要消耗大量貴重的有機溶劑，產品含量低、溶劑殘留高且不易去除、能耗高，提取成本高等弊端。超臨界流體CO₂萃取技術可用于天然蝦青素的提取和精制，具有污染小，無溶劑殘留的優點。

現有的蝦青素含量測定方法：一是采用湖北荊州市天然蝦青素有限責任公司企業質量標準制定的方法。具體操作如下：精確稱取紅球藻粉0.5mg，置于帶有刻度的10ml離心管中，向離心管中加入約2ml含有少量醋酸（1d/ml）的DMSO，搖勻，70℃保溫5min，保溫過程中要不斷搖動離心管；3500r/min離心3min，將上清液移入10ml容量瓶中。剩余在離心管底部的藻渣無色或僅有很淺的顏色；將幾次收集的上清液用DMSO精確定容至10ml，取1ml放入另一個10ml的容量瓶中，用DMSO精確定容至10ml，此溶液待測；將待測溶液放入1cm光徑比色杯中，在492nm波長下測定吸光值A；用下式計算所測溶液中蝦青素的濃度：

式中：

C₁——被測溶液中蝦青素的濃度（mg/ml）

A₄₉₂——492nm波長被測溶液吸光值

A^1%_1cm——小光系數（2220）

式中：

C₁——被測溶液中蝦青素的濃度（mg/ml）

C₂——蝦青素的含量（%）

二是參照Cyanotech公司，稱取約25mg干燥雨生紅球藻藻粉，放入10ml離心管中，加入3g石英砂，在離心管中加入5mlDMSO，45～50℃水浴放置15min，期間振蕩幾次。3800～4200r/min離心3min使不溶物沉淀，將上清轉入25ml容量瓶中，向離心管中加入5ml正己烷，渦旋振蕩30s，離心分離沉淀，將上清液轉入25ml容量瓶中，正己烷重復抽提沉淀至上清基本無色（吸光值小于0.05）。正己烷定容，適當稀釋，與474nm下正己烷為空白，測吸光值（于0.25～0.75間）。按下式計算：

式中2100為1%（m/v）的蝦青素正己烷標準溶液于474nm下的吸光系數。

真空濃縮后所得產物中蝦青素的含量測定方法為：稱取約25mg蝦青素提取物于100ml容量瓶中，正己烷溶解定容，適當稀釋，于474nm下以正己烷為空白，測吸光值（于0.25～0.75間）。按下式計算：

式中2100為1%（m/v）的蝦青素正己烷標準溶液于474nm下的吸光系數。

所述提取率是指雨生紅球藻中蝦青素提取率，用如下公式計算：

三是采用高效液相色譜法，該方法要求有蝦青素標樣。

蝦青素含量測定方法一、二使用的檢測儀器簡單，操作復雜；測定方法三使用的儀器要求高，操作簡單。

發明內容

本發明的目的是：提供一種檢測蝦青素含量的測定方法，它使用方便，無毒害作用，成本低廉，且操作方便，能用于工業化生產現場檢測，以克服現有技術的不足。

本發明是這樣實現的：檢測蝦青素含量的測定方法，取經過超臨界流體二氧化碳萃取過蝦青素的萃出物樣品，經均質后將樣品進行用無水乙醇稀釋定容，獲得待測溶液；2）將待測溶液放入光徑比色杯中，在438nm波長下測定吸光值A，以無水乙醇為空白試劑；3）按式（1）計算蝦青素含量：

式中：S表示蝦青素含量；x表示稀釋倍數；A表示吸光度；m表示取樣質量，2200表示質量百分比為1%的蝦青素乙醇標準溶液于438nm下的吸光系數；1000為稀釋倍數。

由于采用了上述的技術方案，本發明采用無水乙醇作為空白試劑，該溶劑在售價便宜，使用方便，無毒害作用，使用的分光光度計可在生產車間直接檢測，操作工上手容易，可用于工業化生產現場檢測。本發明工藝簡單，便于操作。本發明材料來源廣泛，溶劑可以反復利用，且制備獲得的產品無異味，使用效果好。

具體實施方式