[發(fā)明專利]一種云芝多糖的提取工藝

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410785842.2
• 申請(qǐng)日: 2014-12-18
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104387496A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 王麗娜;蔡傳文;張偉
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 威海百合生物技術(shù)股份有限公司
• 主分類號(hào): C08B37/00
• 分類號(hào): C08B37/00
• 代理公司: 威海科星專利事務(wù)所 37202
• 代理人: 王元生

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種云芝有效成分的提取方法，具體地說(shuō)是一種云芝多糖的提取工藝。

背景技術(shù)

云芝多糖是從擔(dān)子菌雜色云芝菌種提取的多糖，也可以從人工培養(yǎng)的菌絲體中分離得到。具有多種生物活性。研究表明云芝多糖具有免疫調(diào)節(jié)功能，是良好的免疫增強(qiáng)劑，具有增強(qiáng)免疫細(xì)胞功能和識(shí)別能力，提高IgM的量等作用；云芝多糖同時(shí)具有保肝護(hù)肝作用，可顯著降低血清轉(zhuǎn)氨酶，對(duì)肝組織病變和肝壞死有明顯的修復(fù)作用。相關(guān)的多糖制劑已經(jīng)被廣泛應(yīng)用于臨床。傳統(tǒng)的云芝多糖的提取方法有熱水提取法，其將云芝浸泡在熱水中，從云芝中提取出水溶性多糖。但此方法耗時(shí)長(zhǎng)，多糖的提取率較低，成本高。特別是云芝提取物中大分子蛋白質(zhì)含量高，因云芝多糖是含蛋白質(zhì)的葡聚糖，而大分子的蛋白質(zhì)會(huì)影響其溶解性和吸收率，影響其生物活性。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問(wèn)題是克服上述現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種工藝簡(jiǎn)單，提取率高，成本低的云芝多糖的提取工藝。

本發(fā)明解決上述技術(shù)問(wèn)題采用的技術(shù)方案是：一種云芝多糖的提取工藝，其特征在于：其具體步驟如下：

1）稱取一定質(zhì)量的云芝粉末，按料液比1:20-25加入的水，浸泡60-90min，于50-60℃恒溫水浴下回流，浸提兩次；

2）將步驟1）所得溶液離心過(guò)濾，取其上清液，然后經(jīng)過(guò)樹(shù)脂吸附脫去顏色，靜置24h；

3）將步驟2）得到的上清液加入纖維素酶和中性蛋白酶進(jìn)行酶解，其中酶濃度為1.5%的纖維素酶的加入量是上清液的4-6%，酶濃度為1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%，調(diào)節(jié)pH6.5，溫度45-55℃，時(shí)間60-90min，減壓濃縮至原體積的70%，抽濾取其清液；

4）將步驟3）得到的清液用四倍體積的無(wú)水乙醇洗滌、沉淀，干燥得云芝提取物，其中云芝多糖含量為32%-45%。

進(jìn)一步，本發(fā)明所述步驟3）中上清液加入纖維素酶和中性蛋白酶進(jìn)行酶解，其中酶濃度為1.5%的纖維素酶的加入量是上清液的5.5%，酶濃度為1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的3%，調(diào)節(jié)pH6.5，溫度50℃，時(shí)間90min。

本發(fā)明經(jīng)過(guò)雙酶酶解發(fā)酵提取云芝提取物，其中云芝多糖含量為32%-45%。對(duì)照現(xiàn)有技術(shù)，本發(fā)明工藝簡(jiǎn)單，成本較低，提取率高。特別是通過(guò)纖維素酶進(jìn)行破壁處理，蛋白酶進(jìn)行去蛋白處理，避免了大分子蛋白帶來(lái)的溶解度低等缺點(diǎn)，增加了云芝多糖的生物活性，能更好地被人體吸收和利用。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例對(duì)本發(fā)明做進(jìn)一步說(shuō)明。

本發(fā)明一種云芝多糖的提取工藝，其步驟是：云芝樣品烘干—>粉碎（過(guò)80目篩）—>水解—>保濕浸提—>離心—>上清液—>大孔樹(shù)脂吸附—>酶解—>減壓濃縮—>醇沉—>烘干。具體步驟為：

1）稱取一定質(zhì)量的云芝粉末，按料液比1:20-25加入的水，浸泡60-90min，于50-60℃恒溫水浴下回流，浸提兩次。

2）將步驟1）所得溶液離心過(guò)濾，取其上清液，然后經(jīng)過(guò)樹(shù)脂吸附脫去顏色，靜置24h。

3）將步驟2）得到的上清液加入纖維素酶和中性蛋白酶進(jìn)行酶解，其中兩種酶濃度均為1.5%，酶濃度為1.5%的纖維素酶的加入量是上清液的4-6%，酶濃度為1.5%的蛋白酶的加入量是上清液的2-4%。調(diào)節(jié)pH6.5，溫度45-55℃，時(shí)間60-90min，減壓濃縮至原體積的70%，抽濾取其清液。利用酶反應(yīng)具有高度專一性等特性，根據(jù)植物藥材細(xì)胞壁的構(gòu)成，纖維素酶能將細(xì)胞壁的組成成分水解或降解，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使有效成分充分暴露出來(lái)，溶解、混懸或膠溶于溶劑中，從而達(dá)到提取細(xì)胞內(nèi)有效成分的目的。中性蛋白酶能進(jìn)行去蛋白處理，使蛋白質(zhì)沉淀，減少水溶性多糖中大分子蛋白的殘留。

4）將步驟3）得到的清液用四倍體積的無(wú)水乙醇洗滌、沉淀，干燥得云芝提取物，其中云芝多糖含量為32%-45%。

本發(fā)明從云芝中提取出水溶性多糖，經(jīng)脫色后，加入纖維素酶和中性蛋白酶。利用酶反應(yīng)具有高度專一性等特性，根據(jù)植物藥材細(xì)胞壁的構(gòu)成，纖維素酶能將細(xì)胞壁的組成成分水解或降解，破壞細(xì)胞壁結(jié)構(gòu)，使有效成分充分暴露出來(lái)，溶解、混懸或膠溶于溶劑中，從而達(dá)到提取細(xì)胞內(nèi)有效成分的目的。中性蛋白酶能進(jìn)行去蛋白處理，使蛋白質(zhì)沉淀，減少水溶性多糖中大分子蛋白的殘留。