[發明專利]一種提高賴氨酸發酵產量的方法

在審

• 申請號: 201410778887.7
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104498554A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 尚海濤;徐斌;楊為華;鄧遠德;戴嘉;張雪鋒;穆曉玲
• 申請（專利權）人: 安徽豐原發酵技術工程研究有限公司
• 主分類號: C12P13/08
• 分類號: C12P13/08;C12R1/15
• 代理公司: 北京路浩知識產權代理有限公司 11002
• 代理人: 王文君

技術領域

本發明涉及微生物發酵領域，具體地說，涉及一種提高賴氨酸發酵產量的方法。

背景技術

賴氨酸是人體必需氨基酸之一，能促進人體發育、增強免疫功能，并有提高中樞神經組織功能的作用。賴氨酸為堿性必需氨基酸。由于谷物食品中的賴氨酸含量甚低，且在加工過程中易被破壞而缺乏，故稱為第一限制性氨基酸。

賴氨酸是人體需要的一種氨基酸，一種不可缺少的營養物質。眾所周知，蛋白質是構成人體細胞的主要成份，食物中的蛋白質進入人體后經過消化先分解成氨基酸，然后人體又利用這些氨基酸再合成新的人體蛋白質，如免疫抗體、消化酶、血漿蛋白、生長激素等都是合成后的人體蛋白質。在合成蛋白質的各種氨基酸中，L-賴氨酸是最重要的一種，如果體內缺少L-賴氨酸，其它氨基酸就受到限制或得不到利用，科學家稱它為人體第一必需氨基酸。科學家還發現，L-賴氨酸是控制人體生長的重要物質抑長素(Somatotation,ss)中最重要的也是最必需的成份，對人的中樞神經和周圍神經系統都起著重要作用。人體不能自身合成L-賴氨酸，必須從食物中吸取賴氨酸，它是幫助其它營養物質被人體充分吸收和利用的關鍵物質，人體只有補充了足夠的L-賴氨酸才能提高食物蛋白質的吸收和利用，達到均衡營養，促進生長發育。

賴氨酸大多是通過微生物發酵來制備的，一般賴氨酸發酵通過對葡萄糖利用進行發酵，而大部分葡萄糖的來源，需要大量的玉米來進行生產，這就存在與人爭糧的問題，造成資源浪費，而木薯具有價格便宜，產量大，易于粉碎，液化后易于過濾等優點。

發明內容

本發明的目的是為了克服賴氨酸種子罐及發酵罐在發酵生產過程中使用的葡萄糖成本較高的缺點，提供一種提高賴氨酸發酵產量的新方法。

為了實現本發明目的，本發明的一種提高賴氨酸發酵產量的新方法，其是以谷氨酸棒桿菌(Corynebacterium?glutamicum)作為賴氨酸發酵菌種，將種子罐培養基和發酵罐培養基中的葡萄糖折換成等量木薯液化液，在流加碳源、氮源和微量元素的條件下進行發酵培養。

所述種子罐培養基為：木薯液化液100g/L、玉米漿3g/L、KH₂PO₄·3H₂O?15g/L、MgSO₄·7H₂O?0.4g/L、尿素4g/L、FeSO₄·7H₂O0.01g/L、MnSO₄·H₂O?0.01g/L；

所述發酵罐培養基為：木薯液化液140g/L、硫酸銨50g/L、KH₂PO₄·3H₂O?4.5g/L、MgSO₄·7H₂O?0.5g/L、FeSO₄·7H₂O?0.015g/L、MnSO₄·H₂O?0.015g/L、豆餅水解液30g/L、維生素H?150μg/L、維生素B11mg/L，pH?6.5-7.0；其中，木薯液化液的制備方法為8-10kg木薯粉加15-20kg水加3-5ml耐高溫а-淀粉酶升溫至95-98℃，維持30-40分鐘，離心得上清液；豆餅水解液的制備方法為豆粕磨粉加水拌勻，用鹽酸調pH值4.0-4.5，水浴蒸煮4～6個小時，溫度110-115℃，8-10h離心得上清即為豆餅水解液。

所述碳源為木薯液化液，所述氮源為硫酸銨，所述微量元素為FeSO₄·7H₂O、MnSO₄·H₂O、維生素H和維生素B1；流加碳源后，發酵液中還原糖含量為1-10g/L，流加氮源后發酵液中銨鹽含量為1-7g/L，流加微量元素后發酵液中FeSO₄·7H₂O含量為0.015g/L，MnSO₄·H₂O含量為0.015g/L，維生素H含量為150μg/L、維生素B1含量為1mg/L。

本發明中涉及的種子罐培養所采用的培養條件為：接種量1-3‰、溫度37±0.5℃、通風比1:0.5-1:0.7vvm、罐壓0.05-0.07Mpa、全程控制DO?30％以上、pH?6.90±0.02、周期12-14h。