[發明專利]鯉魚與團頭魴亞科間遠緣雜交的方法

有效

• 申請號: 201410771279.3
• 申請日: 2014-12-15
• 公開（公告）號: CN104585083A
• 公開（公告）日: 2015-05-06
• 發明（設計）人: 劉少軍;肖軍;王石;趙如榕;胡方舟;陶敏;張純;劉筠;羅凱坤
• 申請（專利權）人: 湖南師范大學
• 主分類號: A01K61/00
• 分類號: A01K61/00
• 代理公司: 長沙朕揚知識產權代理事務所(普通合伙) 43213
• 代理人: 楊斌

技術領域

本發明涉及魚類雜交方法，尤其涉及鯉科魚類中亞科間的遠緣雜交方法。

背景技術

含量測定親緣關系在種間或種間以上的雜交稱為遠緣雜交，是魚類性狀改良常用的方法。遠緣雜交作為一種重要的魚類遺傳育種和性狀改良方法，它可以整合整套外源基因，從而改變雜交后代基因的表達調控，使得雜交后代可能在生長速度、抗逆性、抗病性以及肉質等方面表現出雜種優勢。遠緣雜交根據不同的親本組合，可以形成在表型和遺傳型上都不同的不同類型的魚。如紅鯽與湘江野鯉的屬間遠緣雜交形成的雜交后代中F₁-F₂為二倍體雜交魚(2n＝100)，F₃-F₂₄為異源四倍體魚(4n＝200)；利用異源四倍體魚與有關二倍體魚交配，大規模形成了具有生長速度快、肉質鮮嫩、抗病力強等優點的三倍體魚(3n＝150)。紅鯽與團頭魴的亞科間遠緣雜交的F₁中形成了二倍體天然雌核發育紅鯽(2n＝100)、異源四倍體鯽魴(4n＝148)和異源三倍體鯽魴(3n＝124)；其中異源四倍體鯽魴通過自交形成了同源四倍體魚品系(4n＝200)。

鯉魚(Cyprinus?carpio?carpio)屬于鯉科、鯉亞科中的二倍體魚(2n＝100)，團頭魴(Megalobrama?amblycephala)屬于鯉科、鲌亞科中的二倍體魚(2n＝48)；在遺傳、分類和體形等生物學特征方面，鯉魚和團頭魴之間存在較大的差異，尤其是他們之間體細胞染色體數目差異很大，鯉魚的染色體數目為100，而團頭魴的染色體數目為48，而且不成倍性關系。至今國內外還沒有鯉魚與團頭魴亞科間遠緣雜交成功的報道，探索一種使鯉魚與團頭魴之間的雜交方法并對其后代的生物學特性進行研究分析具有重要的應用價值。

發明內容

本發明所要解決的技術問題是，克服以上背景技術中提到的不足和缺陷，提供一種受精率高、孵化率高、后代性狀優良、對遺傳育種具有重要意義的鯉魚與團頭魴亞科間遠緣雜交的方法。

為解決上述技術問題，本發明提出的技術方案為一種鯉魚與團頭魴亞科間遠緣雜交的方法，包括以下步驟：首先挑選性成熟特征明顯、體征良好的雌性鯉魚和雄性團頭魴作為親魚專池培育，然后在繁殖季節對所述親魚進行人工催產，挑選催產效果良好的親魚進行人工干法授精，授精完成后的胚胎于凈水孵化裝置中進行流水孵化，待魚苗孵化完成后進行飼養，再對飼養后的魚苗進行檢測、篩分，通過流式細胞DNA含量測定、腎組織染色體倍性檢測獲得鯉魚與團頭魴雜交后代，雜交后代包括二倍體天然雌核發育鯉魚、二倍體天然雌核發育鏡鯉、類鯽魚的二倍體魚和四倍體雜交魚。采用前述技術方案獲得的四種類型的雜交魚均具有體形優美、生長速度快、抗逆性強等優點，在新型優良魚類品系培育和遺傳育種方面具有重要價值。

上述的鯉魚與團頭魴亞科間遠緣雜交的方法，優選的，所述方法具體包括以下步驟：

(a)親魚的選擇和培育：在繁殖期前3～4個月，挑選性成熟特征明顯、體征良好的雌性鯉魚和雄性團頭魴分別作為遠緣雜交的母本親魚和父本親魚進行專池培育，保持水質良好；在繁殖期前一個月左右以精餌飼養，每隔2～3天流水刺激一次，促進親魚性腺發育成熟；體征良好的親魚一般表現為體型好、體色鮮艷、體質健壯、無病無傷；

(b)人工催產：在當年的5月中旬至6月上旬，當水溫穩定在20℃以上時，為所述親魚注射黃體素釋放激素類似物(LRH-A)與絨毛膜促性腺激素(HCG)的混合催產劑進行催產，所述黃體素釋放激素類似物的用量為6～10μg/kg(最優選10μg/kg)，絨毛膜促性腺激素的用量為500～800IU/kg(最優選600IU/kg)；先注射母本親魚，4～5h后再注射父本親魚，父本親魚的注射劑量減半；注射完畢后按1∶6～8的數量比將母本親魚、父本親魚放入同一產卵池中，然后視水情及時向池中沖水，尤其在產卵前3～4h，注入一定水量后，停止注水，讓魚在靜水中催產，直至其開始順利產卵和產精；注射時優選采用胸鰭基部無鱗處腹腔一針注射法，以提高親魚的存活率；

(c)授精孵化：挑選產卵順利的母本親魚，用帆布擔架固定，以便于操作和減少對母本親魚的損傷；然后與產精量大的父本親魚進行人工干法授精，受精卵置于水溫為20℃～21℃的凈水孵化裝置中進行流水孵化；