[發(fā)明專利]一種豬偽狂犬病毒強毒株和疫苗毒株鑒別檢測試紙

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410763138.7
• 申請日: 2014-12-12
• 公開（公告）號: CN104459144B
• 公開（公告）日: 2017-11-10
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 喬松林;楊繼飛;李青梅;郭軍慶;邢廣旭;柴書軍;萬博;解偉濤;王寅彪;劉肖;鄧瑞廣;張改平
• 申請（專利權(quán)）人: 河南省農(nóng)業(yè)科學(xué)院
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/569;G01N33/558
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及一種家畜疫病感染與免疫的鑒別檢測器具，特別是涉及一種豬偽狂犬病毒強毒和疫苗毒鑒別檢測試紙。

背景技術(shù)

偽狂犬病（(Pseudorabies，PR）是由偽狂犬病毒（Pseudorabies Virus，PRV）引起的多種動物共患傳染病，可感染牛、豬、犬、羊、狐貍和貓等。豬是偽狂犬病的傳染源和自然貯存宿主，豬感染PRV后表現(xiàn)為發(fā)熱，仔豬神經(jīng)癥狀、高死亡率，大中豬呼吸道癥狀，母豬流產(chǎn)等臨床特點。在2010年，偽狂犬病是我國規(guī)模化豬場進行疫病控制最為理想的疾病之一，許多豬場已經(jīng)達到免疫無感染狀態(tài)。然而在2011年，一些Bartha-K61疫苗免疫的豬場出現(xiàn)了變異的豬偽狂犬病病毒，表明傳統(tǒng)的gE基因缺失疫苗不能提供足夠的免疫保護。河南省豬群偽狂犬病的感染率自2005年以來呈現(xiàn)整體下降趨勢，臨床上以散發(fā)或非典型病例為主。但是，從2011年底開始，我省部分豬場突發(fā)偽狂犬疫情，很快在省內(nèi)各地爆發(fā)，廣泛流行；而且，部分豬場附近的羊、犬、貓、狐貍等動物也出現(xiàn)感染死亡狀況。因此，現(xiàn)階段我國豬偽狂犬病的防控變得更為棘手和復(fù)雜。

PRV屬于皰疹病毒科（Herpesviridae），a-皰疹病毒亞科（Alphaherpesvirinae）的成員，基因組為線性雙鏈DNA，大小約150 kb。整個PRV基因組至少含有70個基因，編碼70-100余種蛋白。目前研究發(fā)現(xiàn)PRV可編碼11個糖蛋白：gB、gC、gD、gE、gG、gH、gI、gK、gL、gM和gN。gB、gH、gL和gM皰疹病毒科中保守，而且gB、gH和gL對所有皰疹病毒在細胞培養(yǎng)物中進行復(fù)制都是必需的。gB蛋白能夠誘導(dǎo)中和抗體的產(chǎn)生，與免疫保護相關(guān)。PRV gE蛋白最早被稱為gI蛋白。1960年代篩選制備的PRV疫苗株如Bartha株及BUK株等均存在gE缺失。在二十世紀80年代中期，通過DNA重組技術(shù)構(gòu)建了gE缺失的PRV突變株；在此基礎(chǔ)上，將TK進行缺失使PRV病毒得到進一步致弱。許多gE缺失疫苗均能夠預(yù)防攻毒感染或減輕攻毒感染造成的臨床癥狀。雖然當(dāng)前也存在gC和gG缺失的PRV疫苗，但在許多國家僅允許豬群使用gE缺失疫苗。從1990年代到2011年底，我國80%以上豬群均使用了gE基因缺失疫苗Bartha進行免疫接種。gE疫苗和gE抗體診斷配套使用用于PRV凈化的前提是所有流行毒株均表達gE蛋白，而且流行株感染的動物均產(chǎn)生gE蛋白的抗體。目前幾乎所用PRV野毒株均表達gE蛋白。通過gE基因缺失疫苗與gE抗體診斷方法的聯(lián)合使用，一些歐洲國家如德國、奧地利、瑞典、丹麥和英國及美國已成功在家養(yǎng)豬群中凈化了豬偽狂犬病。我國政府在2011年制訂了《國家中長期動物疫病防治規(guī)劃（2012-2020年）》，提出到2015年，原種豬場豬偽狂犬病達到凈化標(biāo)準(zhǔn)；到2020年，全國所有種豬場豬偽狂犬病達到凈化標(biāo)準(zhǔn)的目標(biāo)。然而病原體的凈化是一項長期而且艱巨的任務(wù)。如果要實現(xiàn)完全凈化或接近凈化狀態(tài)可能需要100年時間甚至更長；例如美國的豬偽狂犬病首次出現(xiàn)在1909年，其凈化計劃始自1989年，到2005年絕大多數(shù)凈化項目得以完成。即便如此，野豬群中PRV病毒的存在對家豬再次感染PRV造成了很大的威脅。因此，建立簡便、快速、特異、敏感的鑒別診斷方法區(qū)分疫苗免疫動物及病毒感染動物十分必要。