[發明專利]一種豬瘟病卵黃抗體口服液及其制備方法

在審

• 申請號: 201410762716.5
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104491861A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 徐進;劉應鵬;郭俊清
• 申請（專利權）人: 鄭州后羿制藥有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61P31/14
• 代理公司: 鄭州中原專利事務所有限公司 41109
• 代理人: 張春;喬玉萍

技術領域

本發明屬于豬用生物制品技術領域，涉及一種豬瘟病卵黃抗體口服液及其制備方法。

背景技術

豬瘟俗稱“爛腸瘟”，是由黃病毒科豬瘟病毒屬的豬瘟病毒（CSFV）引起的一種急性、發熱、接觸性傳染病，具有高度傳染性和致死性。主要特征是高溫、微血管變性而引起全身出血、壞死、梗塞。豬瘟于1885年首先在美國發現，隨后傳播到世界各大洲。1903年美國獸醫學家德希尼茲和多賽特鑒定該病的病原是黃病毒科的瘟病毒屬（Pestivirus）中的豬瘟病毒，主要通過直接接觸或接觸污染的媒介物而發病；消化道、鼻腔粘膜和破裂的皮膚均是感染途徑。

卵黃抗體IgY是的一種免疫球蛋白Ig，IgY在功能上相當于哺乳動物IgG，但結構上有所不同，具有典型的的免疫球蛋白的空間構象。卵黃抗體具有很多優越性。（1）由于鳥類與哺乳類動物種系發生學的差距，鳥類更適于生產抗哺乳動物抗原的特異性抗體。卵黃抗體不會激發補體系統，不與抗哺乳動物抗原的抗體發生反應，不與哺乳動物和細菌的Fc受體結合，這在免疫診斷中具有重要意義。（2）卵黃抗體作為一種具有生物活性的免疫球蛋白，在貯存、生產、加工、攝食及消化過程中保證其穩定性是非常關鍵的。多項試驗表明，IgY具有較好的穩定性，耐酸、耐堿、耐熱。卵黃抗體較易保存，4℃條件下存放5年或室溫條件下存放6個月對抗體活性無明顯影響。

發明內容

本發明提供一種豬瘟病卵黃抗體口服液及其制備方法，解決注射用的豬瘟病卵黃抗體使用不方便的問題。

本發明的目的是通過以下形式實現的：

一種豬瘟病卵黃抗體口服液，包括以下按照體積比計算的原料：含卵黃抗體的全蛋水溶液95-105、辛酸0.2-0.3、甲醛0.2-0.3、硫柳汞0.01-0.02；還包括800-1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。

制備步驟是：

1）采用豬瘟細胞滅活疫苗對雞只進行強化免疫：采用三次免疫程序，每次間隔10天，每只雞每次疫苗用量為2ml，當抗體效價達到1：（128-256）時，進行高免蛋收集；

2）使用0.1-0.2%新潔爾滅對高免蛋進行消毒；

3）將2）中高免蛋的全蛋液進行乳化，乳化時間7-10min，然后加入pH為4.2-4.3的、溫度為4-6℃的鹽酸酸化水，鹽酸酸化水的加入量為全蛋液體積的5.5-6.5倍，混勻后，降溫至3-5℃，靜置18-24小時；

4）取3）中的上層清液，升溫到25-32℃，加入辛酸，攪拌1-2h，然后靜置10-12h，過濾；其中辛酸體積量：上層清液體積量為（0.2-0.3）：（95-105）；

5）加入甲醛、硫柳汞、青鏈霉素，使卵黃抗體的全蛋水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的體積比為（95-105）：（0.2-0.3）：（0.2-0.3）：（0.01-0.02），青鏈霉素的含量為800-1000單位/毫升口服液；

6）分裝，保存。

步驟4）過濾時依次通過1.0mm、0.45mm、0.22mm的濾膜進行過濾。

本發明通過對高免蛋全蛋提取、低溫酸化處理、辛酸處理后得到澄清卵黃抗體口服液。本發明將全蛋使用到卵黃抗體的提取中，可以直接在臨床上進行口服使用，蛋清中含有大量的各類蛋白質，可充分利用高免蛋的價值，提高動物機體的免疫力和應激能力，生物利用度高，具有生物活性不受影響的優點。

具體實施方式

實施例1：

一種豬瘟病卵黃抗體口服液的配方包括以下原料：含卵黃抗體的全蛋水溶液105?L、辛酸0.2?L、甲醛0.3?L、硫柳汞0.02?L，以及1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。

其制備方法包括以下步驟：

1）采用市售的豬瘟細胞滅活疫苗進行強化免疫，每只雞每次疫苗用量為2ml，每次間隔10天，進行三次免疫程序，當抗體效價達到1：256時，開始收集高免蛋。

2）將收集高免蛋整理，0.2%新潔爾滅消毒，備用。

3）水稀釋法酸化處理：將2）步高免蛋全蛋打入巴氏罐體內進行充分乳化，乳化時間7min，然后將乳化后的全蛋液加入pH為4.2、溫度為4℃的鹽酸酸化水，鹽酸酸化水加入量為全蛋液體積的6倍，混勻，放置4℃環境中18小時靜置沉淀，取上清液；其中，鹽酸酸化水是在水中加入鹽酸使其PH值達到4.2。

4）辛酸處理；將步驟3）的上清液，即含卵黃抗體的全蛋水溶液進行稱量，升溫到25℃，加入辛酸，充分混勻1h，然后靜置10h；其中，按體積比，上層清液：辛酸=105：0.2；