[發(fā)明專利]一種豬圓環(huán)病卵黃抗體口服液及其制備方法

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410762711.2
• 申請日: 2014-12-14
• 公開（公告）號: CN104383537A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 徐進(jìn);郭俊清
• 申請（專利權(quán)）人: 鄭州后羿制藥有限公司
• 主分類號: A61K39/42
• 分類號: A61K39/42;A61K9/08;A61P31/20;A61K31/7036;A61K31/43
• 代理公司: 鄭州中原專利事務(wù)所有限公司 41109
• 代理人: 張春;喬玉萍

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于豬用生物制品技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種豬圓環(huán)病卵黃抗體口服液及其制備方法。

背景技術(shù)

豬圓環(huán)病毒，（Porcine?circovirus,縮寫：PCV）是迄今發(fā)現(xiàn)的一種最小的動物病毒?，F(xiàn)已知PCV有兩個血清型，即PCV1和PCV2，PCV2為致病性的病毒，它是斷奶仔豬多系統(tǒng)衰竭綜合征（Postweaning?Multisystemic?Wasting?Syndrome,?PMWS）的主要病原。豬對PCV2具有較強的易感性，感染豬可自鼻液、糞便等廢物中排出病毒，經(jīng)口腔、呼吸道途徑感染不同年齡的豬。懷孕母豬感染PCV2后，可經(jīng)胎盤垂直傳播感染仔豬。

卵黃抗體IgY是的一種免疫球蛋白Ig，IgY在功能上相當(dāng)于哺乳動物IgG，但結(jié)構(gòu)上有所不同，具有典型的的免疫球蛋白的空間構(gòu)象。卵黃抗體具有很多優(yōu)越性。（1）由于鳥類與哺乳類動物種系發(fā)生學(xué)的差距，鳥類更適于生產(chǎn)抗哺乳動物抗原的特異性抗體。卵黃抗體不會激發(fā)補體系統(tǒng)，不與抗哺乳動物抗原的抗體發(fā)生反應(yīng)，不與哺乳動物和細(xì)菌的Fc受體結(jié)合，這在免疫診斷中具有重要意義。（2）卵黃抗體作為一種具有生物活性的免疫球蛋白，在貯存、生產(chǎn)、加工、攝食及消化過程中保證其穩(wěn)定性是非常關(guān)鍵的。多項試驗表明，IgY具有較好的穩(wěn)定性，耐酸、耐堿、耐熱。卵黃抗體較易保存，4℃條件下存放5年或室溫條件下存放6個月對抗體活性無明顯影響。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明提供一種豬圓環(huán)病卵黃抗體口服液及其制備方法，解決注射用的豬圓環(huán)病卵黃抗體使用不方便的問題。

本發(fā)明的目的是通過以下形式實現(xiàn)的：

一種豬圓環(huán)病卵黃抗體口服液，包括以下按照體積比計算的原料：含卵黃抗體的全蛋水溶液95-105、辛酸0.2-0.3、甲醛0.2-0.3、硫柳汞0.01-0.02；還包括800-1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。

其制備步驟是：

1）采用市售豬圓環(huán)病毒滅活疫苗對雞只進(jìn)行強化免疫：采用三次免疫程序，每次間隔10天，每只雞每次疫苗用量為2ml，當(dāng)抗體效價達(dá)到1：（128-256）時，進(jìn)行高免蛋收集；

2）使用0.1-0.2%新潔爾滅對高免蛋進(jìn)行消毒；

3）將2）中高免蛋的全蛋液進(jìn)行乳化，乳化時間7-10min，然后加入pH為4.2-4.3的、溫度為4-6℃的鹽酸酸化水，鹽酸酸化水的加入量為全蛋液體積的5.5-6.5倍，混勻后，降溫至3-5℃，靜置18-24小時；

4）取3）中的上層清液，升溫到25-32℃，加入辛酸，攪拌1-2h，靜置10-12h，過濾；其中辛酸體積量：上層清液體積量為（0.2-0.3）：（95-105）；

5）加入甲醛、硫柳汞、青鏈霉素，使卵黃抗體的全蛋水溶液：辛酸：甲醛：硫柳汞的體積比為（95-105）：（0.2-0.3）：（0.2-0.3）：（0.01-0.02），青鏈霉素的含量為800-1000單位/毫升口服液；

6）分裝，保存。

步驟4）過濾時依次通過1.0mm、0.45mm、0.22mm的濾膜進(jìn)行過濾。

本發(fā)明通過對高免蛋全蛋提取、低溫酸化處理、辛酸處理后得到澄清卵黃抗體口服液。本發(fā)明將全蛋使用到卵黃抗體的提取中，可以直接在臨床上進(jìn)行口服使用，蛋清中含有大量的各類蛋白質(zhì)，可充分利用高免蛋的價值，提高動物機體的免疫力和應(yīng)激能力，生物利用度高，具有生物活性不受影響的優(yōu)點。

具體實施方式

實施例1：

一種豬圓環(huán)病卵黃抗體口服液的配方包括以下原料：含卵黃抗體的全蛋水溶液95?L、辛酸0.2?L、甲醛0.3?L、硫柳汞0.02?L，以及1000單位/毫升口服液的青鏈霉素。

其制備方法包括以下步驟：

1）采用市售的豬圓環(huán)病毒滅活疫苗進(jìn)行強化免疫，每只雞每次疫苗用量為2ml，每次間隔10天，進(jìn)行三次免疫程序，當(dāng)抗體效價達(dá)到1：256時，開始收集高免蛋。

2）將收集高免蛋整理，0.2%新潔爾滅消毒，備用。

3）水稀釋法酸化處理：將2）步高免蛋全蛋打入巴氏罐體內(nèi)進(jìn)行充分乳化，乳化時間7min，然后將乳化后的全蛋液加入pH為4.2、溫度為4℃的鹽酸酸化水，鹽酸酸化水加入量為全蛋液體積的6倍，混勻，放置4℃環(huán)境中18小時靜置沉淀，取上清液；其中，鹽酸酸化水是在水中加入鹽酸使其PH值達(dá)到4.2。

4）辛酸處理；將步驟3）的上清液，即含卵黃抗體的全蛋水溶液進(jìn)行稱量，升溫到25℃，加入辛酸，充分混勻1h，然后靜置10h；其中，按體積比，上層清液：辛酸=95：0.2；