[發(fā)明專利]一種大葉白蠟樹(shù)種子中降血糖物質(zhì)裂環(huán)烯醚萜苷類化合物的提取制備方法

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410759327.7
• 申請(qǐng)日: 2014-12-06
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104758365A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-07-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 白乃生;劉慶超;張?jiān)奇?/a>;薛偉明;白璐;張麗;郭甜甜;溫慧云;郭森
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西北大學(xué)
• 主分類號(hào): A61K36/63
• 分類號(hào): A61K36/63;A61P3/10;A61K131/00
• 代理公司: 暫無(wú)信息
• 代理人: 暫無(wú)信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及降血糖物質(zhì)的提取制備領(lǐng)域，尤其涉及一種大葉白蠟樹(shù)種子種降血糖物質(zhì)的提取制備方法。

背景技術(shù)

大葉白蠟樹(shù)(Fraxinus?rhynchophylla?Hance)又稱作花曲柳、大葉梣、苦櫪白蠟樹(shù)，屬于木樨科白蠟樹(shù)屬，產(chǎn)于東北和黃河流域各省，蘇聯(lián)、朝鮮也有分布。大葉白蠟樹(shù)是落葉大喬木，高12-15米，樹(shù)皮灰褐色或暗灰色，幼枝灰綠色，光滑，老時(shí)淺裂，花期4-5月，果期9-10月。大葉白蠟樹(shù)木材堅(jiān)韌、堅(jiān)固耐用，為重要農(nóng)具用材，枝條為編制材料，是護(hù)堤、固沙，及城市綠化的良好樹(shù)種。其皮《中國(guó)藥典》收錄為秦皮，為常用中藥，具有清熱燥濕、明目、收澀的功效，用于泄瀉、熱痢、目赤腫痛、赤白帶下，目生翳膜。

大葉白蠟樹(shù)種子，據(jù)《藥物之園》載：“大葉白蠟樹(shù)籽是一種樹(shù)的種子，葉與巴旦杏葉相似，翅果眾多，長(zhǎng)約3指，形狀為倒被針形，與麻雀舌頭相似，故稱之為‘力薩努里’即為漢語(yǔ)中的麻雀舌頭之意，翅果內(nèi)有種子，種子棕黑色，仁白黃色，味辛，平喘止咳、祛寒止痛、利尿排石等。治哮喘，舊咳，腹痛，子宮疼痛，尿少結(jié)石等。”《注醫(yī)典》記載：“安心除悸，增強(qiáng)性欲等。”《拜地依藥書(shū)》記載：“填精壯腰，溶石排石，治腰部酸痛，內(nèi)臟結(jié)石等。”中藥材基源取其干燥種子，藥效為生干生熱，填精壯陽(yáng)，補(bǔ)腎固精，補(bǔ)神安心，止咳平喘，利尿消石，祛寒助孕；主治濕寒性或黏液質(zhì)性疾病，如腰痛陽(yáng)痿，造精早泄，神衰心悸，久咳氣喘，尿閉結(jié)石，宮寒不孕。

對(duì)白蠟樹(shù)屬植物的化學(xué)研究發(fā)現(xiàn)了大量化合物的存在，如香豆素類、裂環(huán)環(huán)烯醚萜類、苯基乙醇類、木脂素類、黃酮類和單酚類等，其中香豆素類和裂環(huán)環(huán)烯醚萜類成分為該屬植物標(biāo)記性成分。已分離到的香豆素類成分典型的有七葉亭、秦皮素、秦皮醇等。截止目前，在白蠟樹(shù)屬植物中發(fā)現(xiàn)的裂環(huán)烯醚萜類化合物已超過(guò)50種。國(guó)內(nèi)外對(duì)于大葉白蠟樹(shù)化學(xué)成分的研究報(bào)道的很多，但是對(duì)于白蠟樹(shù)種子化學(xué)成分的研究較少。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明的目的在于提供一種大葉白蠟樹(shù)種子種降血糖物質(zhì)的提取制備方法，用以克服上述技術(shù)缺陷。

為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明提供一種大葉白蠟樹(shù)種子中降血糖物質(zhì)的提取制備方法，該具體過(guò)程為：

步驟a，大葉白蠟樹(shù)種子粉碎后，用75％乙醇滲濾提取兩次，每次浸泡三天，得到75％醇提溶液；?

步驟b，取提取液經(jīng)微膜過(guò)濾后做HPLC檢測(cè)；

步驟c，75％乙醇提取液濃縮后得到浸膏共1.28kg，用水分散，石油醚萃取，石油醚層溶液濃縮得到浸膏，將其擱置，水層繼續(xù)用乙酸乙酯萃取，濃縮乙酸乙酯層得到浸膏；

乙酸乙酯萃取物，經(jīng)硅膠(100-200目)柱色譜，以石油醚-丙酮梯度洗脫，乙醇沖柱，分為8份；每份經(jīng)硅膠(200～300目)柱色譜，以石油醚-丙酮梯度洗脫，乙醇沖柱，洗脫過(guò)程配合TLC檢測(cè)分析，合并相同部分洗脫液并分別蒸干，得到分離后的化合物；其中得到裂環(huán)烯醚萜苷類化合物。

進(jìn)一步地，上述步驟b中的色譜條件：柱溫：30℃；柱壓：19.11MPa；流速：1mL/min；波長(zhǎng)：240nm；進(jìn)樣量：10μL；色譜柱：Synergi?4u?Hydro-RP?80R；柱長(zhǎng)：250×4.6mm?4μm；流動(dòng)相A：1％磷酸水溶液，流動(dòng)相B：乙腈；梯度洗脫程序?yàn)椋?min：A為80％，B為20％，30min：A為75％，B為25％。

進(jìn)一步地，上述步驟b中，取上述75％醇提液，經(jīng)微膜過(guò)濾后做HPLC檢測(cè)，得到提取液HPLC譜圖，取已經(jīng)分離得到的純品：oleoside?dimethyl?ester、ligstroside、nuzhenide、salidro-side、GI3、GI5少量，分別配置成一定濃度的溶液，經(jīng)微膜過(guò)濾后分別做HPLC檢測(cè)，得到各個(gè)純品HPLC譜圖，經(jīng)過(guò)保留時(shí)間及紫外圖譜對(duì)照，初步確定提取液譜圖上oleoside?dimethyl?ester、ligstroside、nuzhenide、salidroside、GI3、GI5在譜圖上的出峰位置；

然后向上述提取液中加入少量oleoside?dimethyl?ester、ligstroside、nuzhenide、salidroside、GI3、GI5；做HPLC檢測(cè)，得到譜圖各個(gè)峰均變高，基本確定提取液譜圖上oleoside?dimethyl?ester、ligstroside、nuzhenide、salidroside、GI3、GI5在譜圖上?的出峰位置。

與現(xiàn)有技術(shù)相比較本發(fā)明的有益效果在于：本發(fā)明對(duì)大葉白蠟樹(shù)種子的組分的提取率高，能夠有效提取具有降血糖作用的裂環(huán)烯醚萜苷類化合物。