[發(fā)明專利]一株微小擬雙孢藻及其應(yīng)用和培養(yǎng)方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410758297.8
• 申請(qǐng)日: 2014-12-12
• 公開（公告）號(hào): CN104498361A
• 公開（公告）日: 2015-04-08
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 韓吉昌;張琳;王松;趙璐;潘克厚
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 中國海洋大學(xué)
• 主分類號(hào): C12N1/12
• 分類號(hào): C12N1/12;C12P7/64;C12R1/89
• 代理公司: 濟(jì)南泉城專利商標(biāo)事務(wù)所37218
• 代理人: 褚慶森

技術(shù)領(lǐng)域

發(fā)明屬于生物能源領(lǐng)域，涉及一種微小擬雙孢藻及其應(yīng)用，更具體地，本發(fā)明涉及一株新的微小擬雙孢藻藻株，其油脂含量高，可用于制備生物柴油。

背景技術(shù)

由于地球上的化石能源儲(chǔ)量正日益減少，石油資源很有可能會(huì)在短時(shí)間內(nèi)便迅速枯竭。化石能源的蘊(yùn)藏量并不是無窮無盡的，易于開采和利用的化石能源儲(chǔ)量已經(jīng)所剩無幾，剩余儲(chǔ)量因?yàn)殚_發(fā)難度越來越大，從而失去繼續(xù)開采的價(jià)值。在世界能源消費(fèi)以石油為主導(dǎo)的情況下，如果能源消費(fèi)結(jié)構(gòu)仍不變化，那么就會(huì)發(fā)生新一代的能源危機(jī)。煤炭資源雖比石油資源儲(chǔ)存量要大，但也不是取之不盡用之不竭的。目前除了煤炭之外，能夠大規(guī)模利用開發(fā)的能源還是很少。雖然太陽能的資源是取之不竭源源不斷的，但因其開發(fā)利用所耗成本高昂，所以在短時(shí)間內(nèi)仍不可能迅速發(fā)展得到廣泛應(yīng)用。

因此人類必須及時(shí)找到一種可以代替非再生礦物能源的新能源，從而將注意力轉(zhuǎn)移到新的能源結(jié)構(gòu)上，盡早探索、研究開發(fā)利用新能源資源，這樣才能讓人類的生活在安定和諧的情況下持續(xù)發(fā)展下去，而生物柴油正好可以將此問題解決。像生物柴油這種可再生的碳中性能源，有利于環(huán)境和經(jīng)濟(jì)的可持續(xù)發(fā)展。目前的研究也表明了微藻是能夠完全替代化石柴油的唯一生物柴油。生物柴油和化石燃料本質(zhì)上都來源于光合作用產(chǎn)物。綠色植物進(jìn)行光合作用，將水、二氧化碳和其他無機(jī)物依靠光能合成各種有機(jī)物并釋放出氧氣，動(dòng)物和微生物才能生長繁殖。各種生物的油脂都是從植物合成的有機(jī)物轉(zhuǎn)化來的。任何形式的來自動(dòng)物、植物和微生物的脂肪酸都能用作生物柴油的原料。因此，油脂含量高的藻種才是制備生物柴油的最重要原料。

利用微藻加工制備生物柴油的關(guān)鍵，一是提高原始藻種的油脂含量，二是通過優(yōu)化培養(yǎng)盡可能提高微藻細(xì)胞的油脂含量。在單細(xì)胞微藻的培養(yǎng)過程中，培養(yǎng)基成分、溫度、光照強(qiáng)度、pH、培養(yǎng)方式、通氣量、鹽度等均會(huì)影響微藻的生長以及其脂肪酸的含量與組成。溫度、光強(qiáng)能影響微藻的光合作用和呼吸作用，從而對(duì)其生長及體內(nèi)生化成分產(chǎn)生影響。微藻具有生長速率快、收獲時(shí)期短、光合利用率高等特點(diǎn)，利用微藻作為生物柴油原材料有很高的應(yīng)用前景。高油脂含量、高生長速率的藻株是該環(huán)節(jié)的關(guān)鍵步驟。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是：第一是提供一種微小擬雙孢藻新種；第二是提供微小擬雙孢藻在生物柴油生產(chǎn)中的應(yīng)用；第三是在于該新種存在種內(nèi)的內(nèi)含子存在/缺失多樣性，可以作為研究內(nèi)含子進(jìn)化的模式生物；第四在于提供上述擬雙孢藻的培養(yǎng)方法。

為解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用的技術(shù)方案是：

一種微小擬雙孢藻，從黃海海水中分離得到的，分類命名為微小擬雙孢藻Amphikrikos?minutum，于?2014年10月?22日?保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會(huì)普通微生物中心，菌種保藏登記號(hào)為CGMCC?No.?9815。

所述擬雙孢藻的采集方法為浮游植物脫網(wǎng)；分離方法采用微吸管吸取、逐級(jí)稀釋分離及平板涂布法。

培養(yǎng)方法，其具體操作步驟如下：在海水F/2培養(yǎng)基中富集培養(yǎng)微藻，初始接種密度為1×10^5?個(gè)·mL^-1，置于光暗比為?14h∶10h，?光照強(qiáng)度為?1100lux，?溫度為?25℃，?相對(duì)濕度為?70％~80%的人工氣候箱中培養(yǎng)1-3周，離心微小擬雙孢藻藻液。收獲擬雙孢藻。優(yōu)選的，人工氣候箱中培養(yǎng)2周。

上述的F/2培養(yǎng)基中每1L海水中含有以下物質(zhì)：NaNO₃：75毫克；NaH₂PO₄·H₂O：5毫克；Na₂SiO₃·9H₂O：20毫克；Na₂EDTA：4.36毫克；FeCl₃·6H2O：3.16毫克；CuSO₄·5H₂O：0.01毫克；ZnSO₄·7H₂O：0.023毫克；CoCL₂·6H₂O：0.012毫克；MnCL·4H₂O：0.18毫克；Na₂M_OO₄·2H₂O：0.07毫克；維生素B1：0.1微克；維生素B12：0.5微克；生物素：0.5微克。

所述的微小擬雙孢藻在制備生物柴油上的應(yīng)用。

所述的微小擬雙孢藻在作為研究內(nèi)含子進(jìn)化的模式生物上的應(yīng)用。