[發明專利]自發酵液中提取恩拉霉素的方法

有效

• 申請號: 201410752313.2
• 申請日: 2014-12-11
• 公開（公告）號: CN104447958B
• 公開（公告）日: 2019-05-10
• 發明（設計）人: 陳劍慧;孫玫;林永彬;劉懷宏;羅小芹;韓勤更
• 申請（專利權）人: 新疆天富陽光生物科技有限公司;浙江浙大陽光科技有限公司
• 主分類號: C07K7/08
• 分類號: C07K7/08;C07K1/36;C07K1/34;C07K1/30
• 代理公司: 浙江杭州金通專利事務所有限公司 33100
• 代理人: 徐關壽

本發明公開了一種一種自發酵液中提取恩拉霉素的方法，包括恩拉霉素發酵液滅活、板框過濾濕菌體、濕菌體經搖擺顆粒機制粒，制取棕紅色提取液、制取淡黃色脫色液、制取濃縮液、結晶、得到白色粉末狀產品等步驟。本發明提取收率高，產品純度高，工藝簡潔，流程短，投資少，易投產。

技術領域

本發明涉及一種提取恩拉霉素的方法。

背景技術

恩拉霉素對革蘭氏陽性菌有很強的抑制作用，其敏感細菌主要有金黃色葡萄球菌等各種革蘭氏陽性球菌、枯草桿菌、炭蛆桿菌破傷風梭菌、肉毒梭菌、產氣莢膜梭菌等。長期使用后不易產生抗藥性，不易被動物吸收，畜禽體內殘留很少。恩拉霉素能改變腸道內的細菌群落分布，有利于飼料營養成份的消化吸收，促進動物增重和提高飼料利用率，因此被世界上許多國家推薦作為抗生素促生長劑。恩拉霉素是放線菌發酵產生的一種由不飽和脂肪酸和十幾種氨基酸組成的多肽類抗生素，主要存在于發酵菌體細胞內。目前恩拉霉素商品主要為預混劑，市場上的產品有4%和8%兩種含量的恩拉霉素預混劑，無直接自發酵液中提取恩拉霉素精品的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種提取收率高，產品純度高的自發酵液中提取恩拉霉素的方法。

本發明的技術解決方案是：

一種自發酵液中提取恩拉霉素的方法，其特征是：包括下列步驟：

（1）恩拉霉素發酵液1000L，發酵單位8256u/ml，含恩拉霉素8.256㎏；發酵液加熱至75-80℃，保溫30min，滅活，然后降溫至45-50℃待用；

（2）滅活發酵液經板框過濾，并用150L純化水套洗，然后用空氣吹至無水滴出，得到濕菌體200.4㎏；

（3）濕菌體經搖擺顆粒機制粒，加入75%乙醇1200L，轉速30-50轉/分鐘攪拌下，加入亞硫酸鈉120g，用15%HCl溶液調節PH3.0，轉速30-50轉/分鐘攪拌2h，抽濾，濾餅再用460L75%乙醇淋洗，抽干，得到棕紅色提取液1605L，恩拉霉素含量為4941.2u/ml；

（4）萃取液用10%NaOH溶液調PH8.0，加入藥用活性炭16㎏, 轉速30-50轉/分鐘攪拌脫色1h，抽濾，用100L純化水洗滌活性炭，抽干；濾液再用0.45um的精密過濾器復濾，得到淡黃色脫色液1700L；

（5）用15%HCl溶液調節脫色液PH5.0，溫度45～55℃、真空度-0.085MPa濃縮，得到濃縮液205升，恩拉霉素含量為37750u/ml；

（6）攪拌轉速10-30轉/分鐘，緩慢降溫至5～8℃，結晶10h；離心，用95%乙醇洗滌晶體，濕晶體經45℃、-0.085MPa干燥8h，得到白色粉末狀產品7.56㎏，產品含量970u/mg。

本發明特點：

1、生產過程中添加抗氧化劑亞硫酸鈉，防止恩拉霉素在提取過程中被氧化，減少色素的產生，從而提高提取收率，產品純度高。

2、采用乙醇自發酵液中萃取恩拉霉素，無有害氣體產生，同時乙醇可以回收循環利用，降低生產成本。

3、與樹脂法提取工藝比較，僅使用少量酸堿，廢水排放少，有利于環境保護。

4、該項技術生產工藝簡潔，流程短，投資少，易投產。

下面結合實施例對本發明作進一步說明。

具體實施方式

一種自發酵液中提取恩拉霉素的方法，包括下列步驟：

1、恩拉霉素發酵液1000L，發酵單位8256u/ml，含恩拉霉素8.256㎏。

發酵液加熱至75-80℃，保溫30min，滅活，然后降溫至45-50℃待用。