[發明專利]選育納豆芽孢桿菌與干酪乳桿菌共發酵制備富含納豆激酶和吡咯喹啉醌的發酵羊乳的方法

在審

• 申請號: 201410751480.5
• 申請日: 2014-12-10
• 公開（公告）號: CN104430853A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 吳淵;鄧惟;張哲滔
• 申請（專利權）人: 杭州元佩特生物科技有限公司
• 主分類號: A23C9/127
• 分類號: A23C9/127;C12N15/03;C12N15/01;C12R1/07;C12R1/245
• 代理公司: 杭州天勤知識產權代理有限公司 33224
• 代理人: 胡紅娟

技術領域

本發明涉及微生物工程與發酵領域，具體涉及一種選育干酪乳桿菌與納豆芽孢桿菌共發酵制備富含納豆激酶(NK)和吡咯喹啉醌(PQQ)的發酵羊乳的方法。

背景技術

納豆由大豆經納豆芽孢桿菌(Bacillus?natto)發酵而成，具有多重生理功效：

①納豆對心血管系統的作用：納豆中一種標志性生理活性物質納豆激酶(Nattokinase，NK)是能夠溶解血栓的蛋白質，由275個氨基酸殘基組成，分子量27KD左右，無毒、無副作用，是一種絲氨酸蛋白酶，其溶栓效果甚至超過溶栓制劑尿激酶。納豆激酶除具有直接溶栓作用外，還具有促進靜脈內皮細胞產生纖維蛋白溶酶原激活劑的能力，從而間接表現其溶栓活性。納豆中亞油酸占全脂質的50％，亞油酸能夠降低血漿中膽固醇含量，有預防動脈硬化、心臟病和高血壓的功效，具有血栓溶解作用；

②納豆對消化系統的作用：大豆蛋白質經納豆酶的作用轉化成可溶性多肽和氨基酸，有利于人體吸收。1g納豆中含有10億個以上納豆菌，納豆菌繁殖快，能消耗腸道中的氧，可以抑制引起腸內異常發酵的痢疾桿菌等腐敗菌，促進乳酸菌繁殖，調節腸內細菌平衡，預防痢疾、腸炎和便秘等。大豆經過納豆菌發酵蓄積了大量蛋白酶、淀粉酶、脂肪酶、酯酶、纖維素酶和脲酶等酶群，這些生物酶在消化系統中能夠有效調理促進消化吸收。納豆芽孢桿菌在通過分解利用大豆蛋白進行繁殖的過程中，可以產生大量酵素、維生素、多聚谷氨酸和多聚果糖等粘性物質，其被覆在胃腸粘膜表面起到保護作用，飲酒時可緩解酒醉。納豆菌還能殺死腸道出血性大腸桿菌；

③納豆對免疫系統的作用：通過接種納豆菌的動物實驗發現，納豆可以提高機體抵抗力，排除侵入的葡萄球菌，還可以誘發機體干擾素生成，增強機體免疫力；納豆中含有活性物質如皂草甙、維生素B₂、維生素E等，每天食用可除去體內致癌物質，預防癌癥發生，并可軟化血管，促進肌膚光滑；

④促進骨骼發育：維生素K₂可促進鈣與蛋白質結合從而促進骨骼形成，在骨骼形成過程中起著重要作用，而納豆中維生素K₂含量是其他發酵食品的數百倍，有預防骨質疏松、腰痛等老年病的功效。

近年發現納豆還具有其它更豐富廣泛的生理功效，源于其另一種標志性生理活性物質——吡咯喹啉醌(pyrroloquinoline?quinone，PQQ)，它是繼黃素核苷酸和煙酰胺核苷酸之后在細菌脫氫酶中發現的第三種輔基，化學名稱為4,5-二氫-4,5-二氧化-1-氫吡咯(2,3f)醌-2,7,9-三羧酸，又名Methaxatin。雖然自然條件下僅少數細菌如Methylovorus、Deinococcus?radiodurans、Gluconobacter?oxydans、Klebsiella?pneumoniae等能夠合成PQQ，但在各種植物、動物以及人體內都發現含有微量PQQ。日本科學家測定了26種常見食物中的PQQ含量，發現1克食物中PQQ含量在3.65-61納克不等，例如，蔬菜中的歐芹、青椒，水果中的奇異果、木瓜，飲品中的綠茶、烏龍茶，以及人們常吃的豆腐。值得注意的是，日本傳統食物納豆當中PQQ含量最高，達到61納克/克。

PQQ作為一種普遍存在于動物和植物組織中的氧化還原酶輔基，雖然含量非常低，但作用重要，不僅是一種新發現的線粒體呼吸鏈組分，參與催化生物體內氧化還原反應，還具有非常多樣的生物活性，缺乏時會引起哺乳動物諸多代謝障礙，被認為是一種新型維生素。PQQ對哺乳動物的主要生理作用有：

①全面提高人體免疫功能：PQQ作為人類發育的必要因子，能刺激人體細胞生長，尤其是激活人體B細胞、T細胞，提高人體免疫功能；

②防治肝損傷：PQQ能顯著降低血清膽紅素和谷丙轉氨酶水平，調理肝損傷，對肝臟疾病有極好療效；

③減少自由基對人體的傷害：PQQ是一種氧化還原酶輔基，參與生物體內氧化還原反應，能有效清除體內自由基，減少自由基對人體傷害所引發的各種疾病，如心臟病、癌癥以及各類炎癥；

④調理各種神經系統疾病：PQQ在體內能促進神經因子合成，調理各種神經系統疾病；

⑤促進氨基酸吸收：PQQ是醌蛋白酶的輔基，參與呼吸鏈電子傳遞，在人體內能促進氨基酸吸收；

⑥促進生長因子合成：生長因子是人類生長的激素，PQQ能刺激人體細胞生長，增加細胞密度，微量PQQ就能提高生物體組織的代謝能力和生長機能；

⑦防治老年癡呆癥：PQQ具有修復神經纖維、活化神經元、激活休眠神經細胞的能力，能有效防治老年癡呆癥和改善記憶力；