[發(fā)明專利]黃蜀葵花生物總堿提取物及其制備方法與應(yīng)用

有效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410745255.0
• 申請日: 2014-12-08
• 公開（公告）號: CN104523772B
• 公開（公告）日: 2017-12-05
• 發(fā)明（設(shè)計）人: 宋必衛(wèi);俞巧麗;章方珺
• 申請（專利權(quán)）人: 浙江工業(yè)大學(xué)
• 主分類號: A61K36/185
• 分類號: A61K36/185;A61P29/00;A61P25/00
• 代理公司: 杭州天正專利事務(wù)所有限公司33201
• 代理人: 黃美娟,王兵

(一)技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體涉及黃蜀葵花生物總堿提取物及其制備方法，以及在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。

(二)背景技術(shù)

中成藥在我國醫(yī)藥產(chǎn)業(yè)中有及其重要的地位。多數(shù)中藥產(chǎn)品有制劑藥效成分不清楚、療效不確切、制取工藝原始、質(zhì)量難控制等問題。采用現(xiàn)代方法研究，明確藥效部位或有效成分，通過二次開發(fā)，達到去粗取精，質(zhì)量可控，安全有效，是中藥現(xiàn)代化的必由之路。

疼痛是臨床疾病最常見的重要癥狀，給病人帶來身體痛苦和精神重負，需要鎮(zhèn)痛藥治療。目前的化學(xué)鎮(zhèn)痛藥物主要由兩大類組成，即以阿司匹林為代表的解熱鎮(zhèn)痛藥和嗎啡為代表的成癮性鎮(zhèn)痛藥，均有嚴重不足：解熱鎮(zhèn)痛藥對嚴重疼痛藥效差，而且有胃出血，潰瘍嚴重胃腸道毒副反應(yīng)；成癮性鎮(zhèn)痛藥療效好但有成癮、呼吸抑制等嚴重不良反應(yīng)，因此需要尋找、開發(fā)高效低毒新藥以滿足日益增長的臨床需求。

黃蜀葵(Abelmoschl manihot L medic)花為錦葵科植物黃蜀葵的干燥花。性味甘寒滑，無毒，具有清利濕熱，消炎解毒之功效，內(nèi)服主治五淋，水腫；外用治療癰疽腫毒，燙傷，其花蕾在一些地方作為蔬菜食用，安全無毒。從黃蜀葵花中提取的總黃酮(范麗,董六一.黃蜀葵花總黃酮鎮(zhèn)痛作用研究[J].中藥藥理與臨床,2003,19(1):12-14.)有良好的鎮(zhèn)痛作用。其中黃酮類化合物金絲桃甙對口腔潰瘍有良好鎮(zhèn)痛作用(司徒曼麗,馬傳庚,宋必衛(wèi),等.黃蜀葵結(jié)晶Ⅲ對口腔潰瘍鎮(zhèn)痛作用的研究[J].華西口腔醫(yī)學(xué)雜志,1985,3(3):129-31.)，被認為是其有效單體成分(宋必衛(wèi),馬傳庚,徐叔云.金絲桃甙對抗緩激肽,鉀離子和組織胺致痛作用的實驗研究[J].中國藥理學(xué)通報,1986,2(2):14-14.)。然而分離提取的金絲桃甙得率很低，成本昂貴；國內(nèi)多個研究單位試圖合成金絲桃甙，均因技術(shù)困難失敗，故未能開發(fā)成藥。

(三)發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明在研究黃蜀葵花乙醇提取物、金絲桃甙粗提物(含金絲桃甙50-60％)、高純化的金絲桃甙(含金絲桃甙99％)的鎮(zhèn)痛作用時發(fā)現(xiàn)，金絲桃甙粗提物鎮(zhèn)痛作用明顯比高純化的金絲桃甙效果好，且易于溶解，因此認為黃蜀葵花鎮(zhèn)痛作用有效成分/部位不僅僅是金絲桃甙，而是有多種。

通過進一步的研究，發(fā)現(xiàn)黃蜀葵花鎮(zhèn)痛作用新的有效部位生物總堿。黃蜀葵花生物總堿比其它部位鎮(zhèn)痛作用更強，可以用于開發(fā)、生產(chǎn)高效低毒的新型鎮(zhèn)痛藥。

本發(fā)明的目的在于提供黃蜀葵花生物總堿提取物，及其制備方法，以及在制備鎮(zhèn)痛藥物中的應(yīng)用。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：

一種黃蜀葵花生物總堿提取物，所述黃蜀葵花生物總堿提取物是按如下方法制備得到的：

(a)超臨界CO₂萃取：將黃蜀葵花粉末和55～99.7％乙醇(夾帶劑)混合，在40～70℃，10～30Mpa的條件下，進行超臨界CO₂萃取1～2.5h，所述CO₂的流量為2～6kg/h，萃取所得粗提液旋蒸除去乙醇，得到黃蜀葵花浸膏；

(b)有機溶劑萃取：將步驟(a)中所得黃蜀葵花浸膏先用水分散，再加入石油醚萃取，分液得到石油醚層和水層，棄去石油醚層，取水層用乙醚萃取，分液得到乙醚萃取液；

(c)生物總堿分離：在步驟(b)所得乙醚萃取液中，加入0.5％～2％HCl溶液萃取，分液得到酸層和乙醚層，棄去乙醚層，所得酸層用5％～25％NaOH溶液滴定至中性，再經(jīng)旋蒸除水，即得黃蜀葵花生物總堿。

本發(fā)明黃蜀葵花生物總堿提取物，推薦步驟(a)中所述乙醇的體積用量以黃蜀葵花粉末的質(zhì)量計為0.5～3.0mL/g。

推薦步驟(b)中所述用于分散的水的體積用量以黃蜀葵花浸膏的質(zhì)量計為10～20mL/g；所述石油醚的體積用量以黃蜀葵花浸膏的質(zhì)量計為60～100mL/g；所述水層與用來萃取的乙醚的體積比為1：4～8。

推薦步驟(c)中所述乙醚萃取液與所述HCl溶液的體積比為1：1～2。

本發(fā)明還提供了一種藥物組合物，所述藥物組合物中含有本發(fā)明所述的黃蜀葵花生物總堿提取物和藥用可接受的載體。

所述藥物組合物可以為口服劑、外用劑、注射劑或復(fù)方制劑。

本發(fā)明所述的黃蜀葵花生物總堿提取物可作為有效成分，用于制備治療臨床疼痛(如頭痛、牙痛、關(guān)節(jié)痛，外傷疼痛等)的鎮(zhèn)痛藥物。

本發(fā)明的創(chuàng)新點為：(1)首次提出并證明黃蜀葵花生物總堿提取物的鎮(zhèn)痛作用；(2)所述黃蜀葵花生物總堿提取物的制備方法簡單，成本低。