[發明專利]一種蛋白質的快速檢測試劑盒及其使用方法

有效

• 申請號: 201410742078.0
• 申請日: 2014-12-09
• 公開（公告）號: CN104459008A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 熊開勝;張海防;謝建庭
• 申請（專利權）人: 蘇州東辰林達檢測技術有限公司
• 主分類號: G01N30/90
• 分類號: G01N30/90
• 代理公司: 南京經緯專利商標代理有限公司 32200
• 代理人: 李紀昌

技術領域

本發明屬于快速檢測領域，具體涉及一種蛋白質的快速檢測試劑盒及其使用方法。

背景技術

?蛋白質是生命的物質基礎，是有機大分子，是構成細胞的基本有機物，是生命活動的主要承擔者。沒有蛋白質就沒有生命。氨基酸是蛋白質的基本組成單位。它是與生命及與各種形式的生命活動緊密聯系在一起的物質。機體中的每一個細胞和所有重要組成部分都有蛋白質參與。蛋白質占人體重量的16%~20%，即一個60kg重的成年人其體內約有蛋白質9.6~12kg。人體內蛋白質的種類很多，性質、功能各異，但都是由20多種氨基酸（Amino?acid）按不同比例組合而成的，并在體內不斷進行代謝與更新。蛋白質是一種復雜的有機化合物，舊稱朊。氨基酸是組成蛋白質的基本單位，氨基酸通過脫水縮合連成肽鏈。蛋白質是由一條或多條多肽鏈組成的生物大分子，每一條多肽鏈有二十至數百個氨基酸殘基（-R）不等；各種氨基酸殘基按一定的順序排列。蛋白質的氨基酸序列是由對應基因所編碼。除了遺傳密碼所編碼的20種基本氨基酸，在蛋白質中，某些氨基酸殘基還可以被翻譯后修飾而發生化學結構的變化，從而對蛋白質進行激活或調控。多個蛋白質可以一起，往往是通過結合在一起形成穩定的蛋白質復合物，折疊或螺旋構成一定的空間結構，從而發揮某一特定功能。合成多肽的細胞器是細胞質中糙面型內質網上的核糖體。蛋白質的不同在于其氨基酸的種類、數目、排列順序和肽鏈空間結構的不同。蛋白質缺乏在成人和兒童中都有發生，但處于生長階段的兒童更為敏感。蛋白質的缺乏常見癥狀是代謝率下降，對疾病抵抗力減退，易患病，遠期效果是器官的損害，常見的是兒童的生長發育遲緩、營養不良、體質量下降、淡漠、易激怒、貧血以及干瘦病或水腫，并因為易感染而繼發疾病。蛋白質的缺乏，往往又與能量的缺乏共同存在即蛋白質—熱能營養不良，分為兩種，一種指熱能攝入基本滿足而蛋白質嚴重不足的營養性疾病，稱加西卡病。另一種即為“消瘦”，指蛋白質和熱能攝入均嚴重不足的營養性疾病。蛋白質是人體不可缺少的物質，然而今年來許多不法商販制造假蛋白來蒙混消費者已獲取高額利潤。

目前，傳統的蛋白質檢測法主要有凱氏定氮法、考馬斯亮蘭法（Bradford法）、Folin—酚試劑法、雙縮脲法等好幾種，然而已知的蛋白質檢測方法又各有其缺陷。凱氏定氮法用于標準蛋白質含量的準確測定費時太長；雙縮脲法用于快速測定但不太靈敏；不同蛋白質顯色相似；Folin—酚試劑法耗費時間長，操作要嚴格計時，顏色深淺隨不同蛋白質變化，標準曲線不是嚴格的直線形式，且專一性差；考馬斯亮蘭法混合蛋白定量困難。因此，尋找一種能快速簡單且經濟實用的蛋白質檢測試劑已經刻不容緩了。

發明內容

本發明的目的在于為了克服以上現有技術的不足而提供一種經濟實用，檢測效果準確的測定蛋白質的快速檢測試劑盒及其使用方法。

技術方案：本發明公開了一種蛋白質的快速檢測試劑盒，包括如下成分：溶劑、濾紙、緩沖劑、顯色劑、展開劑、標準蛋白質甲醇溶液、定量1g蛋白質粉勺子、毛細管、25x15的硅膠板以及有蓋玻璃瓶。

????以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，溶劑為乙醇。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，緩沖劑為50~200mmol/L的磷酸鹽溶液。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，顯色劑為丁二酮單肟/氯化鎳的反應過濾液。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，顯色劑為1.0g丁二酮單肟溶于30mL50~80℃水中，加0.8g氯化鎳，冷卻后加2mL濃氨水，攪拌5分鐘后加200mL0.5g/mL的鹽酸羥胺溶液，攪拌12~24小時過濾的濾液。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，展開劑為體積比為1：10：50的甲醇、乙酸乙酯和苯的混合液。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒，標準蛋白質甲醇溶液濃度為0.2~1.5mol/L。

以上所述的蛋白質的快速檢測試劑盒的使用方法，包括如下步驟：

步驟一，取1g待測蛋白質粉樣品，加入5-10mL溶劑溶解，加熱攪拌2-3分鐘后通過濾紙過濾；

步驟二，向步驟一中所述的濾液加入1-2滴緩沖劑后滴加3-5滴顯色劑，攪拌3-5分鐘后通過薄層層析法檢測；

步驟三，步驟三中所述的薄層層析法為用毛細管取步驟二中所述的反應液，點樣于硅膠板上，標準蛋白質的甲醇溶液對比點樣，垂直放入裝有展開劑的玻璃瓶中，待展開劑延伸至離硅膠板上延3厘米處取出硅膠板吹干，用火烤干，觀察現象；