[發明專利]制造具有氧化還原活性的低金屬化金屬硫蛋白的方法及含有該金屬硫蛋白的醫藥組合物有效
| 申請號： | 201410736345.3 | 申請日： | 2014-12-04 |
| 公開（公告）號： | CN105713084B | 公開（公告）日： | 2021-12-21 |
| 發明（設計）人： | 司馬承帝 | 申請（專利權）人： | 司馬承帝;韓東尼;郭俊宏 |
| 主分類號： | C07K14/825 | 分類號： | C07K14/825;C07K1/34;C07K1/18;C07K1/16;A61K38/16;A61P35/00;A61P25/16;A61P25/28;A61P25/14;A61P3/10;A61P21/00;A61P3/04;A61P3/06;A61P1/16 |
| 代理公司： | 北京科龍寰宇知識產權代理有限責任公司 11139 | 代理人： | 孫皓晨;馬鑫 |
| 地址： | 中國臺*** | 國省代碼： | 臺灣;71 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 制造 具有 氧化 還原 活性 金屬化 金屬 蛋白 方法 含有 醫藥 組合 | ||
1.一種制造具有氧化還原活性的低金屬化金屬硫蛋白的方法，該具有氧化還原活性的低金屬化金屬硫蛋白的氨基酸序列如SEQ ID NO:2或SEQ ID NO:4所示，其特征在于，該具有氧化還原活性的低金屬化金屬硫蛋白通過下列步驟制備得到：
制造一金屬硫蛋白，所述的金屬硫蛋白通過重組DNA技術使用SEQ ID NO:1的序列或SEQ ID NO:3的序列獲得；
完全金屬化該金屬硫蛋白；
純化該金屬硫蛋白；
去除該金屬硫蛋白上的金屬；
化學還原該去金屬的金屬硫蛋白；以及
通過提供4摩爾當量的鋅離子，以部分金屬化該去金屬并化學還原的金屬硫蛋白。
2.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述完全金屬化的步驟由加入硫酸鋅或氯化鋅的方式進行。
3.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述去除該金屬硫蛋白上的金屬的步驟是由將該金屬硫蛋白酸化至pH值小于pH4的方式進行。
4.如權利要求1所述的方法，其中所述純化該金屬硫蛋白的步驟是由透析、陽離子交換層析法、逆相色層分析法、高壓液相層析法、電泳法、凝膠過濾層析法，以及磁力中的一種方式進行。
5.如權利要求1所述的方法，其特征在于：所述化學還原該去金屬的金屬硫蛋白的步驟是由加入還原劑的方式進行。
6.如權利要求5所述的方法，其中該還原劑為谷胱甘肽、NADH、煙酸，以及二硫蘇糖醇(dithiothreitol,DTT)之一。
7.如權利要求1所述的方法，其中該低金屬化金屬硫蛋白具有結合及釋放生理金屬離子的能力。
8.如權利要求1所述的方法，其中該低金屬化金屬硫蛋白具有結合及清除具有氧化還原活性的重金屬離子的能力。
9.如權利要求1所述的方法，其中該低金屬化金屬硫蛋白具有平衡動物細胞內氧化還原電位及穩定代謝完整性的能力。
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