[發明專利]一種胰島素樣生長因子結合蛋白-1檢測試劑盒

有效

• 申請號: 201410735829.6
• 申請日: 2014-12-05
• 公開（公告）號: CN104459138A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 吉權
• 申請（專利權）人: 重慶乾德生物技術有限公司
• 主分類號: G01N33/577
• 分類號: G01N33/577;G01N33/533;G01N33/68
• 代理公司: 上海光華專利事務所 31219
• 代理人: 郭婧婧;許亦琳

技術領域

本發明涉及生物檢測領域，特別是涉及一種胰島素樣生長因子結合蛋白-1檢測試劑盒及其制備方法和用途。

背景技術

胰島素樣生長因子結合蛋白-1(IGFBP-1)是用于檢測胎膜破裂的最佳方法，也是經美國FDA批準的金標準。世界各國臨床上有胎膜早破試紙條、高磷酸化、低磷酸化及非磷酸化等不同稱謂，均指胰島素樣生長因子結合蛋白-1檢測方法。該法經臨床證明優于其他類似檢測方法，深藍胰島素樣生長因子結合蛋白-1檢測條準確性高(大于99％)，簡單易用。無論在婦產科診所、醫院檢查室、門診或家庭，均可得道同樣準確的結果。

非磷酸化的IGFBP-1主要存在羊水中由蛻膜細胞合成，臨產時蛻膜與絨毛膜分離，蛻膜細胞碎片漏到宮頸黏液中。IGFBP-1在羊水中的體積分數比母親血液中高100倍～1000倍，其他體液較少，宮頸黏液、精液和尿液對實驗均無影響。

宮頸陰道分泌物中的IGFBP-1可作為診斷胎膜早破的客觀指標。

目前已知的IGFBP-1檢測方法還存在較多缺陷，如操作較為繁瑣，耗時較長，不適宜臨床上使用。前我國市場上的IGFBP-1檢測試劑盒準確度、靈敏度、重復性仍然較差。

發明內容

鑒于以上所述現有技術的缺點，本發明的目的在于提供一種快速測定胰島素樣生長因子結合蛋白-1含量的試劑盒，用于解決現有技術中的問題。

為實現上述目的及其他相關目的，本發明提供一種快速測定胰島素樣生長因子結合蛋白-1含量的試劑盒，包括試紙卡，所述試紙卡包括底板、及位于底板表面的從加樣端開始依次排列的樣品墊、金標墊、硝酸纖維素膜和吸水墊，所述金標墊上包含胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體，所述硝酸纖維素膜上包被有檢測線和質控線，所述金標墊上的胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體采用熒光微球標記。

優選的，所述金標墊上的胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體采用180nm熒光微球標記，EX(nm)＝650/Em(nm)＝670，具有信號受背景干擾小，檢測靈敏度高，結果重復性好的優點。

優選的，所述底板為PVC底板。

優選的，所述硝酸纖維素膜上，檢測線位于離加樣端較近一側，質控線位于離加樣端較遠一側。

優選的，所述檢測線上包被有胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體。所述金標墊上的胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體與檢測線上的胰島素樣生長因子結合蛋白-1單克隆抗體可以是相同的抗體，也可以是不同的抗體。

優選的，質控線上包被羊抗鼠抗體。

優選的，所述樣品墊采用緩沖液處理，所述緩沖液選自PBS緩沖液、Tris-HCl緩沖液、甘氨酸緩沖液、硼酸鹽緩沖液和檸檬酸-磷酸鹽緩沖液中的一種或多種的組合，緩沖液的濃度為20-200mM。

優選的，本發明所述的金標墊還經過預處理，預處理時所使用的預處理緩沖液選自甘氨酸緩沖液、Tris-HCl緩沖液、硼酸鹽緩沖液的一種或多種的組合，緩沖液的濃度為5-50mM。

優選的，所述緩沖液還包括反應增強劑，所述反應增強劑選自PEG4000、PEG6000、PEG8000和PEG20000中的任意一種，所述反應增強劑的濃度為10～50g/L。

優選的，所述緩沖溶液還包括表面活性劑，所述表面活性劑選自S-19TWEEN?20、S-20TWEEN?80、S-13TRITON?X-45、S-14TRITON?X-100、S-15TRITON?X305中的任意一種或多種的組合，所述表面活性劑的濃度為10～50g/L。

優選的，為了使得試劑盒具有更佳的靈敏度和顯色效果，本發明所述的金標墊在預處理時所使用的預處理緩沖液包括下列組分：水蘇糖、明礬、果糖二磷酸鈉、六偏磷酸鈉和甘氨酸，且水蘇糖、明礬、果糖二磷酸鈉、六偏磷酸鈉、甘氨酸的總濃度為3.5－7.5g/L，緩沖液的pH值為7.2－7.6。

優選的，各組分在緩沖液中的濃度為：

所述預處理緩沖液的溶劑為水。

所述預處理的具體步驟為：將金標墊在預處理液中浸泡1.5～2h，取出放于36～38℃烘干。

所述預處理緩沖液可使用本領域各種常用的pH調節劑進行pH值的調節。

優選的，所述試劑盒還包括卡殼，所述卡殼包括背卡和上蓋，所述背卡設有試紙卡卡槽，所述試紙卡嵌于所述試紙卡卡槽內，所述上蓋設有測試窗和加樣孔，所述測試窗的位置與所述檢測線和質控線的位置相配合，所述加樣孔的位置與所述樣品墊的位置相配合。