[發(fā)明專利]一株產生殺螺活性物質的生暗灰鏈霉菌及其應用

在審

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410726401.5
• 申請日: 2015-08-04
• 公開（公告）號: CN104498396A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發(fā)明（設計）人: 邢云天;戴建榮
• 申請（專利權）人: 江蘇省血吸蟲病防治研究所
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P9/00;C12R1/465
• 代理公司: 無錫市大為專利商標事務所(普通合伙) 32104
• 代理人: 時旭丹;劉品超

技術領域

本發(fā)明涉及一株產生殺螺活性物質的鏈霉菌屬（Streptomyces?caniferus）放線菌，屬于寄生蟲防治技術領域。

背景技術

日本血吸蟲病是一種嚴重危害我國人民身體健康和生命安全的重大傳染性疾病，經過多年防治，取得了舉世矚目的成績，但血吸蟲病傳播與流行的因素依然存在，成為導致血吸蟲病疫情反復或再流行的潛在威脅因素。湖北釘螺是日本血吸蟲病的唯一中間宿主，殺滅釘螺是預防和控制血吸蟲病流行、鞏固血吸蟲病防治取得的成果的重要舉措之一。因此尋找新的高效、低毒、價廉殺螺藥物仍是當前迫切而重要的任務。

目前生物源農藥的發(fā)展受到世界各國的關注，已有多個生物農藥產品獲得廣泛應用，其中包括井岡霉素、赤霉素、阿維菌素、春雷霉素等。從放線菌中篩選新型農藥是當前研究的熱點之一。

土壤里生存繁衍著數(shù)量巨大的微生物，為了適應生態(tài)環(huán)境，土壤中的微生物形成了獨特的生理特性和代謝特性，進而產生了多種多樣的次生代謝產物，成為人類尋找和開發(fā)具有生物活性的化合物的重要源泉。

發(fā)明內容

本發(fā)明要解決的技術是提供一株能夠產生殺螺活性物質的鏈霉菌。

為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用以下技術方案：

一株產生殺螺活性物質的鏈霉菌屬（Streptomyces?caniferus）放線菌，其保藏號為CGMCC?No.9784。

放線菌CGMCC?No.9784是由吉林省通化市玉皇山土壤中分離得到。

所述放線菌CGMCC?No.9784，其16S?rDNA的序列如SEQ?ID?No.1所示。

所述放線菌CGMCC?No.9784的應用，該菌發(fā)酵產物在制備殺螺藥物中的用途。

所述放線菌具有以下微生物特征：

（1）培養(yǎng)特征與形態(tài)特征

所述菌株在馬鈴薯葡萄糖瓊脂培養(yǎng)基（PDA）、高氏一號合成培養(yǎng)基、甘油天冬素瓊脂培養(yǎng)基（ISP2）、無機鹽淀粉瓊脂培養(yǎng)基（ISP3）、酵母精麥芽糖精瓊脂培養(yǎng)基（ISP4）、燕麥粉瓊脂培養(yǎng)基（ISP5）、Czapek培養(yǎng)基上生長良好，均可產生較豐富的氣生菌絲，但均無可溶性色素產生。所述菌株在不同培養(yǎng)基上的培養(yǎng)特征詳見表1。在光學顯微鏡下觀察所述菌株孢子絲為彎鉤形，孢子呈圓形。

表1?菌株CGMCC?No.9784的培養(yǎng)特征

（2）生理生化特征

所述菌株能利用葡萄糖、蔗糖、麥芽糖、甘露糖、甘露醇；不能利用阿拉伯糖、木糖、果糖、乳糖。不能利用纖維素，無黑色素和H₂S產生。能使明膠液化，牛奶不凝固不胨化。

（3）所述放線菌，其16S?rDNA?的序列為SEQ?ID?No.1所示。

本發(fā)明的有益效果：所述的放線菌CGMCC?No.9784為一株鏈霉菌屬新種，其發(fā)酵液對釘螺有良好的殺滅作用，具有較高開發(fā)前景。

生物材料樣品保藏：一株產生殺螺活性物質的鏈霉菌屬（Streptomyces?caniferus）放線菌，已保藏于中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，簡稱CGMCC，地址：北京市朝陽區(qū)北辰西路1號院3號，中國科學院微生物研究所，保藏編號CGMCC?No.9784，保藏日期2014年10月16日。

附圖說明

圖1本發(fā)明所述菌株在高氏一號培養(yǎng)基中（培養(yǎng)10天）的培養(yǎng)形態(tài)。

圖2本發(fā)明所述菌株的菌絲及孢子絲形態(tài)，400×。

具體實施方式

下面結合具體實施例對本發(fā)明作進一步的說明

實施例1：菌株CGMCC?No.9784的分離

稱取1g土樣加入到含10mL生理鹽水的三角瓶中，充分混勻。對樣品做10倍系列梯度稀釋，各取100μL?10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5稀釋度的菌液涂布于高氏一號培養(yǎng)基上，28℃倒置培養(yǎng)。適時挑取形態(tài)、顏色不同的菌落進行劃線純化。對于已純化的放線菌，根據(jù)菌落形態(tài)學特征，排除相同菌株，轉入斜面4℃保存，編號，留作菌株篩選用。

實施例2?：菌株CGMCC?No.9784的培養(yǎng)

（1）斜面培養(yǎng)：培養(yǎng)7天。培養(yǎng)基：可溶性淀粉2%，硝酸鉀0.1%，氯化鈉0.05%，磷酸氫二鉀0.05%，硫酸鎂0.05%，硫酸亞鐵0.01%，瓊脂1.5%。蒸餾水配制，初始pH?7.2-7.4。