[發明專利]一種制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法

在審

• 申請號: 201410724641.1
• 申請日: 2014-12-02
• 公開（公告）號: CN104650164A
• 公開（公告）日: 2015-05-27
• 發明（設計）人: 黃昀;高春春;蘇士月;朱金麗;鄒先偉;陳本科;唐勁天;張松豹;張子成
• 申請（專利權）人: 北京龍程菁華生物科技有限公司
• 主分類號: C07H17/07
• 分類號: C07H17/07;C07H1/08;A61K36/81;A61P31/04;A61P35/00;A61P39/06;A61P29/00;A61P33/00;A01N43/16;A01P1/00;A01P7/00
• 代理公司: 昆明協立知識產權代理事務所(普通合伙) 53108
• 代理人: 馬曉青

技術領域

本發明屬天然產物提取、分離純化領域，具體地說是涉及一種利用高速逆流色譜從辣椒葉粗多酚或富集后的辣椒葉總多酚中分離純化木犀草素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷單體的方法。

背景技術

辣椒為一年生草本植物，其成熟植株葉與果實的產量相當，但目前國內外在采收辣椒果實后，根、莖和葉通常被當作農業垃圾廢棄，并沒有被有效利用，對資源造成了極大的浪費。研究表明辣椒葉中黃酮類和多酚類化合物含量豐富，具有抗氧化、降血糖、抗菌、抗炎、抗蟲等活性。

黃酮類化合物以其廣泛的藥理活性和生物活性倍受關注，植物中黃酮類化合物母核主要有山奈酚、木犀草素、槲皮素、芹菜素、楊梅素、蘆丁等，它們與糖基結合形成的黃酮苷亦廣泛存在。植物中的黃酮類化合物擁有很多有益人類健康的生物活性，包括抗氧化、抗過敏、抗炎免疫、抗菌和抗病毒、抗腫瘤、降血壓和降血糖、保護心血管、調節脂質代謝、提高免疫能力等多種藥理和生物活性。

中國專利申請201210136560.0從辣椒葉中提取的黃酮苷具有α-葡萄糖苷酶抑制活性，但其含量極低，不足0.2‰，辣椒葉中大部分活性成分沒有得到利用。迄今，現有技術中未見有應用高速逆流色譜對辣椒莖葉多酚進行提取和純化的方法的報道。

發明內容

針對現有技術存在的上述不足之處，本發明的目的在于提供一種快速制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法。該方法先從辣椒葉中提取辣椒葉多酚，然后采用高速逆流色譜分離，也可經大孔樹脂富集獲得辣椒葉總多酚后用高速逆流色譜分離，獲得木犀草素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷單體，純度均在95％以上，且獲得的這兩種黃酮苷具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗蟲等生物活性。該方法工藝簡單，效率高，單體純度高，成本低，環境友好，適合于工業化生產活性木犀草素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷單體。該兩種黃酮苷單體具有抗氧化、抗菌、抗炎、抗蟲等生物活性，可以開成天然藥物和生物農藥。

為了實現本發明的上述目的，本發明采用了如下的技術方案：

一種制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，該方法包括如下步驟：

(1)從辣椒葉中提取辣椒葉粗多酚；

(2)辣椒葉粗多酚用大孔樹脂富集，得辣椒葉總多酚；

(3)采用高速逆流色譜對步驟(1)所得辣椒葉粗多酚或步驟(2)所得辣椒葉總多酚進行分離，所述高速逆流色譜分離溶劑系統由酯類、醇類、水組成，其中酯類、醇類、水用量體積比為1～5∶1～5∶1～5，將上述溶劑系統配置于分液漏斗中充分振搖后靜置，分層，取上相為固定相，下相作為流動相，在體系溫度5～60℃時使逆流色譜儀柱子中充滿固定相，然后使其主機轉動，再將流動相泵入柱內，由進樣閥進樣，根據檢測器譜圖接收目標成份，得到純度95％以上的木犀草素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷和芹菜素-7-O-β-D-芹糖(1→2)-β-D-葡萄糖苷。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述的從辣椒葉中提取辣椒葉粗多酚的方法是采用30％～85％酒精從辣椒葉中提取，提取方法用溫浸法、加熱回流法、超聲波提取法或微波輔助提取法。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述的采用高速逆流色譜進行分離的辣椒葉多酚是用酒精從辣椒葉中提取的辣椒葉粗多酚，或用大孔樹脂富集后的辣椒葉總多酚。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述高速逆流色譜分離溶劑系統中的酯類為乙酸乙酯。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述高速逆流色譜分離溶劑系統中的醇類為正丁醇。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述高速逆流色譜分離溶劑系統由乙酸乙酯-正丁醇-水組成，其體積比為4∶1∶5。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述逆流色譜儀為分析型逆流色譜儀或半制備型逆流色譜儀或制備型逆流色譜儀。

根據所述的制備辣椒葉活性黃酮苷單體的方法，其中所述逆流色譜儀流速為4.0mL/min～20.0mL/min。

與現有技術相比，本發明的優越性在于：

1.本發明的原料來源于廢棄的辣椒葉，資源豐富，成本低，附加值高。