[發明專利]一種具有抗腫瘤活性的化合物、制備方法與用途

無效

• 申請號: 201410716919.0
• 申請日: 2014-12-02
• 公開（公告）號: CN104479037A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 張滿錦
• 申請（專利權）人: 張滿錦
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;A61K31/715;A61P35/00
• 代理公司: 汕頭市南粵專利商標事務所(特殊普通合伙) 44301
• 代理人: 余建國

技術領域

本發明涉及醫藥領域，具體涉及一種具有抗腫瘤活性的化合物、制備方法與用途。

背景技術

癌癥與糖尿病、心血管疾病被稱為“世界性三大疾病”。世界衛生組織公布，全世界每年患癌癥人數大幅度增長，至今每年檢驗出的新增癌癥患者數已經超過1400萬名，已成為人們健康的第一殺手。目前,腫瘤的治療以化學藥物和腫瘤化療為主，不僅有嚴重的副作用，而且對危害人類生命健康、占惡性腫瘤90%以上的實體瘤的治療未能達到滿意的效果。因此，當前對新型抗腫瘤藥物藥物需求的迫切性是不言而喻的。

發明內容

本發明提供了從紫球藻提取的一種化合物，其結構式如下所示：

本發明還提供所述化合物的制備方法，?包含以下步驟?：

（1）制備紫球藻粗多糖；

（2）用步驟1得到的紫球藻粗多糖通過柱層析（離子交換柱和凝膠柱），分離純化得到權利要求1所述的化合物。

上述步驟2采用的離子交換柱為DE52纖維素離子交換柱(3.5cm×25cm)，采用的凝膠柱為SePhacry1S一400凝膠柱(l.6cm×80cm)。

本發明還提供所述化合物在制備抗腫瘤藥物中的應用。研究按移植性腫瘤研究法建立小鼠模型,以不同劑量的化合物經灌胃給藥后檢測小鼠移植性實體瘤肉瘤S180生長情況、脾指數、胸腺指數和脾淋巴細胞增殖,對化合物的抗腫瘤活性進行了評價。

具體實施方式

本發明公開了一種新型化合物及其制備方法及應用，本領域技術人員可以借鑒本文內容，適當改進工藝參數實現。特別需要指出的是，所有類似的替換和改動對本領域技術人員來說是顯而易見的，它們都被視為包括在本發明。本發明所述化合物、制備方法及應用已經通過較佳實施例進行了描述，相關人員明顯能在不脫離本發明內容、精神和范圍內對本文所述的方法和應用進行改動或適當變更與組合，來實現和應用本發明技術。

以下結合實施例對本發明進行具體說明。

實施例一：化合物的制備

（1）紫球藻粗多糖的制備

將新鮮的藻液以4000r/min離心巧min,取其上清液40~50℃旋轉蒸發濃縮,濃縮后的藻液加入三倍體積95%乙醇4℃醇沉過夜,次日挑取上部絮狀物即為紫球藻胞外多糖,將該多糖復溶于同等體積藻液體積的蒸餾水中,加入三氯乙酸脫蛋白,裝入透析袋(透過分子量8000)自來水流水透析48h后,蒸餾水透析24h。透析完的糖液再次用三倍體積乙醇沉淀,方法同上。沉淀物真空冷凍干燥,所得即為白色絮狀紫球藻粗多糖。

（2）紫球藻多糖的凝膠過濾柱層析

①紫球藻多糖的離子交換柱層析

將紫球藻多糖配成10mg/mL的水溶液,上tris緩沖液預平衡好的DE52纖維素離子交換柱(3.5cm×25cm)。先用蒸餾水洗脫,然后用O~2.Omol/L的NaCI溶液梯度洗脫,流速1.0mL/min,每管5mL分部收集,苯酚——硫酸法逐管測定糖含量,繪制洗脫曲線,合并相同組分。

②紫球藻多糖的凝膠過濾柱層析

將離子交換收集到的糖組分經Sephacry1S-400柱層析(l.6cm×80cm)進一步純化,0.1mol/L的NaCI溶液洗脫,流速0.2mL/min,以5mL/管的量自動收集,檢測方法同上,以管數為橫坐標,吸光度為縱坐標作圖。收集、合并主糖峰的洗脫液,真空濃縮,流水透析48小時,蒸餾水透析48小時,冷凍干燥后得白色絮狀物,即得所需化合物。

實施例二：化合物的體外抗腫瘤實驗——采用SRB法測定

（1）細胞培養:將增殖良好且處于對數生長期的腫瘤細胞,經0.25%胰酶及EDTA各半的消化液分散后計數,制成細胞懸液,調整細胞濃度為(0.5-1)×10⁵個/mL。接種于96孔板內,180μL/孔,在37℃,5%CO₂細胞培養箱中培養預培養24h后,每孔加不同濃度化合物20μL,每孔總液量為200μL,每個藥物濃度設6個復孔,并設空白對照(RPMll640培養液)和正常對照孔(不加藥物,加等量生理鹽水),置于37℃、5%CO₂培養箱在全濕條件下培養48h,抑瘤實驗所用培養液為RPMll640,內含5%牛血清、100Iu/mL青霉素和100μg/mL鏈霉素。