[發明專利]一種造紙用漂白復合酶及其制備方法

有效

• 申請號: 201410713795.0
• 申請日: 2014-11-30
• 公開（公告）號: CN104499336B
• 公開（公告）日: 2018-04-13
• 發明（設計）人: 邵素英
• 申請（專利權）人: 寧夏天綠健知識產權運營有限公司
• 主分類號: D21C9/10
• 分類號: D21C9/10
• 代理公司: 北京瑞盛銘杰知識產權代理事務所(普通合伙)11617
• 代理人: 鄭海松

1.一種造紙用漂白復合酶，由以下重量份數的原料制備：堿性木聚糖酶25-35份，嗜熱芽孢桿菌培養物15-25份，漆酶12-18份，葡聚糖酶5-8份，1-羥基苯并三氮唑3-8份，EDTA 3-8份，保護劑4-7份，激活劑4-7份，甘露糖酶4-6份，脂肪酶3-5份，單寧酶3-5份，果膠酶3-5份，白度穩定劑2-5份，非離子表面活性劑2-4份，抗氧化劑1-3份；

所述堿性木聚糖酶和嗜熱芽孢桿菌培養物均由產耐高溫堿性木聚糖酶的嗜熱芽孢桿菌CCTCC M 2013537為出發菌株，并通過優化培養基組成和發酵工藝而制備；

所述激活劑是由如下質量組份的無機鹽均勻混合而成：硫酸鈉10-15份，氯化鋅6-8份，氯化鎂5-8份，氯化鈣3-5份；

所述保護劑由以下重量份數的原料組成：海藻糖50份，靈芝多糖18份，NaCl 15份，(NH₄)₂SO₄ 9份，半胱氨酸5份；

所述白度穩定劑為硫醇、硫醚、三羥甲基磷酸、四羥甲基磷酸鹽、三羥甲基磷酸的雙磷衍生物中的一種或幾種以任意比例均勻混合；

所述非離子表面活性劑為環保型非離子表面活性劑；

所述非離子表面活性劑的質量組份為：烷基多苷30-40份，烷基葡萄糖酰胺15-20份，N-十二烷基乙二胺三乙酸鈉10-15份，異構醇醚羧酸鹽AEC-1107 10-15份，月桂酰胺醚羧酸鹽8-10份，平平加c-125 3-5份，JFC 3-5份。

2.如權利要求1所述的一種造紙用漂白復合酶，其特征在于，所述耐高溫堿性木聚糖酶的制備方法如下：將保存完好的嗜熱芽孢桿菌CCTCC M 2013537的斜面菌種經活化和一、二、三級種子培養以及一級種子罐培養得到種子液，以6％接種量接入發酵罐，培養溫度37-45℃，攪拌速度200-700rpm，通風量(V/V)1:1-3,培養時間25-30h；然后以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至15-20℃，恒溫培養10-12h；繼續以1-2℃/h降溫速率緩慢降溫至8-10℃，此時，將一級種子罐發酵液以4％接種量追加接入發酵罐，恒溫培養7-12h；最后以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至15-20℃，恒溫培養10-12h；繼續以1-2℃/h升溫速率緩慢升溫至37-45℃，恒溫培養20-30h；發酵液經過濾、濃縮、調配、精濾、干燥得耐高溫堿性木聚糖酶。

3.如權利要求1所述的一種造紙用漂白復合酶，其特征在于，所述嗜熱芽孢桿菌培養物活菌含量為7x10¹⁰-9x10¹⁰CFU/g。

4.如權利要求1所述的一種造紙用漂白復合酶，其特征在于，所述抗氧化劑為葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏葉提取物中的任一一種或幾種組合。

5.如權利要求1-4任一所述的一種造紙用漂白復合酶的制備方法，其特征在于，包括如下步驟：首先將所述保護劑、激活劑分別超微粉碎，均勻混合，隨后立即依次加入非離子表面活性劑、嗜熱芽孢桿菌培養物均勻混合20-30min，然后依次加入堿性木聚糖酶、漆酶、葡聚糖酶、甘露糖酶、脂肪酶、單寧酶、果膠酶均勻混合，最后依次加入1-羥基苯并三氮唑、EDTA、白度穩定劑、抗氧化劑，混合均勻后密封包裝即得造紙用漂白復合酶。

6.如權利要求5所述的一種造紙用漂白復合酶的制備方法，其特征在于，所述白度穩定劑為三羥甲基磷酸的雙磷衍生物。

7.如權利要求5所述的一種造紙用漂白復合酶的制備方法，其特征在于，所述抗氧化劑為葡萄籽原花青素、迷迭香提取物和杏葉提取物按質量比3-5:1-3:1-2均勻混合。