[發明專利]一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌及其應用

有效

• 申請號: 201410704837.4
• 申請日: 2014-11-27
• 公開（公告）號: CN104531553A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 葉愛華;郭小雙;何金鈴;黃世霞;劉學詩;張儀
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P9/00;C12R1/01
• 代理公司: 安徽匯樸律師事務所 34116
• 代理人: 汪蕙

技術領域

本發明涉及的是一種微生物領域，尤其涉及的是一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌及其應用。

背景技術

釘螺作為血吸蟲唯一的中間宿主,其繁衍和分布與血吸蟲病的流行傳播密切相關，所以抑螺滅螺被認為是阻止血吸蟲病傳播的重要途徑。目前主要的滅螺劑是化學藥物類，這類藥物容易對環境造成不可逆破壞。近年來植物內微生物群落結構得到廣泛的關注和研究，國內外學者經過研究發現植物體內存在大量的微生物,這些微生物在動物的生長、發育、健康等方面都起到重要作用，因此，本發明將研究的方向對準了植物內的微生物群落，希望能找到一種選擇性強、對環境影響較小的生物滅螺劑，以替代傳統化學滅螺劑，保護環境。

發明內容

本發明的目的在于克服現有技術的不足，提供了一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌及其應用，以提供一種選擇性強、對環境影響較小的新的生物滅螺劑。

本發明是通過以下技術方案實現的：

一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌，Pantoea?ananatis?Z1，為泛菌屬細菌，該細菌于2014年3月26日保藏于中國典型培養物保藏中心(簡稱CCTCC；地址：中國武漢，武漢大學；郵編：430072)，其生物保藏號為CCTCC?NO：M2014105，分類命名為：Pantoea?ananatis?Z1。

所述細菌CCTCC?NO：M2014105是從竹子葉片中篩選獲得的，其生物學特征如下：

(1)形態學特征：該細菌革蘭氏染色為陰性，在光學顯微鏡16×100油鏡下觀察該細菌呈直桿狀，周生鞭毛。

(2)培養特征：在YEB固體培養基中生長良好，菌落圓潤，呈淡黃色，邊緣整齊，透明，易挑起，在YEB液體培養基中培養時隨著培養時間延長，培養液由透明的淺黃色變為渾濁的黃色。

所述細菌CCTCC?NO：M2014105的16S?rRNA序列如SEQ?ID?NO.1所示，其中所述16S?rRNA序列有487個堿基，將序列輸入GenBank數據庫中進行BLAST比對處理，結果發現，該16S?rRNA序列與菠蘿泛菌MDM-02(Pantoea?ananatis，MDM-02)的16S?rRNA序列(GenBank登錄號：HE716901.1)同源性為99％，結合形態學特征和培養特征鑒定該細菌CCTCC?NO：M2014105為泛菌屬的菠蘿泛菌(Pantoea?ananatis)。

本發明還提供了上述細菌CCTCC?NO：M2014105在制備生物滅螺劑中的應用，所述細菌?CCTCC?NO：M2014105的發酵液作為生物滅螺劑殺滅釘螺。

本發明相比現有技術具有以下優點：本發明提供了一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌及其應用，該細菌CCTCC?NO：M2014105能夠作為生物滅螺劑快速有效地殺滅釘螺，可直接作為生物滅螺劑使用，用該細菌CCTCC?NO：M2014105制備的生物滅螺劑與傳統化學滅螺劑相比，制備方法簡單，成本低，對環境友好。

具體實施方式

下面對本發明的實施例作詳細說明，本實施例在以本發明技術方案為前提下進行實施，給出了詳細的實施方式和具體的操作過程，但本發明的保護范圍不限于下述的實施例。

實施例1

本實施例的一種具有滅螺活性的菠蘿泛菌CCTCC?NO：M2014105菌株的篩選，包括以下步驟：

1、培養基的配制：

1)YEB液體培養基：牛肉浸膏為5.0g/L，酵母膏為1.0g/L，蛋白胨為5.0g/L，MgSO₄·7H₂O為4g/L，蔗糖為5.0g/L，pH7.0～7.5；

2)YEB固體培養基：將上述YEB液體培養基中加入15g/L的瓊脂，獲得YEB固體培養基。?

2、篩選步驟：?

1)在無菌條件下，取新鮮竹葉，用體積分數為75％的酒精浸泡1分鐘，0.1％升汞浸泡12分鐘，無菌生理鹽水沖洗3遍后，將竹葉研磨，獲得組織碎末；

2)將步驟1)的組織碎末接種到100mL的YEB液體培養基中，37℃培養12～16小時，培養的轉速為180rpm，獲得培養液；

3)按體積計，將步驟2)的培養液用無菌生理鹽水依次稀釋為10^-1、10^-2、10^-3、10^-4、10^-5、10^-6和10^-7，獲得稀釋液；