[發明專利]一種超聲波輔助提取灰樹花多糖的方法

無效

• 申請號: 201410700306.8
• 申請日: 2014-11-28
• 公開（公告）號: CN104387492A
• 公開（公告）日: 2015-03-04
• 發明（設計）人: 戴路
• 申請（專利權）人: 哈爾濱墨醫生物技術有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術領域

本發明涉及一種多糖提取方法，特別是一種超聲波輔助提取灰樹花多糖的方法。

背景技術

灰樹花又名粟蘑、蓮花菌，日本稱“舞茸”，是一種珍稀的食、藥兼用真菌。灰樹花不僅食用味道鮮美，有“食用菌王子”之美稱，富含維生素，并含有鋅、鈣、磷、鐵、硒等多種對人體有益的礦物質，而且具有醫療保健作用，在日本民間用來治療糖尿病、高血壓等疾病。

灰樹花的調節免疫力、抗腫瘤、治療糖尿病等藥用功效來源于其含有的多種生理活性物質，如多糖(糖蛋白)、核酸、多酚、礦物質等，尤其灰樹花多糖(糖蛋白復合體)是研究重點。灰樹花的生物活性主要來自其多糖成分。灰樹花多糖具有抗腫瘤、增強免疫功能、抗HIV等多種生物活性。

目前常用的灰樹花多糖的提取方法有堿提法、酸提法、鹽提法還有熱水浸提法。稀酸、稀堿法，試劑用量少，儀器均為常規儀器，因此操作簡單易行。但稀酸、稀堿條件下，易使多糖發生糖苷鍵的斷裂，部分多糖發生水解而使多糖的提取率減少，而且雜質含量，也比較多，有一定的適用范圍，所以本發明在水提的基礎上，復合超聲提取，使細胞內容物更大量的釋放，同時加入酶解提取，去除了蛋白等雜質，大大提高了多糖的提取含量。

發明內容

本發明的目的是提供一種超聲波輔助提取灰樹花多糖的方法，在水提的基礎上，復合超聲提取，使細胞內容物更大量的釋放，同時加入酶解提取，去除了蛋白等雜質，大大提高了多糖的提取含量。

本發明的目的通過以下技術方案來實現：一種超聲波輔助提取灰樹花多糖的方法，其具體步驟為：

（1）材料預處理：取干燥灰樹花粉碎，過60～100目篩，得灰樹花干燥粉末，加入5～20倍質量的蒸餾水，于50℃～65℃的溫度條件下，浸泡1-5小時；

（2）超聲提取：把步驟（1）的物質放入超聲波中，于20～60℃的溫度條件下，用5～20KHz超聲波萃取0.5h～2.0h，過濾，取濾液1；

（3）酶解提取：調節濾液1pH為3～6，加入其質量體積0.5-2.5%的纖維素酶和木瓜蛋白酶，于30～60℃的溫度條件下，水解0.5h～3.0h，離心分離，取濾液2；

（4）制備洗脫液：濾液2用稀鹽酸調節濾液pH為4.0～4.5，上層析柱，柱內填充介質為HD-3樹脂，4～5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6～7BV洗脫液；

（5）制備截留液：調節洗脫液pH為6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和10KD的陶瓷膜進行超濾，收集中間截留液；

（7）減壓濃縮：將（6）步驟的截留液進行減壓濃縮，濃縮溫度65-70℃，壓力小于0.lMPa，濃縮到500℃熱測比重1.050—1.080；

（8）離心得沉降物：4000rmp高速離心，得沉淀物；

（9）真空干燥：沉淀物在真空度-0.095MPa，干燥溫度20-50℃的條件下，干燥20min，得到灰樹花多糖。

本發明的有益效果：本發明在水提的基礎上，復合超聲提取，使細胞內容物更大量的釋放，增加內容物的溶出率，同時應用樹脂層析柱進行脫色脫蛋白，除去了蛋白質等分子雜質，使提取的多糖含量更高、更純。

具體實施方式

實施例1

（1）材料預處理：取干燥灰樹花粉碎，過60目篩，得灰樹花干燥粉末，按重量配比加入10倍質量的蒸餾水，于50℃～65℃下，侵泡3小時；

（2）超聲提取：接著把步驟（1）的物質放入超聲波中，20～60℃下用5～20KHz超聲波萃取0.5h，過濾，取濾液1；濾渣可重復進行以上操作，濾液進行下一步提取；

（3）酶解提取：調節濾液pH為3～6，加入質量體積比為0.5-2.5%的纖維素酶和木瓜蛋白酶，30～60℃水解0.5h，離心取濾液2；

（4）制備洗脫液：濾液2用稀鹽酸調節濾液pH為4.0～4.5，上層析柱，柱內填充介質為HD-3樹脂，4～5BV/h流速下層析脫色脫蛋白，收集6～7BV洗脫液；

（5）制備截留液：調節洗脫液pH為6.5～7.5，在0.1～0.25Mpa壓力下，用超濾膜為50KD和10KD的陶瓷膜進行超濾，收集中間截留液；