[發明專利]建立家兔動脈粥樣硬化模型的方法

在審

• 申請號: 201410697550.3
• 申請日: 2015-08-03
• 公開（公告）號: CN104490885A
• 公開（公告）日: 2015-07-29
• 發明（設計）人: 喬寅飛;朱克儉;肖長江;柏正平;李勇敏;肖梅英;翦林宏;喻正科;韓育明;趙啟;李志;顏旭;譚宇軍;張婷;朱筱婧;楊文麗;夏相宜
• 申請（專利權）人: 湖南中醫藥大學
• 主分類號: A61K31/513
• 分類號: A61K31/513;A61K38/38;A01K67/027;A61D1/00
• 代理公司: 北京神州華茂知識產權有限公司 11358
• 代理人: 吳照幸

技術領域

本發明屬于實驗動物疾病模型的范疇，具體為建立家兔動脈粥樣硬化模型的方法。

背景技術

動脈粥樣硬化是一種有免疫系統參與的慢性反應性炎性疾病，是心腦血管疾病的主要病理基礎，嚴重危害人類健康，是造成心腦血管疾病的主要原因。但其發病其機制至今仍未完全闡明，需要進行深入的實驗研究，因此迫切需要一種快速、經濟、易于制造及復制、與人類動脈粥樣硬化的發病機制更接近的動物模型。

張軍平等人曾在《中國比較醫學雜志》2009年第19卷第1期報道中提出采用“高脂飼料+靜脈注射牛血清白蛋白+動脈內皮球囊拉傷”法制備家兔腹主動脈粥樣硬化模型的方法，符凌等人在《中西醫結合心腦血管病雜志》2010年7月第8卷第七期中報道，在高脂飼料中加入一定量的丙基硫氧嘧啶，它能夠抑制甲狀腺功能，使肝內膽固醇增加，減少對膽固醇的代謝，保證血清膽固醇含量的升高，進而誘發高脂血癥，加快建模的進程。但“高脂飼料+靜脈注射牛血清白蛋白+動脈內皮球囊拉傷”法造模需12周，耗時較長，且使用的耗材“動脈球囊”和“壓力泵”價格昂貴，不利于推廣使用。

發明內容

本發明的目的是要提供一種周期短、可操作性強且成本較為低廉的家兔動脈粥樣硬化模型的造模方法。

為了達到上述目的，本發明有如下技術方案：

本發明的建立家兔動脈粥樣硬化模型的方法，包括對家兔基礎飼料的高脂化加工，靜脈注射牛血清蛋白，采用血管鞘與測力計聯合使用將家兔動脈血管內皮損傷，其中，采用血管鞘與測力計聯合使用將家兔動脈血管內皮損傷具體包括如下步驟：

1)以21G橈動脈穿刺針在股動脈中下段行穿刺術；

2)穿刺成功后，借助于導絲插入橈動脈鞘管達5cm深；

3)之后在耳緣靜脈注射肝素200U/Kg；

4)拔出導絲后，在血鞘管尾部固定一根細線，細線另一端接測力計，術者左手手指并攏按壓內有血管鞘的股動脈部分，右手握測力計向外將血管鞘拉出4cm，左手按壓力量以測力計上顯示10牛頓為度，按以上方法重復操作3次，以造成血管內皮損傷。

其中，所述家兔基礎飼料的高脂化加工為在基礎家兔飼料59.7-75.9％中分別加入1-3％膽固醇，8-12％豬油，15-25％蛋黃粉，0.1-0.3％丙硫氧嘧啶。

其中，所述步驟2)中的鞘管為1.8kg兔選擇使用4F鞘管，2.0kg選擇使用5F鞘管，2.2kg兔選擇使用6F鞘管。

其中，所述靜脈注射牛血清蛋白，在造模第1天和第7天，每只家兔從耳靜脈注射牛血清白蛋，每次劑量均為200-300mg/kg。

由于采取了以上技術方案，本發明的有益效果：

本發明實驗組動物采用高脂飲食直接導致脂質攝入過多，造成高脂血癥；丙硫氧嘧啶使家兔甲狀腺功能減退，減慢脂質代謝；靜脈注射牛血清白蛋白造成全身性免疫炎性反應，血管鞘拉傷術直接造成內皮損傷，四者在體內相互影響形成一種立體的生物效應。本模型在前三者造成全身反應的基礎上加以局部血管鞘拉傷使得觀測部位更加確定，便于取材。

進行家兔股動脈內皮拉傷術操作中不再使用價格昂貴的“球囊+壓力泵”，“動脈球囊”價格為3700余元，“壓力泵”價格為4800余元，并且球囊導管管壁脆弱易損壞，不宜多次使用。而“動脈血管鞘”價格為220余元，測力計價格為50余元，且動脈血管鞘質地堅硬，可消毒后重復使用，主要耗材費用大大降低。

造模總時間從12周縮減為7周，節約了大量的動物喂養和管理成本。

附圖說明

圖1為本發明實驗組中未經動脈血管鞘損傷的部位；

圖2、圖4為本發明實驗組中經動脈血管鞘損傷的部位；

圖3為本發明實驗組動脈血管內的血栓；

圖5為本發明對照組正常的動脈血管。

圖中：1、泡沫細胞?2、血管內皮?3、鈣化點?4、血栓

具體實施方式

以下通過具體實施方式的描述對本發明作進一步說明，但這并非是對本發明的限制，本領域技術人員根據本發明的基本思想，可以做出各種修改或改進，但是只要不脫離本發明的基本思想，均在本發明的范圍之內。

實驗動物分組

選用普通級雄性日本大耳白兔20只，體重2.0±0.2kg。隨機分為實驗組10例和對照組10例。