[發明專利]利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法及檢測方法

在審

• 申請號: 201410692979.3
• 申請日: 2014-11-25
• 公開（公告）號: CN104398313A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發明（設計）人: 李君;沈粵春;陸東風;李新春
• 申請（專利權）人: 廣州醫科大學附屬第一醫院
• 主分類號: A61D1/00
• 分類號: A61D1/00;G01N33/483
• 代理公司: 廣州廣信知識產權代理有限公司 44261
• 代理人: 石澤智

1.利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征在于該方法的步驟是：

步驟一：切開小鼠股動脈表面皮膚，分離此股動脈和股動脈分支；

步驟二：將股動脈分支剪一小口，利用螺旋狀不銹鋼絲從股動脈分支的此剪口處插入股動脈主干內；

步驟三：停留1-3分鐘后抽出螺旋狀不銹鋼絲，結扎股動脈分支并縫合皮膚；

步驟四：3-5周后將損傷的股動脈制作成動脈斷面切片，制成標本。

2.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：所述的小鼠為8-11周齡。

3.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：步驟二中螺旋狀不銹鋼絲從股動脈分支插入股動脈主干內0.5-1.5厘米。

4.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：步驟三中利用螺旋狀不銹鋼絲從股動脈分支插入股動脈主干內停留時間為1-3分鐘。

5.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：所述的螺旋不銹鋼導管的直徑為0.2-0.5cm。

6.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：步驟四制成標本方法包括：

(1)標本的提取：于手術3-5周后對小鼠實施全身麻醉，將小鼠仰臥于手術臺上，四肢用膠布固定，剪開胸壁、暴露心臟，通過注射器從左心室抽出全部血液后，先后用生理鹽水和3-5％甲醛溶液沖洗動脈系統，切取損傷的股動脈切段，形成標本；

(2)標本的處理：用石蠟包埋標本，用機器切出切片，用載玻片將切片組織置于其表面，切片厚度4-6um，動脈段每隔1.5-3mm保留切片，平均每個動脈分析3-4個截面；

(3)標本的染色：常規HE染色，之后脫水、透明、中性樹膠封固蓋玻片。

7.根據權利要求6所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：所述的沖洗動脈系統方法是：首先，將右心房剪一開口，將生理鹽水從左心室抽血的針眼處緩慢注射入左心室，待右心房流出血液消失取代為生理鹽水時為止；其次，用3-5％甲醛溶液從左心室抽血的針眼處緩慢注射入左心室，進行一次或多次沖洗；最后，切除損傷的股動脈段浸泡于3-4％甲醛溶液6-24小時后形成標本。

8.根據權利要求1所述的利用小鼠制作動脈內皮細胞損傷模型的方法，其特征是：該方法還包括動脈內皮細胞損傷模型的檢測方法，采用分析軟件，測量動脈內膜面積(I)，動脈中膜面積(M)及其比值(I/M)，與陰性對照組比較，若實驗組I增大及/或I/M減小，說明動脈內皮細胞對損傷的反應嚴重，易于發生動脈粥樣硬化；反之，不易發生。