[發明專利]一種高純鮑魚多糖的制備工藝及其應用

有效

• 申請號: 201410691001.5
• 申請日: 2014-11-27
• 公開（公告）號: CN104356249A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 石國宗;鄭建優;秦飛;陳靜;林穎珺
• 申請（專利權）人: 廈門藍灣科技有限公司
• 主分類號: C08B37/00
• 分類號: C08B37/00;C08L5/12;C08J3/24;B01J20/24;B01J20/28;B01J20/30;A61K31/715;A23L1/29;A61K8/73;A61P37/04;A61P35/00
• 代理公司: 廣州市紅荔專利代理有限公司 44214
• 代理人: 張文

技術領域

本發明涉及生物制品領域，具體為一種高純鮑魚多糖的制備工藝及其應用。

背景技術

隨著對多糖研究的深入和發展，人們對菌多糖、植物多糖、動物多糖有了更深入了解和認識。近年來，鮑魚的藥用價值也為現代醫學認可。相關研究表明，鮑魚多糖具有抗腫瘤、免疫調節、抗應激等功能的生物活性物質。但對鮑魚多糖的研究還屈指可數，對能實現產業化分離制備高純鮑魚多糖的研究更是鮮見報道。

大連理工學院的朱蓓微采用酶法成功從鮑魚中提取了鮑魚多糖，集美大學翁武銀采用復合酶法聯產制備鮑魚多糖、脂質和蛋白肽，酶法提取雖然條件溫和、易操作，但無法解決提取條件不易控制、得率低、純度低、成本高等問題；福建農林大學的陳錦權采用高壓脈沖電場處理得到鮑魚多糖，該方法雖然縮短了提取時間，提高了生產效率，但使用高壓脈沖電場提取使用大量的有機溶劑，且得率低、不易操作、危險性大、對設備要求苛刻，無法實現產業化生產。

發明內容

本發明的目的在于提供一種安全環保、條件溫和、高效、高純鮑魚多糖規模化制備工藝。

為實現上述目的，本發明采用以下技術方案：

一種高純鮑魚多糖制備工藝，包括以下步驟：

S1.清洗粉碎：將鮑魚去殼洗凈，稱取50Kg洗凈的鮮鮑魚肉和內臟，加入75L-150L水在肉類粉碎機內粉碎得粉碎組織液；通過步驟1進行初步的物理粉碎。

S2.超聲處理：向粉碎組織液中加入10L質量濃度1%-4%的NaOH溶液，放入超聲細胞粉碎機中，在25℃的條件下采用25KHz～50KHz頻率超聲處理1小時，得超聲處理液；通過步驟2的進一步超聲粉碎，使鮮鮑魚肉和內臟中的各種組織較徹底的分散開來，便于后續的提取。

S3.沉淀分離：25℃條件下向超聲處理液中加入質量濃度45%～50%的硫酸銨溶液10L產生白色沉淀后，離心分離得到澄清液；通過該步驟，分離出蛋白質。

S4.制備微球：制備粒徑均一的瓊脂凝膠微球;

S5.交聯處理：瓊脂凝膠微球經交聯劑處理，得到高機械強度的瓊脂凝膠微球分子篩;步驟S4、S5的目的在于制備瓊脂凝膠微球分子篩，作用機理在于：分子篩的晶體骨架內形成了許多大小相同的空腔，空腔又有許多直徑相同的微孔相連，這些微小的孔穴直徑大小均勻，能把比孔道直徑小的分子吸附到孔穴的內部中來，而把比孔道大的分子排斥在外，因而能把形狀直徑大小不同的分子，極性程度不同的分子，沸點不同的分子，飽和程度不同的分子分離開來，即具有“篩分”分子的作用。

S6.分離純化：步驟S3中的得到的澄清液經過瓊脂凝膠微球分子篩通過柱層析法分離純化得到鮑魚多糖溶液。柱層析法的分離原理是根據物質在硅膠上的吸附力不同而使各組分分離，一般情況下極性較大的物質易被硅膠吸附，極性較弱的物質不易被硅膠吸附，當采用溶劑洗脫時，發生一系列吸附→解吸→再吸附→再解吸的過程，吸附力較強的組分，移動的距離小，后出柱；吸附力較弱的組分，移動的距離大，先出柱。

進一步地，所述的步驟S4中制備粒徑均一的瓊脂質量含量為4%和10%的兩種瓊脂凝膠微球各30L，其粒徑控制在30～80微米之間；所述的步驟S5中，兩種瓊脂凝膠微球分別經交聯劑處理得到高機械強度的瓊脂凝膠微球分子篩4B（瓊脂的質量含量為4%）和10B（瓊脂的質量含量為10%）；所述的步驟S6中，將步驟S3中得到的澄清液先經過瓊脂凝膠微球分子篩4B通過柱層析法脫鹽，再經過瓊脂凝膠微球分子篩10B通過柱層析法進一步分離純化得到鮑魚多糖溶液。通過兩種不同微孔直徑的分子篩進行“篩分”，先脫鹽，然后再進一步篩除與多糖結構相近的其它成分，從而使最終得到的鮑魚多糖的純度更高。

其中，瓊脂凝膠微球的制備方法為乳化法，瓊脂質量含量為4%的瓊脂凝膠微球的制備過程為：準備以下質量份數的原料，瓊脂4份，復方乳化劑1～3份，水45～50份，有機溶劑45～50份，經乳化反應得到顆粒狀瓊脂凝膠微球，干燥固化即得。

瓊脂質量含量為10%的瓊脂凝膠微球的制備過程為：準備以下質量份數的原料，瓊脂10份，復方乳化劑1～3份，水43～45份，有機溶劑43～45份，經乳化反應得到顆粒狀瓊脂凝膠微球，干燥固化即得。

進一步地，所述的步驟S5中交聯處理進行兩次，第一次交聯處理采用1,3-二溴丙醇交聯劑，第二次交聯處理采用二乙烯基砜交聯劑。

優選地，所述的步驟S2中，向粉碎組織液中加入10L質量濃度1%-4%的NaOH溶液后，再加入5L質量濃度為5%的過氧化氫溶液，再放入超聲細胞粉碎機中。加入過氧化氫溶液，使組織液中不同的成分在粉碎機的作用下更容易分離。