[發(fā)明專利]一種抗SM-RNP抗體試劑盒

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410685351.0
• 申請(qǐng)日: 2014-11-25
• 公開（公告）號(hào): CN104459100A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 張志新;葉正義;何遠(yuǎn)立;楊秦
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 成都威爾諾生物科技有限公司
• 主分類號(hào): G01N33/53
• 分類號(hào): G01N33/53;G01N33/531
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及試劑盒領(lǐng)域，具體地，涉及一種抗SM-RNP抗體試劑盒。

背景技術(shù)

系統(tǒng)性紅斑狼瘡簡稱SLE是一種以大量自身抗體形成為特征，導(dǎo)導(dǎo)致多系統(tǒng)、多器官損害的慢性系統(tǒng)性自身免疫疾病。系統(tǒng)性紅斑狼瘡是一種常見的風(fēng)濕性疾病，經(jīng)調(diào)查顯示，該病的發(fā)病率為千分之一左右，好發(fā)于育齡女性，男女比列約為1:7～10，非生育年齡女性優(yōu)勢(shì)不明顯。主要病因可能與遺傳、環(huán)境因素和雌激素有關(guān)系，已有研究報(bào)道年齡是一大危險(xiǎn)因素，尤其是青年女性發(fā)病最為常見。發(fā)病機(jī)制主要與免疫調(diào)節(jié)異常、大量的自身抗體以及免疫復(fù)合物的形成有關(guān)系，目前，具體的發(fā)病機(jī)制尚不清楚。

SLE血清檢測(cè)是SLE普查和輔助診斷的重要方法。目前，醫(yī)院實(shí)驗(yàn)室主要采用酶聯(lián)免疫吸附實(shí)驗(yàn)及ELISA法對(duì)患者的血清進(jìn)行初步的診斷，但是目前的診斷方法都是需要陽性對(duì)照液，而陽性對(duì)照液的開源一般都是來自病人的血清。目前，在檢測(cè)人血清中抗SM-RNP抗體的檢測(cè)試劑盒中，陽性對(duì)照抗體多數(shù)都來自病人的陽性對(duì)照血清，這樣，每個(gè)批次的試劑盒，陽性對(duì)照或許不同，導(dǎo)致每個(gè)批次中陽性對(duì)照抗體不穩(wěn)定的問題。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是提供一種抗SM-RNP抗體試劑盒，以克服現(xiàn)有試劑盒在檢測(cè)人血清中抗SM-RNP抗體的含量時(shí)，因每個(gè)批次的陽性對(duì)照抗體不穩(wěn)定而導(dǎo)致結(jié)果不穩(wěn)定的問題。

本發(fā)明解決上述問題所采用的技術(shù)方案是：一種抗SM-RNP抗體試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括用于表達(dá)抗SM-RNP抗體的細(xì)胞載體、陰性對(duì)照血清、陽性對(duì)照血清、酶底物、濃縮樣本稀釋液，所述陽性對(duì)照血清為病人的陽性對(duì)照血清篩選后的對(duì)照血清。

現(xiàn)有的抗SM-RNP抗體試劑盒中的陽性對(duì)照血清來自病人的陽性對(duì)照血清，這樣，每個(gè)批次的試劑盒，陽性對(duì)照或許不同，導(dǎo)致每個(gè)批次中陽性對(duì)照抗體不穩(wěn)定的問題，本發(fā)明通過對(duì)所采集的陽性對(duì)照血清進(jìn)行篩選，取分布比較密集的數(shù)值區(qū)域的陽性對(duì)照血清作為抗SM-RNP抗體試劑盒中的陽性對(duì)照血清，克服了現(xiàn)有試劑盒在檢測(cè)人血清中抗SM-RNP抗體的含量時(shí)，因每個(gè)批次的陽性對(duì)照抗體不穩(wěn)定而導(dǎo)致結(jié)果不穩(wěn)定的問題。

進(jìn)一步地，細(xì)胞載體為哺乳動(dòng)物細(xì)胞。哺乳動(dòng)物細(xì)胞與人體細(xì)胞環(huán)境具有較高的相似度，且哺乳動(dòng)物細(xì)胞比價(jià)容易獲得，能夠降低實(shí)驗(yàn)成本。

一種抗SM-RNP抗體試劑盒的制備方法，包括以下步驟：

首先，細(xì)胞載體的制備：將表達(dá)有抗SM-RNP抗體的細(xì)胞載體活化后，在4℃培育5小時(shí)，用PBS緩沖液洗滌、離心、棄上清液，加入一定濃度的血清蛋白封閉液，培育30分鐘，完成細(xì)胞載體的制備；

其次，其它組分的制備：陰性對(duì)照血清是健康人的血清，陽性對(duì)照血清為已經(jīng)確診的抗SM-RNP抗體陽性血清，濃縮樣本稀釋液中含有PBS、哺乳動(dòng)物血清蛋白。

一種基于細(xì)胞載體技術(shù)的抗SM-RNP抗體試劑盒的檢測(cè)，借助細(xì)胞檢測(cè)儀對(duì)抗SM-RNP抗體定性檢驗(yàn)，以及靈敏度與特異性檢測(cè)。

進(jìn)一步地，采用四線表格法計(jì)算抗SM-RNP抗體的敏度與特異性。

綜上，本發(fā)明的有益效果是：

1、本發(fā)明通過對(duì)所采集的陽性對(duì)照血清進(jìn)行篩選，取分布比較密集的數(shù)值區(qū)域的陽性對(duì)照血清作為抗SM-RNP抗體試劑盒中的陽性對(duì)照血清，克服了現(xiàn)有試劑盒在檢測(cè)人血清中抗SM-RNP抗體的含量時(shí)，因每個(gè)批次的陽性對(duì)照抗體不穩(wěn)定而導(dǎo)致結(jié)果不穩(wěn)定的問題。

2、本發(fā)明通過將載體設(shè)置為哺乳動(dòng)物細(xì)胞，哺乳動(dòng)物細(xì)胞與人體細(xì)胞環(huán)境具有較高的相似度，且哺乳動(dòng)物細(xì)胞比價(jià)容易獲得，能夠降低實(shí)驗(yàn)成本。

具體實(shí)施方式

下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)發(fā)明作進(jìn)一步地詳細(xì)說明，但本發(fā)明的實(shí)施方式不限于此。

實(shí)施例：

一種抗SM-RNP抗體試劑盒，試劑盒包括用于表達(dá)抗SM-RNP抗體的細(xì)胞載體、陰性對(duì)照血清、陽性對(duì)照血清、酶底物、濃縮樣本稀釋液，所述陽性對(duì)照血清為病人的陽性對(duì)照血清篩選后的對(duì)照血清。細(xì)胞載體為哺乳動(dòng)物細(xì)胞。

一種抗SM-RNP抗體試劑盒的制備方法，包括以下步驟：

首先，細(xì)胞載體的制備：將表達(dá)有抗SM-RNP抗體的細(xì)胞載體活化后，在4℃培育5小時(shí)，用PBS緩沖液洗滌、離心、棄上清液，加入一定濃度的血清蛋白封閉液，培育30分鐘，完成細(xì)胞載體的制備；

其次，其它組分的制備：陰性對(duì)照血清是健康人的血清，陽性對(duì)照血清為已經(jīng)確診的抗SM-RNP抗體陽性血清，濃縮樣本稀釋液中含有PBS、哺乳動(dòng)物血清蛋白。