[發明專利]分子的糖基化

有效

• 申請號: 201410681757.1
• 申請日: 2008-04-03
• 公開（公告）號: CN104480140B
• 公開（公告）日: 2019-12-31
• 發明（設計）人: 尼科.L.M.卡爾沃爾特;沃特.弗維肯;卡倫.J.馬塞爾德波爾克;史蒂文.C.J.蓋森斯;芒娜.古爾法爾
• 申請（專利權）人: 奧克西雷恩英國有限公司
• 主分類號: C12N15/81
• 分類號: C12N15/81;C12N9/96;C12N9/38;C12N9/40;C12N9/26;C12N9/24;C12N9/20;C12N9/16;C12N9/12;C12N9/10;C07K14/00;C07K16/00;C07K2/00;C12N1
• 代理公司: 11105 北京市柳沈律師事務所
• 代理人: 張文輝

1.產生目標蛋白的改變的N-糖基化形式的方法，所述方法包括：提供解脂西洋蓍霉細胞，所述細胞經遺傳工程化而包含MNN4的過表達；和向細胞中引入編碼目標蛋白的核酸，其中所述細胞以改變的糖基化形式產生所述目標蛋白。

2.權利要求1的方法，其中所述細胞進一步遺傳工程化而包含外鏈的延伸OCH1活性的缺陷，其中所述進一步遺傳工程化的細胞包含：

-編碼具有所述OCH1活性的蛋白的基因的缺失；或

-引入或表達RNA分子，所述RNA分子干擾具有所述OCH1活性的蛋白的功能性表達。

3.權利要求1的方法，進一步包含分離所述目標蛋白的改變的N-糖基化形式。

4.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是外源蛋白。

5.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是內源蛋白。

6.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是哺乳動物蛋白。

7.權利要求6的方法，其中所述目標蛋白是人蛋白。

8.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是病原體蛋白、溶酶體蛋白、細胞因子、抗體或其抗原結合片段，或融合蛋白。

9.權利要求8的方法，其中所述融合蛋白是病原體蛋白、溶酶體蛋白、或細胞因子與抗體或其抗原結合片段的融合物。

10.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是生長因子或趨化因子，或生長因子或趨化因子與抗體或其抗原結合片段的融合物。

11.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是與溶酶體貯積病相關的蛋白。

12.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白是葡糖腦苷酯酶、α-半乳糖苷酶或半乳糖腦苷酯酶。

13.權利要求1的方法，其中所述目標蛋白選自下組：α-L-艾杜糖苷酸酶、β-D-半乳糖苷酶、β-葡糖苷酶、β-己糖胺酶、β-D-甘露糖苷酶、α-L-巖藻糖苷酶、芳基硫酸酯酶B、芳基硫酸酯酶A、α-N-乙酰半乳糖胺酶、天冬氨酰葡糖胺酶、艾杜糖醛酸-2-硫酸酯酶、α-氨基葡糖苷-N-乙酰轉移酶、β-D-葡糖醛酸酶、透明質酸酶、α-L-甘露糖苷酶、α-神經氨酸酶、磷酸轉移酶、酸性脂肪酶、酸性神經酰胺酶、鞘磷脂酶、硫酯酶、組織蛋白酶K和脂蛋白脂肪酶。

14.權利要求1的方法，其中所述細胞進一步遺傳工程化而包含至少一種額外的經修飾的N-糖基化活性。

15.權利要求14的方法，其中所述至少一種額外的經修飾的N-糖基化活性包含N糖基化活性的缺陷。

16.權利要求15的方法，其中所述缺陷是ALG3活性中的缺陷。

17.權利要求14的方法，其中所述至少一種額外的經修飾的N-糖基化活性包含缺失編碼具有N-糖基化活性的蛋白質的基因。

18.權利要求14的方法，其中所述至少一種額外的經修飾的N-糖基化活性包含引入或表達RNA分子，所述RNA分子干擾具有N-糖基化活性的蛋白質的功能性表達。

19.權利要求14的方法，其中所述至少一種額外的經修飾的N-糖基化活性包含具有N-糖基化活性的蛋白質的表達。

20.權利要求19的方法，其中表達的蛋白質是由細胞中的外源核酸編碼的蛋白質。