[發明專利]一種根霉菌胞內生理活性誘導物質的萃取方法及應用

在審

• 申請號: 201410679228.8
• 申請日: 2014-11-24
• 公開（公告）號: CN105624199A
• 公開（公告）日: 2016-06-01
• 發明（設計）人: 施宗雄;鄭長義;林德田
• 申請（專利權）人: 施宗雄
• 主分類號: C12P1/02
• 分類號: C12P1/02;A23K10/12;C12R1/845
• 代理公司: 天津三元專利商標代理有限責任公司 12203
• 代理人: 崔鋼

技術領域

本發明是于一種根霉菌(RhizopusSPP)胞內生理活性誘導物質 (Bio-activeInducematter：BAIM)的萃取方法及應用，其是將根霉菌 (RhizopusSPP)培養于改良式液體(SabouraudDextroseAgar)的培養基 中，置放于30℃恒溫箱內回轉振蕩培養5日后，取0.2ml菌液涂抹在一 改良式固體(SabouraudDextroseAgar)培養基中，靜置于30℃恒溫箱中 培養5日，在未出現黑色菌落前刮取白色菌落，并置放于無菌磷酸緩沖 溶液(PhosphateBufferSolution：PBS)10ml中，即成懸浮液后再進行 根霉菌胞內萃取。其萃取是以根霉菌懸浮液10000xg轉數進行離心分離 10分鐘(4℃)后再取其菌體沉淀物，再加入無菌磷酸緩沖溶液10ml再成 懸浮液，再進行離心分離連續重復三次后，再將完成沖洗的菌體沉淀物 以重量1∶9(菌體沉淀物：PBS緩沖溶液)比例再成懸浮，連續進行三次 冷凍(-80℃)及解凍(37℃水浴)的處理程序，再以超音波細胞擊碎器進 行破壁(在水浴下每間隔5分鐘破壁一次，連續進行五次)。后再將破壁 完成的懸浮菌液再以10000xg轉數的離心分離10分鐘(4℃以下)后，取 其上清液以0.45μm濾膜過濾，其最后濾液即含有根霉菌體胞內生理活 性誘導物質(BAIM)，經噴霧干燥即得本發明產品：BAIM(生理活性誘導分 泌物質)。

背景技術

孩童的成長、發育及女性的不育、月事的不調、男性的禿發、不舉 等異常現象及經濟動物的產肉、產蛋、產乳及繁殖效率的良否等均受制 于腦下垂體前葉(Anteriorpituitaryparsdistalis)所支配于周邊腺 體分泌特定激素(Hormones)的功能所致。而此特定的激素包括：生長激素 (FSH)、黃體生成素(LH)及泌乳素(LactationH)三者，而腦下垂體控制 周邊腺體分泌特定激素的功用，則受制于下視丘(Hypothalamus)分泌特 定激素所致。而下視丘分泌特定激素，可藉由生理活性物質(Bio-avtive Inducematter)來誘導刺激而得。

1970年(44年前)日本牛越郁夫取得「應用于動物的生理活性物質」 發明專利(昭45-12754號：間腦是を經由レて下垂體を刺激する物質多 量含有する物質の制造法)，其生理活性物質取得制程是以Rhizopus屬 (RhizopusSPP.)菌體培養及發酵產物的取得是采液態發酵低溫干燥的制 程，其培養過程繁雜，含不純物高達8％，且濃縮干燥產品吸濕性強，保 存不易，致效果不穩定。

2014年中國臺灣發明證號：1434932號(根霉菌RhizopusSPP及其培養 方法與應用)，其制程中培養菌體流程雖已簡化且僅簡易加工后，用于生 醫資材，因成本昂貴效果不彰未見推廣，顯見其制程技術猶有瑕疵、未 臻完善。

中國臺灣發明專利公開號TW201343172A：是應用少孢根霉菌 (RhizopusOligosporus)的發酵產物，以作為生產降血壓活性成分的用途 醫藥組合物及其食品添加物，其是以牛乳的培養基得到一發酵產物，其 含有血管收縮素轉化酶抑制劑(抑制ACE活性功能)，作為降血壓劑，以牛 乳作為培養基的營養源，其發酵產物的成分目前被公認其成分最為不穩 定，雖有小白鼠動物試驗，但其臨床試驗未經確定。且目前治療高血壓 的化學合成藥劑因專利期已過，致成本非常便宜，且經無數臨床試驗效 果確定。

今地球人口已逾七十億，且日益嚴重地球的暖化現象，氣候激變， 不是大澇即大旱，導致人類的糧食日漸匱乏，尤其是對健康關系頗大的 動物性蛋白質(乳、肉及蛋)的需求更為迫切，經濟動物的生產因飼養方 式、營養及飼養的氣候影響導致內分泌激素(Hormones)的分泌異常，而 造成產肉、產蛋、產乳等產量的低下及繁殖上的障礙，致如何解決孩童 的成長及成人賀爾蒙的失調及提升乳、肉及蛋的生產為目前重要研究探 討課題。

今發明人經多年來的深入探討及研究，終于研發一種制程嚴謹、質 量穩定及效果佳，可誘導促進人及動物內分泌腺分泌多量內分泌素(如生 長激素(GH)及激性腺素如：FSH、LH&LactationH等)的生理活性誘導物 質(Bio-activeInducematter)簡稱BAIM，以促使人類的健康幸福及取 代目前使用添加瘦肉精或合成賀爾蒙來增加乳、肉、蛋產量危害人類健 康的替代方案以造福人類。

發明內容