[發明專利]中國西門塔爾牛FGF-1基因作胴體肉品質的遺傳標記

在審

• 申請號: 201410678809.X
• 申請日: 2014-11-24
• 公開（公告）號: CN104630341A
• 公開（公告）日: 2015-05-20
• 發明（設計）人: 楊潤軍;趙志輝;許黃濤;譚宇鵬;房希碧;蘆春艷
• 申請（專利權）人: 吉林大學
• 主分類號: C12Q1/68
• 分類號: C12Q1/68;C12N15/11
• 代理公司: 吉林長春新紀元專利代理有限責任公司 22100
• 代理人: 陳宏偉

技術領域

本發明公開一種中國西門塔爾牛FGF-1基因作胴體肉品質的遺傳標記，涉及中國西門塔爾牛胴體組成和肉質性狀分子遺傳標記的檢測及其作為輔助選擇標記在肉乳兼用牛育種中的應用，屬于肉乳兼用牛選育技術領域。

背景技術

中國西門塔爾牛是我國肉牛產業化生產中的主導品種。隨著國內外市場的變化及消費者對牛肉需求程度的提高，中國西門塔爾牛肉用性能進一步選育和提高成為該品種的主要目標。要提高肉用性能就必須采用常規育種技術和分子育種方法從生長發育性狀、胴體組成和肉質性狀方面進行選育。

胴體組成和肉質性狀是肉牛重要的經濟性狀，隨著人們生活水平的提高，對肉質的要求越來越高，對優質牛肉的需求也越來越大，因此優質牛肉帶來的可觀經濟效益決定了肉牛育種中肉質性狀選擇的重要性。胴體和肉質性狀作為由微效多基因控制的數量性狀，由于無法活體測定受到傳統育種方法的限制，因此從分子標記入手對肉質性狀進行研究成為主要技術手段。

根據生產性狀的表型值估計育種值進行肉牛的選種和培育，已經極大促進了肉牛生長發育和肉質性狀的遺傳改良。隨著現代分子生物學技術的飛速發展，遺傳學家和育種學家認識到控制數量性狀的基因并非在基因組中隨機分布，且存在影響數量性狀的主效基因。以分子標記為核心的分子標記輔助選擇和GWAS等分子育種技術與常規育種技術相結合大大加速了肉牛育種的進程。目前篩查對目標性狀具有較大作用的主效基因及其與之緊密連鎖的分子標記成為肉牛分子育種的基礎和前提，也是將來肉牛分子生物學領域研究的重點。

成纖維細胞生長因子（fibroblast?growth?factor,?FGF）是一個包含23個（目前）家庭成員的多基因家族，每個成員均包含一段高度保守的約合120個氨基酸核心區，核心區內有6個同樣的散在氨基酸序列。作為家族中最主要的成員，FGF-1基因編碼一個由155個氨基酸序列組成的蛋白，具有較強的誘導DNA合成、促進有絲分裂和細胞增殖的作用，在組織器官發育、成肌細胞增殖、脂肪細胞分化和脂肪沉積等方面發揮重要的作用。另外,FGF-1不但可以在細胞外發揮作用，還可以通過核定位信號（Nuclear?Localization?Signal，NLS)進入胞內發揮作用。但是目前關于FGF-1基因遺傳多態性檢測及與中國西門塔爾牛生長發育、胴體組成和肉質性狀相關性的研究尚未有報道。

發明內容

本發明的目的在于并提供一種中國西門塔爾牛FGF-1基因作胴體肉品質的遺傳標記，用于中國西門塔爾牛FGF-1基因作為胴體組成和肉質性狀分子標記的檢測及應用方法。

本發明提供的一種中國西門塔爾牛FGF-1基因作為胴體組成和肉質性狀分子標記的檢測及應用方法，是通過以下技術方案來實現：

利用DNA池測序和PCR-RFLP技術篩查和檢測中國西門塔爾牛FGF-1基因功能突變的的方法。通過關聯分析尋找與中國西門塔爾牛胴體組成和肉質性狀相關的SNPs作為分子遺傳標記，應用于肉牛早期選擇和分子聚合育種，進一步加快中國西門塔爾牛肉用性能的選育和提高。

本發明提供一種中國西門塔爾牛FGF-1基因作為胴體組成和肉質性狀的遺傳標記，其特征在于：

核苷酸序列如序列表Seq?ID?NO.3、Seq?ID?NO.6和Seq?ID?NO.9所示，在序列表Seq?ID?NO.3第184?bp處有184A-184T的突變，導致Xsp-Ⅰ-RFLP多態性；在序列表Seq?ID?NO.6第327處有327A-327C的突變，導致Hae-????????????????????????????????????????????????-RFLP多態性；在序列表Seq?ID?NO.9第301處有301A-301T的突變，導致Rsa--RFLP多態性。

本發明公開的中國西門塔爾牛FGF-1基因作為胴體組成和肉質性狀分子標記的檢測方法，其特征在于:

設計擴增如權利要求1?所述的中國西門塔爾牛FGF-1基因分子遺傳標記的引物對，得到的引物序列如下所示：

P1正向引物F：5'?TCCCTGGTTCAGAGTTCAAG?3'，

???????P1反向引物R：5'?GGGTGTGGGTGCTGTTATC?3'；

???????P2正向引物F：5'?GTTCGTAGAGAGCCACAGATG?3'，

P2反向引物R：5'?ATCACTGTGCCAAAGGAAAT?3'；

????P3正向引物F：5'?GTAGACGGCACACACCTCAG?3'，