[發(fā)明專利]半日花烷型二萜Leoleorin H在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410678771.6
• 申請(qǐng)日: 2014-11-24
• 公開（公告）號(hào): CN104398502A
• 公開（公告）日: 2015-03-11
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 周同永;周國泰
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 西寧意格知識(shí)產(chǎn)權(quán)咨詢服務(wù)有限公司
• 主分類號(hào): A61K31/343
• 分類號(hào): A61K31/343;A61P35/00;A61P35/02
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及天然藥物領(lǐng)域，具體涉及一種半日花烷型二萜Leoleorin?H在制備抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

半日花烷型二萜為二環(huán)二萜，以十氫萘為母核，包括其去甲、次裂和重排化合物，是結(jié)構(gòu)類型較豐富的一類二萜。最具有代表性的半日花烷型二萜是從穿心蓮（Andrographis?panis）中分離得到的穿心蓮內(nèi)酯（Andrographolide）和從毛喉鞘蕊花（Coleus?forskohlii）中得到的鞘蕊花素（Forskolin）。前者具有較好的抗菌、消炎功效，后者可用于強(qiáng)心、抗抑郁、解痙和治療哮喘。近年來，又發(fā)現(xiàn)了大量新的半日花烷型二萜，結(jié)構(gòu)變化豐富，其中不少具有良好的抗菌、消炎和抗腫瘤等生物活性。

益母草為唇形科益母草屬植物Leonurus?japonicus?Houtt.的新鮮或干燥地上部分，始載于《神農(nóng)本草經(jīng)》，味辛、微苦，性微寒，入心包、肝經(jīng)，具有活血調(diào)瘀、利尿消腫之功效。臨床上用于月經(jīng)不調(diào)、產(chǎn)后瘀痛、心腦血管疾病、血液病等疾病的治療。

Leoleorin?H最早由Wu?HK等采用常規(guī)的柱色譜方法從益母草（Leonotis?leonurus）中分離得到的半日花烷型二萜類化合物[Labdane?Diterpenoids?from?Leonotis?leonurus,?Phytochemistry?91?(2013)?229–235]。Leoleorin?H為白色粉末，分子式為C₂₂H₃₄O₅,分子量376.54。其化學(xué)結(jié)構(gòu)式如下：

Leoleorin?H的生物活性研究資料很少。Wu?HK等研究了其對(duì)CNS受體的結(jié)合能力，發(fā)現(xiàn)Leoleorin?H能顯著抑制放射性配體和5-羥色胺5-HT_1A受體的結(jié)合[Labdane?Diterpenoids?from?Leonotis?leonurus,?Phytochemistry?91?(2013)?229–235]。該化合物的其他有關(guān)活性研究未見報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明公開了Leoleorin?H的抗宮頸癌、白血病和乳腺癌的作用，目的在于提供Leoleorin?H用于制備抗宮頸癌、乳腺癌和白血病的藥物。

為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用標(biāo)準(zhǔn)的MTT法對(duì)多種腫瘤細(xì)胞進(jìn)行體外篩選，包括：人宮頸癌HeLa、人乳腺癌MCF-7、人急性早幼粒白血病細(xì)胞HL-60、人肺癌A549、人結(jié)腸癌HCT15。研究發(fā)現(xiàn)，Leoleorin?H對(duì)人宮頸癌HeLa細(xì)胞、急性早幼粒白血病HL-60細(xì)胞和人乳腺癌MCF-7細(xì)胞的抗增殖活性強(qiáng)并呈良好的時(shí)效與量效關(guān)系，對(duì)A549和HCT15活性弱；?同時(shí)將其作用正常肝細(xì)胞L-O2，未發(fā)現(xiàn)毒性反應(yīng)。結(jié)果表明，Leoleorin?H具有抗宮頸癌、白血病和乳腺癌的作用，可以用于制備抗宮頸癌、乳腺癌和白血病的藥物。

化合物L(fēng)eoleorin?H的制備方法參考：Labdane?Diterpenoids?from?Leonotis?leonurus,?Phytochemistry?91?(2013)?229–235。

附圖說明

圖1為不同濃度Leoleorin?H作用不同細(xì)胞株24小時(shí)后的抑制生長效果

圖2為不同濃度Leoleorin?H作用不同細(xì)胞株72小時(shí)后的抑制生長效果。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1：化合物L(fēng)eoleorin?H的制備方法

益母草地上部分干燥粉末（購自上海康橋中藥飲片有限公司，產(chǎn)地安徽）?5kg，室溫條件下采用滲漉法用石油醚提取3次脫脂，每次體積15L；藥渣再用丙酮提取3次，每次體積15L，合并丙酮提取液，減壓回收，得浸膏280g。浸膏用300ml二氯甲烷和甲醇的混合溶劑（1:1,?V/V）溶解，與硅膠混合拌樣（500g，200-300目），揮干溶劑后得拌樣均勻的硅膠。采用200-300目硅膠（1500g）裝柱，對(duì)拌樣硅膠進(jìn)行分離。用正己烷-乙酸乙酯梯度洗脫（10:1,?4:1,?2:1,?1:1,?1:4,?0:1,?V/V）。收集正己烷-乙酸乙酯（1:1）洗脫部分，減壓回收溶劑后，進(jìn)一步用正己烷-乙酸乙酯進(jìn)行梯度洗脫（3:1,?2:1,?1:1，V/V），根據(jù)薄層點(diǎn)板即可得化合物L(fēng)eoleorin?H（75mg）。