[發明專利]一種促進檀香石斛快速繁殖的方法

在審

• 申請號: 201410676585.9
• 申請日: 2014-11-21
• 公開（公告）號: CN104351056A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發明（設計）人: 霍麗妮;蘇鈦;陳睿;李培源;蘇煒;黃娟娟
• 申請（專利權）人: 廣西中醫藥大學
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 北京遠大卓悅知識產權代理事務所(普通合伙) 11369
• 代理人: 靳浩

1.一種促進檀香石斛快速繁殖的方法，其特征在于，包括以下步驟：

1)誘導發芽：在檀香石斛種子發黃未開裂之前，取碩果，在流水下清洗干凈，置于濃度為75-80％的乙醇溶液浸泡30-40秒，然后置于濃度為1-1.2％的升汞溶液中消毒15-20分鐘，無菌水清洗5-6遍，在滅菌盤內利用手術刀切開碩果，取出種子，播種于誘導培養基中，其中誘導培養基是按照以下的原料比例制備而成1/2MS為基本培養基附加萘乙酸(NAA)0.2-2.0mg/L，糖25-30g/L，瓊脂3-6g/L，茶多酚5-30.0mg/L，香蕉2％-20％，椰子汁5％-30％，PH值為5.6，培養溫度為29-32℃，光照強度為2100-2500lux，光照時間為14-16小時/天，培養16-20天后得到檀香石斛小芽；

2)繼代培養：將步驟1)獲得的大量的檀香石斛小芽置于繼代培養基中，其中繼代培養基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS基本培養基附加(6-芐氨基嘌呤(6-BA)0.5-4.0mg/L，吲哚乙酸(IAA)0.5-2.0mg/L，糖25-30g/L，瓊脂3-6g/L，茶多酚5-30.0mg/L，香蕉2％-20％，椰子汁5％-30％，PH值為5.6，培養溫度為29-32℃，培養時間為14-16小時/天，光照強度為2100-2500lux，62-70天左右可獲得2cm左右高度的檀香石斛組培分化苗；

3)檀香石斛組培分化苗的生根培養：將步驟2)中獲得的大量的檀香石斛分化苗移栽到生根培養基，其中生根培養基是按照以下的原料比例制備而成，1/2MS為基本培養基附加香蕉5％-20％，IBA?0.1-2.0，糖2-10％，茶多酚5-30.0mg/L，香蕉2％-20％，椰子汁5％-30％，活性炭0.2-0.4％，PH值5.6培養溫度為28℃，光照強度2100-2500lux，光照時間為14-16小時/天的條件下培養62-70天后，把組培苗移到自然光下培養，25-28天后可得到具有3-4條根的檀香石斛生根組培苗；

4)煉苗與移栽：清洗掉步驟3)中得到的檀香石斛生根組培苗根部的培養基，晾干水汽，將檀香石斛生根組培苗帶根的完整植株移栽到帶基質的苗床上，待1-2個月后檀香石斛小苗生長穩定，長出新的根和芽就可移栽到種植大棚中，大棚栽培時要適當遮陰，光照強度為800-1000lux，濕度控制在50-60％，溫度控制在20-25℃。

2.根據權利要求1所述的促進檀香石斛快速繁殖的方法，其特征在于，步驟1)中的誘導培養基為：1/2MS為基本培養基附加萘乙酸(NAA)1-2.0mg/L，糖30g/L，瓊脂4g/L，茶多酚25mg/L，香蕉2％，椰子汁5％。

3.根據權利要求1所述的促進檀香石斛快速繁殖的方法，其特征在于，步驟2)中繼代培養基為：1/2MS基本培養基附加(6-芐氨基嘌呤(6-BA)1.5-4.0mg/L，吲哚乙酸(IAA)1.5-2.0mg/L，糖30g/L，瓊脂3-6g/L，茶多酚15-30.0mg/L，香蕉10-20％，椰子汁25-30％。

4.根據權利要求1所述的促進檀香石斛快速繁殖的方法，其特征在于，步驟3)中的生根培養基為：1/2MS為基本培養基附加香蕉15％-20％，IBA1.0-2.0，糖2-5％，茶多酚15mg/L，香蕉4％，椰子汁15％，活性炭0.2-0.4％。