[發(fā)明專利]一種鼓槌石斛種子組織培養(yǎng)快速繁殖方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410674752.6
• 申請(qǐng)日: 2014-11-21
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104322375B
• 公開(kāi)（公告）日: 2017-07-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 霍麗妮;蘇鈦;陳睿;李培源;蘇煒;呂金燕
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 廣西中醫(yī)藥大學(xué)
• 主分類號(hào): A01H4/00
• 分類號(hào): A01H4/00
• 代理公司: 北京遠(yuǎn)大卓悅知識(shí)產(chǎn)權(quán)代理事務(wù)所(普通合伙)11369
• 代理人: 靳浩

1.一種鼓槌石斛種子組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：

步驟一、將預(yù)處理的鼓槌石斛種子播種于誘導(dǎo)培養(yǎng)基中，在溫度為28-30℃，光照強(qiáng)度為2300-2500lux，光照時(shí)間為13-15h/d的條件下培養(yǎng)7-15天，得到鼓槌石斛小芽，其中所述誘導(dǎo)培養(yǎng)基為：以MS-H為基本培養(yǎng)基，然后加入0.5-3mg/L萘乙酸、1.0-3.0mg/L吲哚乙酸、0.2-2.0mg/L噻苯隆、25-35g/L蔗糖及3-5g/L瓊脂，并調(diào)整誘導(dǎo)培養(yǎng)基pH值為5.5-6；

步驟二、將鼓槌石斛小芽置于繼代培養(yǎng)基中，培養(yǎng)30-60天，其中培養(yǎng)溫度為30-32℃，在光照強(qiáng)度為2300-2600lux照射13-15h/d，培養(yǎng)30-60天，獲得鼓槌石斛組培分化苗，所述繼代培養(yǎng)基為：以MS為基本培養(yǎng)基，加入0.5-2mg/L玉米素、1-3mg/L 6-芐氨基嘌呤、0.5-2mg/L萘乙酸、0.5-3.0mg/L吲哚丁酸、0.2-1.0mg/L噻苯隆、25-35g/L蔗糖及4-5g/L瓊脂，并調(diào)整繼代培養(yǎng)基的pH值為5.7-6；

步驟三、將鼓槌石斛組培分化苗移栽至生根培養(yǎng)基中，培養(yǎng)30-50天，培養(yǎng)溫度28-32℃、光照強(qiáng)度2500-3000lux，光照時(shí)間為13-15h/d，然后移到自然光下培養(yǎng)45-60天，得到鼓槌石斛生根組培苗，所述生根培養(yǎng)基為：1/2MS為基本培養(yǎng)基，加入5-20%香蕉、0.1-2.0g/L吲哚丙酸、0.2-3.0mg/L萘乙酸、2-5%蔗糖及0.2-0.5%活性炭，并調(diào)整生根培養(yǎng)基的pH值為5.6-6；

步驟四、將鼓槌石斛生根組培苗移栽至苗床上，培養(yǎng)30-40天，鼓槌石斛生根組培苗生長(zhǎng)穩(wěn)定后即可移栽至大棚中。

2.如權(quán)利要求1所述的鼓槌石斛種子組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，所述步驟一中鼓槌石斛種子的預(yù)處理是將鼓槌石斛種子置于75-80%的乙醇溶液中浸泡25-40秒，然后取質(zhì)量分?jǐn)?shù)為0.1%升汞溶液消毒10-30分鐘，并置于無(wú)菌水下反復(fù)清洗。

3.如權(quán)利要求1所述的鼓槌石斛種子組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，步驟四所述苗床含有基質(zhì)，所述基質(zhì)由以下重量份的組分組成：20-30樹(shù)皮、10-20雜木、20-30蛭石及10-15珍珠巖。

4.如權(quán)利要求1所述的鼓槌石斛種子組織培養(yǎng)快速繁殖方法，其特征在于，步驟四中將鼓槌石斛生根組培苗移栽至苗床前，先將鼓槌石斛生根苗根部的培養(yǎng)基沖洗干凈，晾干水汽后再移栽至苗床上。