[發(fā)明專利]利用槲皮素作為熒光探針在測定Cu2+中的應(yīng)用及其測定方法

無效

• 申請?zhí)枺?/td>: 201410674056.5
• 申請日: 2014-11-21
• 公開（公告）號(hào): CN104359885A
• 公開（公告）日: 2015-02-18
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 徐莉;楊世龍;曹福亮;印彬
• 申請（專利權(quán)）人: 南京林業(yè)大學(xué)
• 主分類號(hào): G01N21/64
• 分類號(hào): G01N21/64
• 代理公司: 南京知識(shí)律師事務(wù)所 32207
• 代理人: 萬婧

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明涉及的是利用槲皮素作為熒光探針在測定Cu²⁺中的應(yīng)用及其一種利用槲皮素作為熒光探針對(duì)Cu²⁺的測定方法，屬光分析檢測技術(shù)領(lǐng)域。

背景技術(shù)

槲皮素廣泛存在于植物中，其來源廣泛，制備工藝簡單，市場價(jià)格便宜。目前對(duì)槲皮素及其配合物的抗氧化、抗菌等生物活性研究較多，對(duì)其熒光探針的性質(zhì)研究甚少。槲皮素具有完整的大π鍵共軛體系、強(qiáng)的配位氧原子及合適的空間構(gòu)型，能與金屬發(fā)生配位。這些相互作用會(huì)引起槲皮素光譜性質(zhì)的變化，因此可以利用檢測光譜性質(zhì)的變化來實(shí)現(xiàn)對(duì)金屬離子的識(shí)別。

Cu²⁺是人體中不可缺少的元素，對(duì)人體的生長發(fā)育有重要作用，但是人體內(nèi)銅含量過高也會(huì)引起中毒，例如可引起壞死性肝炎、溶血性貧血等疾病。隨著工業(yè)化的發(fā)展，環(huán)境污染日益嚴(yán)重，尤其是重金屬污染給人類帶來許多疾病和災(zāi)難，因此，監(jiān)測環(huán)境中Cu²⁺的含量是一項(xiàng)具有重大意義的工作。目前，檢測Cu²⁺的方法有很多種，例如：火焰原子吸收法、離子色譜法、電化學(xué)法等都是較為常見的Cu²⁺檢測方法，但是這些方法中都要用到許多精密儀器，且對(duì)樣品前處理要求嚴(yán)格，因此檢測成本高、效率較低。為克服以上缺點(diǎn)，本發(fā)明采用廣泛存在于植物體內(nèi)的槲皮素作為熒光探針來檢測環(huán)境中的Cu²⁺離子，具有靈敏度高、識(shí)別能力強(qiáng)、簡單等特點(diǎn)。

發(fā)明內(nèi)容

本發(fā)明目的是提供一種利用槲皮素作為熒光探針在測定Cu²⁺中的應(yīng)用。

本發(fā)明還提供了一種利用槲皮素作為熒光探針對(duì)Cu²⁺的測定方法。該測定方法具有靈敏度高、識(shí)別能力強(qiáng)、簡單等特點(diǎn)。

一種利用槲皮素作為熒光探針在測定Cu²⁺中的應(yīng)用。

一種利用槲皮素作為熒光探針對(duì)Cu²⁺的測定方法，其步驟如下：

(1)制作標(biāo)準(zhǔn)曲線：將槲皮素加入到含有不同濃度Cu²⁺的緩沖溶液中，配成槲皮素濃度相同的溶液，記錄各溶液的熒光強(qiáng)度，確定熒光強(qiáng)度與Cu²⁺的濃度的定量關(guān)系；

(2)將槲皮素加入到含有Cu²⁺的待測緩沖溶液中，配置成與步驟(1)槲皮素濃度相同的溶液，記錄溶液的熒光強(qiáng)度；

(3)根據(jù)定量關(guān)系確定待測溶液Cu²⁺的濃度。

所述的緩沖溶液為pH為7.40的甲醇-磷酸緩沖鹽溶液(CH₃OH-PBS)，甲醇與磷酸緩沖鹽溶液的體積比為1:99。

所述的熒光強(qiáng)度測定條件是激發(fā)狹縫為5nm，發(fā)射狹縫為15nm，掃描范圍為450-700nm，在激發(fā)波長為390nm，發(fā)射波長為540nm處，預(yù)先測定槲皮素?zé)晒馓结樀臒晒鈴?qiáng)度隨Cu²⁺的濃度變化的定量關(guān)系。

所述的Cu²⁺的濃度在1～7μM范圍，槲皮素的濃度為1×10^-5mol·L^-1。

有益效果：

本發(fā)明利用廉價(jià)易得的槲皮素作為熒光探針來檢測水溶液中的Cu²⁺，利用槲皮素與Cu²⁺配位后熒光強(qiáng)度的變化規(guī)律，繪制熒光強(qiáng)度F對(duì)Cu²⁺濃度c(Cu²⁺)的標(biāo)準(zhǔn)曲線，根據(jù)標(biāo)準(zhǔn)曲線求出未知樣品中Cu²⁺的濃度。操作簡單，分析，對(duì)Cu²⁺識(shí)別能力強(qiáng)，受其它離子干擾小，靈敏度高，且在pH＝7.40的甲醇-磷酸緩沖鹽溶液中對(duì)Cu²⁺進(jìn)行檢測，有望應(yīng)用在細(xì)胞中，通過細(xì)胞成像等技術(shù)檢測細(xì)胞中Cu²⁺含量。

附圖說明

圖1為在CH₃OH-PBS(1:99，V/V，PH＝7.40)緩沖溶液中，濃度為1×10^-5mol·L^-1的槲皮素與Cu²⁺(0～10μM)熒光滴定譜圖；

圖2為槲皮素與Cu²⁺的熒光滴定曲線；

圖3為其它金屬離子對(duì)槲皮素-Cu配合物體系熒光光譜的影響。

具體實(shí)施方式

實(shí)施例1

1、標(biāo)準(zhǔn)曲線的繪制