[發明專利]辛酸法血漿免疫球蛋白分離工藝

在審

• 申請號: 201410672451.X
• 申請日: 2014-11-22
• 公開（公告）號: CN104447987A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 石正國;孔維權;王連群;呂紹玉
• 申請（專利權）人: 貴州中泰生物科技有限公司
• 主分類號: C07K16/18
• 分類號: C07K16/18;C07K16/08;C07K1/34
• 代理公司: 貴陽天圣知識產權代理有限公司 52107
• 代理人: 杜勝雄

1.辛酸法血漿免疫球蛋白分離工藝，其特征在于工藝由下列操作步驟組成：

1）融漿投料，溫度不高于35℃，持續時間不超過4小時；

2）制備組分I+Ⅱ+Ⅲ的工藝參數為：pH為6.5至7.8、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-6.0℃至-2.5℃，蛋白質濃度范圍為：4.0%至7.8%；

3）制備組分I+Ⅲ，將上述組分I+Ⅱ+Ⅲ用8-14倍體積的注射用水溶解，調節參數為：pH為5.0至5.6、乙醇含量為15%至24%、溫度控制為-1.0℃至4.5℃，靜置時間2至24小時；

4）制備組分Ⅱ，以上述分離組分I+Ⅲ的上清液為原料，按照每1升體積加入10-25mL?1mol/L的氯化鈉溶液調節離子強度，工藝參數為：pH為7.0至7.8、乙醇含量為25%至34%、溫度控制為-10.0℃至-5.5℃，靜置時間2至24小時；

5）純化組分Ⅱ，以上述制備分離的組分Ⅱ為原料，用8-14倍的注射用水溶解，以辛酸（辛酸鈉）與待病毒滅活球蛋白溶液中蛋白質的重量比mmol/g為14～16∶1加入辛酸（辛酸鈉），調節溶解所得的溶液pH為3.5至4.8；分離除去雜蛋白、硅藻土等，得人免疫球蛋白溶液；

6）進入超濾罐后的蛋白藥液，升溫至溫度30±1℃，恒溫90分鐘；后進行超濾，用分子截流量為50kD的超濾膜，第一次超濾的濃縮過程中降溫至8-10℃，后加入等體積的注射用水，連續超濾6-10次；超濾完成后，用注射用水調配蛋白溶液，使其蛋白質含量為應為52±10g/L，并調節pH為3.5至4.8；

7）低pH病毒滅活，將經除菌過濾并密封好的人免疫球蛋白置于恒溫為23-25℃條件下，靜置21天；每7天取樣1次，測定pH和蛋白質含量，應無明顯變化；

8）二次超濾配制，低pH病毒滅活完成后，對蛋白質溶液進行二次超濾，調節蛋白質的體積；按照終體積的10%加入麥芽糖，確保蛋白質含量不低于50克/L,調節pH至適當范圍；用無菌操作工藝灌裝-軋蓋即得。