[發明專利]一種菜豆直接再生體系的建立方法

有效

• 申請號: 201410661867.1
• 申請日: 2014-11-19
• 公開（公告）號: CN104472352A
• 公開（公告）日: 2015-04-01
• 發明（設計）人: 古瑜;韓啟厚;于海龍
• 申請（專利權）人: 天津科潤農業科技股份有限公司
• 主分類號: A01H4/00
• 分類號: A01H4/00
• 代理公司: 天津市杰盈專利代理有限公司 12207
• 代理人: 朱紅星

1.一種菜豆直接再生體系的建立方法，其特征在于按如下的步驟進行：

（1）菜豆無菌苗的獲得：

挑選籽粒均勻、飽滿的菜豆種子，置于玻璃容器內，將濃度為10%-30%的次氯酸鈉溶液緩緩倒入容器內，使菜豆種子完全浸泡在次氯酸鈉溶液中，整個消毒過程用時10-20min，并每隔1-2min攪拌一次，使種子表面與溶液充分接觸，以保證消毒徹底，消毒后的菜豆種子用無菌水清洗4-5次，整個消毒過程在超凈工作臺內完成；將清洗后的菜豆種子插入萌發培養基內，種子插入一半即可，種子萌發環境為溫度20℃-25℃，光周期為16h/8h光照/黑暗；

（2）直接再生培養基配方及操作方法：

將萌發5-6天的菜豆無菌苗在超凈工作臺中取出，放在滅菌后的培養皿里，切除頂端生長點及胚根，留下子葉節上下各1.5-3.5mm的下胚軸，順著下胚軸將外植體縱向平均分開，得到兩個對稱的帶子葉的子葉節，用刀片對縱切面進行劃傷，傷口長3-4mm，深度0.3-0.5mm；將處理好的外植體近軸面向上與培養基成45度角斜插入芽誘導培養基中，密封并置于培養室中培養，培養環境為溫度20℃-25℃，光周期為16h/8h光照/黑暗；培養基每隔5-10天更換一次，15-20天后可獲得再生植株；所述的芽誘導培養基指的是：MSB₅+?6-BA?1.0-6.0?mg/L+IAA?0.1-1.0?mg/L+活性炭10-50mg/L；

（3）再生芽的生根培養基配方及操作方法：將長到4-5cm的不定芽延基部從外植體上切下，插入1/2MSB₅+?IBA?0.1-1.0?mg/L+活性炭5-30mg/L生根培養基內，密封好后置于培養室內培養，培養環境為溫度20-25℃，光周期為16h/8h光照/黑暗，7-10天順利生根；

（4）組培苗的移栽方法：生根后的組培苗，在培養室內開蓋煉苗3-5天，然后移栽到裝有基質的營養缽內，將移栽好的組培苗放在塑料拱棚內生長，保證拱棚內的溫度25-28℃，相對濕度60%，拱棚內生長5天逐漸給拱棚放風，直至幼苗適應溫室環境，再將拱棚撤去；

（5）成活的組培苗便可移栽入露地進行正常管理。

2.權利要求1所述的菜豆直接再生體系的建立方法，其中的菜豆品種指的是雙豐3號。

3.權利要求所述菜豆直接再生體系的建立方法在提高菜豆生芽率、生根率、植株成苗率方面的應用。