[發明專利]一種分子克隆大腸桿菌DH5α感受態細胞的簡易制備方法在審
| 申請號： | 201410659417.9 | 申請日： | 2014-11-07 |
| 公開（公告）號： | CN104357372A | 公開（公告）日： | 2015-02-18 |
| 發明（設計）人： | 孫會忠;王小東;宋月芹;董鈞鋒;朱金峰 | 申請（專利權）人： | 河南科技大學 |
| 主分類號： | C12N1/36 | 分類號： | C12N1/36;C12R1/19 |
| 代理公司： | 暫無信息 | 代理人： | 暫無信息 |
| 地址： | 471023 河南*** | 國省代碼： | 河南;41 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 一種 分子 克隆 大腸桿菌 dh5 感受態 細胞 簡易 制備 方法 | ||
【權利要求書】：
1.一種分子克隆大腸桿菌DH5α感受態細胞的簡易制備方法，其特征在于，包括以下步驟：
(1)從鋪有大腸桿菌DH5α的平板中挑選一個單菌落，接種到2ml?LB液體培養基中，37℃，220r/min培養過夜；
(2)吸取200μl菌液轉接到裝有20ml?LB液體培養基三角瓶中，37℃搖床培養至菌體細胞的OD600值為0.3-0.5；
(3)將菌液分裝于15個1.5ml預冷的無菌離心管中，每管裝1.5ml菌液，冰浴20min；4℃，4000r/min離心10min，棄上清；
(4)每管加入200μl?0.1mol/L?CaCl2溶液，輕柔吹吸，懸浮細胞，冰浴20min；直接用于轉化實驗或0-4℃貯存，5天內可用。
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