[發明專利]一種香蕉不定芽的化學誘變方法

在審

• 申請號: 201410657745.5
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN104365474A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 李洪波;呂順;劉文清;曾莉莎;劉建平;何建齊;韓秀香;杜彩嫻
• 申請（專利權）人: 東莞市香蕉蔬菜研究所
• 主分類號: A01H1/06
• 分類號: A01H1/06;A01G1/00
• 代理公司: 北京科億知識產權代理事務所(普通合伙) 11350
• 代理人: 湯東鳳

1.一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于，按照以下步驟進行：

步驟1：配置PH值3.0的磷酸鹽緩沖液；

步驟2：準備誘變劑疊氮化鈉溶液；

步驟3：香蕉不定芽的誘變處理；

1)選擇巴西、農科1號、抗枯5號三個品種的第3～4代叢生不定芽，在超凈工作臺內切成單個不定芽；

2)將切好后的單個不定芽放入疊氮化鈉溶液中進行誘變處理，每瓶浸30個芽；

3)每隔15分鐘左右晃動培養瓶一次，使不定芽浸泡均勻；

4)時間到后，將浸泡后的不定芽放入消毒后的無菌水中清洗3遍；

5)將清洗后的不定芽轉接到增殖培養基上，每瓶接種5～6個芽；

6)將誘變后的不定芽放入無菌培養室進行恢復培養，培養溫度28℃，光照強度1000lx，每日光照8h，恢復培養時間約20天；

步驟4：香蕉不定芽誘變后的生根培養；

將恢復培養后存活的不定芽轉入生根培養基，放入無菌培養室壯苗生根，培養溫度28℃，光照強度2000lx，每日光照12h，生根培養時間約25天；

步驟5：生根苗的移栽和管理；

1)將生根苗轉至育苗棚煉苗5天；

2)練苗結束后，將生根苗從瓶中取出，用清水將苗根部附著的培養基清洗干凈；

3)將清洗后的生根苗移栽到沙槽進行假植壯苗生根；

4)20天后將假植苗定植于規格為12cm×10cm育苗杯中；

步驟6：誘變后變異株的篩選；

當試管苗長到10片葉時，進行變異株的篩選。

2.按照權利要求1所述一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于：所述步驟1中，配置PH值3.0的磷酸鹽緩沖液方法為：

甲液：取濃磷酸4.2ml，加水1000ml溶解搖勻；

乙液：稱磷酸氫二鈉17.9g，加水1000ml溶解搖勻；

甲液：乙液＝1：1混合均勻，可得PH值3.0的磷酸鹽緩沖液。

3.按照權利要求1所述一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于：所述步驟2中誘變劑疊氮化鈉溶液是用PH值3.0的磷酸鹽緩沖液配置成的濃度為0.15g/L、0.20g/L、0.25g/L的疊氮化鈉溶液。

4.按照權利要求1所述一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于：所述步驟3中，巴西的誘變處理是0.15g/L浸泡3h，或者0.20g/L浸泡2h；農科1號、抗枯5號的誘變處理是0.15g/L浸泡3h，或者0.25g/L浸泡2h。

5.按照權利要求1所述一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于：所述步驟3中增殖培養基為MS+6-BA?3mg/L+NAA?0.3mg/L+Ad?5mg/L+蔗糖30g/L，PH5.8。

6.按照權利要求1所述一種香蕉不定芽的化學誘變方法，其特征在于：所述步驟4中生根培養基為1/2MS+IBA?1.0mg/L+NAA?0.2mg/L+蔗糖30g/L+碳粉2g/L，PH5.8。