[發明專利]熒光PCR檢測鯊魚源性成分的方法有效
| 申請號： | 201410656749.1 | 申請日： | 2014-11-18 |
| 公開（公告）號： | CN104404143A | 公開（公告）日： | 2015-03-11 |
| 發明（設計）人： | 羅寶正;廖秀云;陳軒;陶旻;薄清如;徐海聶;沙才華;黃海超 | 申請（專利權）人： | 珠海出入境檢驗檢疫局檢驗檢疫技術中心 |
| 主分類號： | C12Q1/68 | 分類號： | C12Q1/68;C12N15/11 |
| 代理公司： | 廣州嘉權專利商標事務所有限公司 44205 | 代理人： | 譚志強 |
| 地址： | 519015 廣*** | 國省代碼： | 廣東;44 |
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| 摘要： | |||
| 搜索關鍵詞： | 熒光 pcr 檢測 鯊魚 成分 方法 | ||
1.用于檢測鯊魚源性成分的熒光PCR引物對及探針，所述熒光PCR引物包括正向引物和反向引物，其特征在于，熒光PCR正向引物的堿基序列為SEQ?ID?NO.3，熒光PCR反向引物的堿基序列為SEQ?ID?NO.4，探針的堿基序列為SEQ?ID?NO.5。
2.根據權利要求1所述的熒光PCR引物對及探針，其特征在于，探針包括在5’端連接有熒光報告基團，在3’端連接有熒光淬滅基團。
3.根據權利要求2所述的熒光PCR引物對及探針，其特征在于，所述熒光報告基團為FAM，所述熒光淬滅基團為BHQ1。
4.用于檢測鯊魚源性成分的試劑盒，其特征在于，所述試劑盒包括權利要求1-3中任意一項所述的熒光PCR引物對及探針。
5.用于檢測鯊魚源性成分的方法，其特征在于，所述方法包括以下步驟：
a)制備熒光PCR反應體系，包括：
2×Taq?PCR?Master?mix????????????????????????????????12.5μL；
20?μmol/L權利要求1所述的熒光PCR引物對??????????各1.0?μL；
10?μmol/L權利要求1所述的探針???????????????????????1.0?μL；
樣品DNA模版???????????????????????????????????????5.0?μL；
補水至25?μL；
b)將步驟a）的熒光PCR反應體系置于94℃下反應2?min；
c)置于94℃下反應10?s，隨后在60℃下反應40?s；
d)步驟c）重復40次。
6.權利要求1所述的熒光PCR引物對及探針在檢測鯊魚源性成分中的應用。
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