[發明專利]一種具有毒殺線蟲活性的化合物及其制備方法

有效

• 申請號: 201410656578.2
• 申請日: 2014-11-18
• 公開（公告）號: CN105669691B
• 公開（公告）日: 2018-06-26
• 發明（設計）人: 秦波;曾黎明;金輝;李秀壯;潘樂;楊曉燕
• 申請（專利權）人: 中國科學院蘭州化學物理研究所
• 主分類號: C07D493/08
• 分類號: C07D493/08;C12P17/18;A01P5/00;C12R1/07
• 代理公司: 蘭州中科華西專利代理有限公司 62002
• 代理人: 方曉佳

本發明涉及一種具有毒殺線蟲活性的化合物，屬于微生物與生物農藥技術領域。該化合物為4?氧雜二環[3.2.2]壬?1(7),5,8?三烯，其制備方法為將SMrs28菌株用液體培養基常規發酵培養，發酵液經過濾后，將濾液過D101型大孔樹酯，得到的洗脫液低壓濃縮后，經反復硅膠和羥丙基葡聚糖凝膠層析分離。本發明所述化合物在液體浸泡法的抗線蟲活性試驗中顯示出毒殺線蟲的活性，具有對環境無污染、成本低、毒殺線蟲效果佳的優點。

技術領域

本發明涉及一種具有毒殺線蟲活性的化合物及其制備方法，屬于微生物與生物農藥技術領域。

背景技術

植物寄生線蟲是一類非常重要的植物病害，據報道植物寄生線蟲每年在全世界范圍內造成高達約1500億美元的農業損失 (Abad et al. 2008)。馬鈴薯腐爛莖線蟲是對農業危害最重要的線蟲之一，主要分布在許多國家的溫帶區域，能使馬鈴薯的產量造成巨大的損失。在我國，馬鈴薯腐爛莖線蟲（Ditylenchus Destructor）是制約我國甘薯生產的三大病害之一，一般發病田減產20% - 50%，重病田甚至絕產無收。松材線蟲（Bursaphelenchusxylophilus）病是世界上最具危險性的森林病害之一，屬國際重要檢疫對象，列為森林病害之首，被稱為“無煙的森林之火”。據Hajime et al (2001)報道，松材線蟲每年在全球造成約10億美元的經濟損失。該病自1934年被報道以來，現已廣泛分布于日本、美國、韓國、加拿大和中國等。在我國，該病害已在多省區分布并擴散蔓延，給我國森林資源及生態環境造成嚴重破壞。

目前對線蟲的防治主要以化學防治為主，但由于化學殺線蟲劑多數是高毒、高殘留農藥，對非目標生物和環境造成嚴重威脅。隨著人們環境意識的逐步增強，化學藥劑的應用漸漸受到限制，因此人們力求從自然界中尋找能防治植物病原線蟲的天然藥劑。微生物是產生活性天然產物的主要來源之一，從微生物的代謝物中尋找具有線蟲毒殺活性的天然產物成為一個研究熱點。

發明內容

本發明的目的在于提供一種具有毒殺線蟲活性的化合物及其制備方法。

本發明對采自甘肅萃英山瑞香狼毒根際土壤中的芽孢桿菌（Bacillus sp.）SMrs28進行了活性代謝物化學成分的研究，從中分離到了一個結構新穎的化合物4-氧雜二環[3.2.2]壬-1(7),5,8-三烯（4-oxabicyclo[3.2.2]nona-1(7),5,8-triene），經國內外文獻檢索，目前未見天然來源及有關活性的報道，也未見其被用于制備殺線蟲制劑應用的公開報道。

本發明的生產菌株為芽孢桿菌（Bacillus sp.）SMrs28，該菌株SMrs28已于2011年10月18日保藏在中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心，地址為北京市朝陽區北辰西路1號院3號，保藏編號為CGMCC No. 5352。

本發明所提供的菌株SMrs28屬于芽孢桿菌屬（Bacillus），其菌落白色，光滑濕潤，具有光澤，革蘭氏陽性菌，細胞長桿狀，單生，芽孢卵圓形，端生，膨大。

本發明將SMrs28菌株用液體培養基常規發酵培養，發酵液經過濾后，將濾液過D101型大孔樹酯，得到的洗脫液低壓濃縮后，經反復硅膠（石油醚/丙酮，氯仿/乙酸乙酯）和羥丙基葡聚糖凝膠（Sephadex LH-20）（氯仿/甲醇）層析，得到4-氧雜二環[3.2.2]壬-1(7),5,8-三烯，該化合物的結構式為：

。

其理化性質：

外觀：無色針狀晶體；

溶解性：溶于氯仿、丙酮、甲醇、二甲亞砜等；不溶于石油醚和水等；