[發(fā)明專(zhuān)利]蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法

有效

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410654423.5
• 申請(qǐng)日: 2014-11-17
• 公開(kāi)（公告）號(hào): CN104316621A
• 公開(kāi)（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 許建剛;高會(huì)玲
• 申請(qǐng)（專(zhuān)利權(quán)）人: 上海征泰飼料有限公司
• 主分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 分類(lèi)號(hào): G01N30/02
• 代理公司: 廣州新諾專(zhuān)利商標(biāo)事務(wù)所有限公司 44100
• 代理人: 劉菁菁

1.蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于采用如下步驟：

(1)配制堿基混合標(biāo)準(zhǔn)液；

(2)配制待測(cè)樣品的溶液，以步驟1所述的堿基混合標(biāo)準(zhǔn)液作為參照液，采用高效液相色譜法通過(guò)出峰面積比較得到樣品中游離堿基的含量值，并得到游離堿基的總含量；

(3)待測(cè)樣品進(jìn)行完全水解處理，用高效液相色譜法定量測(cè)定完全水解后的總堿基含量；

(4)以步驟3所得的總堿基含量減去步驟2所得的游離堿基含量后經(jīng)分子量換算得到核苷酸的含量。

2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于：所述步驟3中待測(cè)樣品進(jìn)行完全水解處理是通過(guò)以下操作實(shí)現(xiàn)的：

稱(chēng)取待測(cè)樣品，置于耐壓消化管中；

在耐壓消化管中加入高氯酸消化液，使待測(cè)樣品水解；

放入烘箱內(nèi)100～110℃消化50～70min；

使用10～20％氫氧化鉀溶液調(diào)pH至6.5～7.5，備用。

3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于：所述高氯酸消化液中高氯酸的質(zhì)量百分比濃度為70％。

4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于：所述步驟2中測(cè)定游離堿基含量及步驟3中測(cè)定總堿基含量的色譜條件為：流動(dòng)相A采用0.1mol/L磷酸二氫鉀溶液，pH＝4.9～5.1；流動(dòng)相B采用25％甲醇溶液。

5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于：測(cè)定總堿基含量采用如下梯度洗脫程序：

6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的蛋白產(chǎn)品的總核苷酸測(cè)定方法，其特征在于：測(cè)定游離堿基含量采用如下梯度洗脫程序：