[發明專利]酶的固定化載體及其制備方法與應用

在審

• 申請號: 201410652131.8
• 申請日: 2014-11-14
• 公開（公告）號: CN104450667A
• 公開（公告）日: 2015-03-25
• 發明（設計）人: 王樂;武大鵬;惠明;劉娜
• 申請（專利權）人: 河南工業大學
• 主分類號: C12N11/14
• 分類號: C12N11/14
• 代理公司: 北京方圓嘉禾知識產權代理有限公司 11385
• 代理人: 董芙蓉

1.一種酶的固定化載體，其特征在于，所述固定化載體是直徑長度為0.8～3cm成球碳纖維，其中，所述成球碳纖維的球團高徑比為H/D＝0.6/1～1/0.6。

2.根據權利要求1所述的酶的固定化載體，其特征在于，所述成球碳纖維的球團高徑比為H/D＝1/0.8。

3.一種如權利要求1或2所述酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，包括以下步驟：

(1)預處理：將碳纖維切成長度為0.3cm～0.8cm短切碳纖維放入有機溶劑中浸泡3～5h，過濾或離心回收上清液，用相當于3～5倍碳纖維體積的水對短切碳纖維進行清洗，然后將清洗后的短切碳纖維浸泡于體積大于3倍碳纖維體積的沸水浴中處理3～5h后，用水清洗后，烘干，取出備用；

(2)成球：將經步驟(1)中預處理的短切碳纖維，以投入量為2.0～20g/L投入含水溶液的容器中，然后放置于搖床中，控制搖床轉速為120rpm～220rpm，搖動0.5～4h，即得酶的固定化載體。

4.根據權利要求3所述的酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，步驟(1)中，將碳纖維切成長度為0.4～0.6cm短切碳纖維放入丙酮中浸泡4h，過濾或離心回收上清液，用相當于5倍碳纖維體積的蒸餾水對短切碳纖維進行清洗，然后將清洗后的短切碳纖維浸泡于體積6倍為碳纖維體積的沸水浴中處理4h后，用蒸餾水清洗后，烘干，取出備用。

5.根據權利要求3或4所述的酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，將經步驟(1)中預處理的短切碳纖維，以等量方式每隔0.5～5.0分鐘投入一次，共投放3～5次。

6.根據權利要求3或4所述的酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，步驟(2)中，所述短切碳纖維投入量為2.5～15g/L；在250mL搖瓶中，所述含水溶液的量相當于10～50倍短切碳纖維體積。

7.根據權利要求3～6之一所述的酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，所述含水溶液選自自無菌水、無菌含水種子培養基、無菌含水含菌種培養液中的任一種；所述碳纖維選自2k碳纖維、3k碳纖維、6k碳纖維、24k碳纖維、補強布中的任一種。

8.根據權利要求7所述的酶的固定化載體的制備方法，其特征在于，所述含水溶液選自無菌水；所述碳纖維選自6k碳纖維。

9.根據權利要求1或2所述的酶的固定化載體在制備固定化酶中的應用，其特征在于，將所述固定化載體加入到相應緩沖液配制的相應酶溶液中，室溫下攪拌反應，于2～6℃靜置過夜，洗去游離酶，即得固定化酶。