[發明專利]一種短小芽孢桿菌活菌制劑及其固體發酵方法和應用

在審

• 申請號: 201410652130.3
• 申請日: 2014-11-17
• 公開（公告）號: CN104371957A
• 公開（公告）日: 2015-02-25
• 發明（設計）人: 王嬌;李慧芬;梁晶晶
• 申請（專利權）人: 青島根源生物技術集團有限公司
• 主分類號: C12N1/20
• 分類號: C12N1/20;A01N63/02;A01P1/00;C12R1/07
• 代理公司: 青島致嘉知識產權代理事務所 37236
• 代理人: 王曉曉

1.一種短小芽孢桿菌活菌制劑的固體發酵方法，其特征在于它包括以下步驟：

（1）選用短小芽孢桿菌，將其活化；

（2）將短小芽孢桿菌接種于種子液體培養基中培養12~14h，待短小芽孢桿菌還未形成芽孢狀態，得固體發酵種子液；

（3）將步驟（2）的固體發酵種子液接種于滅菌的固體培養基中，攪拌均勻；將發酵物料平攤于37℃下發酵培養20~24h，鏡檢芽孢率>90%；

（4）將步驟（3）得到的發酵產物直接90℃以下干燥，粉碎過80目篩，包裝成品。

2.根據權利要求1所述的短小芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于：所述短小芽孢桿菌選用短小芽孢桿菌S3，其保藏號為CGMCC?No.9161。

3.根據權利要求2所述的短小芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于：所述種子液體培養基為酶解的豆粕30g/L、玉米面10g/L、葡萄糖50g/L、NaCl?5g/L、余量為水，種子液體培養基的pH為7.0～7.2；所述酶解的豆粕是將豆粕采用中性蛋白酶40℃酶解1h制得，中性蛋白酶的添加量為1000U/g。

4.根據權利要求3所述的短小芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于：所述步驟（2）中接種量為占培養基體積比的2%，37℃，180rpm培養14h。

5.根據權利要求2所述的短小芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于：所述固體培養基以質量比為2:2:1的甘蔗渣、粗麩皮、酶解的豆粕為基礎料，并添加占總固體培養基的重量比為2%的檸檬酸鈉，料水比為1:1，攪拌均勻，調pH?6.5；所述酶解的豆粕是將豆粕采用中性蛋白酶40℃酶解1h制得，中性蛋白酶的添加量為1000U/g。

6.根據權利要求5所述的短小芽孢桿菌的固體發酵方法，其特征在于：所述步驟（3）中種子液接種于固體培養基的接種量為按照體積比10%，攪拌均勻，37℃培養20~24h。

7.根據權利要求1-6任一項所述固體發酵方法制得的短小芽孢桿菌活菌制劑。

8.根據權利要求7所述的短小芽孢桿菌活菌制劑，其特征在于：所述短小芽孢桿菌活菌制劑中的活菌含量為1×10¹¹CFU/g～1.5×10¹¹?CFU/g。

9.根據權利要求7所述的短小芽孢桿菌活菌制劑在制備抑制副溶血弧菌的抑菌劑中的應用。

10.根據權利要求9所述的短小芽孢桿菌活菌制劑在制備抑制副溶血弧菌的抑菌劑中的應用，其特征在于短小芽孢桿菌固體發酵液用來抑制溶血弧菌時的短小芽孢桿菌活菌含量不低于1×10⁹CFU/g。