[發明專利]一種黃曲霉菌株及其應用

有效

• 申請號: 201410639891.5
• 申請日: 2014-11-13
• 公開（公告）號: CN104531537A
• 公開（公告）日: 2015-04-22
• 發明（設計）人: 樊霆;李定心;唐子陽;張如;李瑩瑩;王振;陳海燕;葉文玲;湯婕;魯洪娟
• 申請（專利權）人: 安徽農業大學
• 主分類號: C12N1/14
• 分類號: C12N1/14;C02F3/34;C12R1/67;C02F101/20
• 代理公司: 北京市京大律師事務所 11321
• 代理人: 王凝;張波

技術領域

本發明屬于微生物治理環境污染領域，具體地涉及一種對銅和鋅具有高抗性的黃曲霉菌株，該菌株在處理含銅和鋅的水中的應用。

背景技術

由于重金屬導致的大氣、土壤及地表水、地下水的環境污染問題日益突出，使生態環境面臨著嚴峻的考驗。我國20個主要城市土壤受Cr、Cu、Pb、Zn、Ni和Cd的污染十分普遍。與傳統的物理化學治理方法相比，微生物修復是重金屬污染治理最有效且廣泛應用的方法之一。由于重金屬毒害性限制微生物修復技術廣泛應用，而長期生活在重金屬污染環境中的抗性微生物在重金屬修復中具有很大的應用潛力。因此，選擇具有重金屬耐性的菌種尤其關鍵。

目前，由于真菌細胞壁含有豐富多糖，在重金屬污染修復技術方面得到廣泛關注。已有研究報道表明抗性真菌能有效提高重金屬的去除能力，從制革污泥中篩選抗Cr(VI)的淡紫擬青霉(Paecilomyces?lilacinus)，能有效還原Cr(VI)和富集Cr(III)；抗性黑曲霉(Aspergillus?niger)對城市垃圾焚燒飛灰中Cd、Mn、Zn和Pb的溶出率分別為87.4％、64.8％、49.4％和45.9％。因此，篩選一株對重金屬具有耐性的霉菌菌株在重金屬污染治理中將具有突出的應用潛力。

發明內容

本發明要解決的技術問題是提供一種對銅和鋅具有高抗性的黃曲霉菌株，從而利用該菌株進行重金屬銅和鋅污染環境的微生物修復。

為了解決上述技術問題，本發明提供了以下的技術方案。

在本發明的一個方面，提供了一種黃曲霉菌株，其屬于曲霉屬(Aspergillus)黃曲霉(Aspergillus?flavus)，其保藏名稱為黃曲霉菌株TL-F3，保藏單位為中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(位于：北京市朝陽區北辰西路1號院3號中國科學院微生物研究所)，保藏日期為2013年9月10日，保藏編號為CGMCC?No.8146。

在本發明一個優選的方面，上述黃曲霉菌株的ITS?rDNA序列如SEQ?ID?NO.1所示。

在本發明一個優選的方面，所述的菌株在25-37℃，pH值6.0-7.0培養條件下較好的生長，在PDA上生長較快，菌落疏松略帶絮狀，初帶黃色，后變黃綠色，成熟后顏色變暗，反面略帶褐色；顯微鏡下觀察：菌絲無色，有隔，分生孢子梗無橫隔，分生孢子頭呈疏松放射形，繼變為疏松柱狀。頂囊燒瓶形或近球形，小梗單層或雙層；分生孢子球形或近球形，粗糙。

在本發明的一個方面，提供了上文所述的黃曲霉菌株在處理水中的用途，其中待處理的水含有Cu(II)和/或Zn(II)。

在本發明一個優選的方面，所述的Cu(II)的濃度為以Cu(II)計不高于800mg/L，優選地為25～200mg/L，更優選地為50～100mg/L。

在本發明一個優選的方面，所述的Zn(II)的濃度為以Zn(II)計不高于6000mg/L，優選地為25～200mg/L，更優選地為50～100mg/L。

在本發明一個優選的方面，所述Cu(II)和Zn(II)的濃度分別為以Cu(II)或Zn(II)計25～200mg/L；優選地Cu(II)和Zn(II)的濃度分別為以Cu(II)計25mg/L和以Zn(II)計100mg/L。

在本發明的另一個方面，提供了一種培養所述的黃曲霉菌株的菌絲球培養液(即菌株培養液)的方法，其包括步驟：取孢子濃度為10⁵～10⁸CFU/L(優選地為10⁷CFU/L)的活菌，按照1:99的體積比接入液體培養基中；于30℃、轉速為130轉/分鐘條件下震蕩培養7天，即可得到菌絲球培養液。

在本發明一個優選的方面，所述的液體培養基按照如下的方法來制備：取葡萄糖20g、蛋白胨10g、NaCl?0.2g、CaCl₂?0.1g、KCl?0.1g、K₂HPO₄?0.5g、NaHCO₃?0.05g、MgSO₄?0.25g、Fe(SO₄)₂?7H₂O?0.005g，蒸餾水定容至1000mL，調節pH至5.0；在121℃下滅菌30分鐘。