[發(fā)明專利]一種黃萱益肝片的制備方法及其在制備抑制白血病細(xì)胞L6565細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用

在審

• 申請(qǐng)?zhí)枺?/td>: 201410638775.1
• 申請(qǐng)日: 2014-11-13
• 公開（公告）號(hào): CN104306826A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發(fā)明（設(shè)計(jì)）人: 權(quán)棟棟;王洪濤;劉艷輝;權(quán)威宇;胡乃合
• 申請(qǐng)（專利權(quán)）人: 山東中大藥業(yè)有限公司
• 主分類號(hào): A61K36/90
• 分類號(hào): A61K36/90;A61K36/896;A61K9/20;A61J3/10;A61P35/02;A61P1/16;A61P31/20
• 代理公司: 暫無信息
• 代理人: 暫無信息

技術(shù)領(lǐng)域

本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種黃萱益肝片的制備方法及其在制備抑制小鼠白血病細(xì)胞L6565細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。

背景技術(shù)

黃萱益肝散標(biāo)準(zhǔn)號(hào)WS-10465（ZD-0465）-2002，記載于國家中成藥標(biāo)準(zhǔn)匯編內(nèi)科肝膽分冊(cè)。由土大黃291g、萱草103g、千里光92g、獼猴桃92g、紅土茯苓92g、野薔薇62g、獐芽菜62g、騷羊古62g、南五味子62g作為原料藥制成，具有清熱解毒，疏肝利膽的功效。用于肝膽濕熱所致的慢性乙型肝炎。

現(xiàn)有技術(shù)中，尚未有黃萱益肝散在提取制備方面采用CO₂超臨界萃取、微波技術(shù)和大孔樹脂吸附技術(shù)提取的報(bào)道，而中藥直接打粉取的方法，工藝粗糙、落后，雜質(zhì)多，導(dǎo)致患者用量過大，不方便服用，嚴(yán)重影響了本品在臨床上應(yīng)用。

發(fā)明內(nèi)容

為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供了一種黃萱益肝片的制備方法。

本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種黃萱益肝片在制備抑制小鼠白血病細(xì)胞L6565?細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。

本發(fā)明的目的是通過如下的方案實(shí)現(xiàn)的：

一種黃萱益肝片的制備方法，由土大黃291g、萱草103g、千里光92g、獼猴桃92g、紅土茯苓92g、野薔薇62g、獐芽菜62g、騷羊古62g、南五味子62g作為原料藥制成，所述的制備方法由下列步驟組成：取野薔薇、騷羊古、南五味子，粉碎成細(xì)粉，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-30MPa，溫度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生藥·min，萃取時(shí)間130-170min，得超臨界萃取物，備用；萃取后的野薔薇、騷羊古、南五味子殘?jiān)c其他六味藥材，粉碎，加入5L的60%乙醇，投入微波萃取裝置中進(jìn)行微波萃取，萃取功率600-800W，萃取2次，每次5-10分鐘，合并萃取液，濃縮，加到D101大孔吸附樹脂柱上，60%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮并干燥，得微波提取物，將超臨界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重0.5g。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取壓力為25?MPa。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取溫度為60℃。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中CO₂流量2ml/g生藥·min。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取時(shí)間為150min。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述微波萃取功率為700W。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述微波萃取每次萃取時(shí)間為8分鐘。

上述的黃萱益肝片在制備抑制小鼠白血病細(xì)胞L6565?細(xì)胞增殖藥物中的應(yīng)用。

現(xiàn)有技術(shù)中，黃萱益肝散口服，成人一次9g，一日3次。黃萱益肝散服藥量大。采用本發(fā)明方法制備成的黃萱益肝片每片重0.5g，每次僅需2片，一日服用3次。在具有更多活性成分的條件下大大減少了服用量。此結(jié)論可以通過下述試驗(yàn)證明。

試驗(yàn)一、不同方法制備的黃萱益肝片中大黃素含量的比較??

l、儀器及試藥本發(fā)明黃萱益肝片：按實(shí)施例1方法制備，使用918g原料藥，經(jīng)提取制成200片，每片重0.5g。原黃萱益肝散，按照WS-10465（ZD-0465）-2002標(biāo)準(zhǔn)方法制備，作為對(duì)照。Agilent1200高效液相色譜儀；?AE240電子分析天平；大黃素對(duì)照品（中國藥品生物制品檢定所）。

2、方法

照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ?D）測(cè)定。?

色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)??用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.25%磷酸溶液（80∶20）為流動(dòng)相；檢測(cè)波長為436nm。理論板數(shù)按大黃素峰計(jì)算應(yīng)不低于3000。

對(duì)照品溶液的制備??取經(jīng)五氧化二磷干燥至恒重的大黃素對(duì)照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。