[發明專利]一種黃萱益肝片的制備方法及其在制備抑制肝癌細胞H22細胞增殖藥物中的應用

在審

• 申請號: 201410638520.5
• 申請日: 2014-11-13
• 公開（公告）號: CN104306822A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 權棟棟;王洪濤;劉艷輝
• 申請（專利權）人: 山東中大藥業有限公司
• 主分類號: A61K36/90
• 分類號: A61K36/90;A61K36/896;A61K9/20;A61P35/00
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技術領域

本發明屬于中藥技術領域，具體涉及一種黃萱益肝片的制備方法及其在制備抑制小鼠肝癌細胞H22細胞增殖藥物中的應用。

背景技術

黃萱益肝散標準號WS-10465（ZD-0465）-2002，記載于國家中成藥標準匯編內科肝膽分冊。由土大黃291g、萱草103g、千里光92g、獼猴桃92g、紅土茯苓92g、野薔薇62g、獐芽菜62g、騷羊古62g、南五味子62g作為原料藥制成，具有清熱解毒，疏肝利膽的功效。用于肝膽濕熱所致的慢性乙型肝炎。

現有技術中，尚未有黃萱益肝散在提取制備方面采用CO₂超臨界萃取、微波技術和大孔樹脂吸附技術提取的報道，而中藥直接打粉取的方法，工藝粗糙、落后，雜質多，導致患者用量過大，不方便服用，嚴重影響了本品在臨床上應用。

發明內容

為了解決上述的技術問題，本發明提供了一種黃萱益肝片的制備方法。

本發明的另一個目的在于提供一種黃萱益肝片在制備抑制小鼠肝癌細胞H22?細胞增殖藥物中的應用。

本發明的目的是通過如下的方案實現的：

一種黃萱益肝片的制備方法，由土大黃291g、萱草103g、千里光92g、獼猴桃92g、紅土茯苓92g、野薔薇62g、獐芽菜62g、騷羊古62g、南五味子62g作為原料藥制成，所述的制備方法由下列步驟組成：取野薔薇、騷羊古、南五味子，粉碎成細粉，加入到CO2超臨界萃取器中，乙醇作為夾帶劑，夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為4-6%，萃取壓力20-30MPa，溫度30-50℃，CO₂流量l-3ml/g生藥·min，萃取時間130-170min，得超臨界萃取物，備用；萃取后的野薔薇、騷羊古、南五味子殘渣與其他六味藥材，粉碎，加入5L的60%乙醇，投入微波萃取裝置中進行微波萃取，萃取功率600-800W，萃取2次，每次5-10分鐘，合并萃取液，濃縮，加到D101大孔吸附樹脂柱上，60%乙醇洗脫，收集5倍量柱體積洗脫液，減壓回收乙醇，濃縮并干燥，得微波提取物，將超臨界萃取物、微波提取物混合加入淀粉，60%乙醇制顆粒，干燥，壓片，制成200片，每片重0.5g。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中夾帶劑占總萃取溶劑的體積百分比為5%。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取壓力為25?MPa。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取溫度為60℃。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中CO₂流量2ml/g生藥·min。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述CO₂超臨界萃取中萃取時間為150min。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述微波萃取功率為700W。

上述的黃萱益肝片的制備方法中，所述微波萃取每次萃取時間為8分鐘。

上述的黃萱益肝片在制備抑制小鼠肝癌細胞H22?細胞增殖藥物中的應用。

現有技術中，黃萱益肝散口服，成人一次9g，一日3次。黃萱益肝散服藥量大。采用本發明方法制備成的黃萱益肝片每片重0.5g，每次僅需2片，一日服用3次。在具有更多活性成分的條件下大大減少了服用量。此結論可以通過下述試驗證明。

試驗一、不同方法制備的黃萱益肝片中大黃素含量的比較??

l、儀器及試藥本發明黃萱益肝片：按實施例1方法制備，使用918g原料藥，經提取制成200片，每片重0.5g。原黃萱益肝散，按照WS-10465（ZD-0465）-2002標準方法制備，作為對照。Agilent1200高效液相色譜儀；?AE240電子分析天平；大黃素對照品（中國藥品生物制品檢定所）。

2、方法

照高效液相色譜法（中國藥典2010年版一部附錄Ⅵ?D）測定。?

色譜條件與系統適用性試驗??用十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；甲醇-0.25%磷酸溶液（80∶20）為流動相；檢測波長為436nm。理論板數按大黃素峰計算應不低于3000。

對照品溶液的制備??取經五氧化二磷干燥至恒重的大黃素對照品適量，精密稱定，加甲醇制成每1ml含0.05mg的溶液，即得。