[發明專利]一種HPLC法分析分離鹽酸多佐胺對映異構體的方法

有效

• 申請號: 201410635864.0
• 申請日: 2014-11-12
• 公開（公告）號: CN104316619A
• 公開（公告）日: 2015-01-28
• 發明（設計）人: 沈婕;喬春蓮;朱墨;周靜;楊波
• 申請（專利權）人: 武漢武藥科技有限公司
• 主分類號: G01N30/02
• 分類號: G01N30/02
• 代理公司: 北京中譽威圣知識產權代理有限公司 11279
• 代理人: 蔣常雪

技術領域

本發明屬涉及一種高效液相色譜法分析分離藥物的方法，具體涉及一種分析分離鹽酸多佐胺及其光學異構體的高效液相色譜法。

背景技術

多佐胺是一種碳酸酐酶抑制劑。多佐胺鹽酸鹽是用于降低開角型青光眼和高眼壓癥增高的眼壓。其分子式為C₁₀H₁₆N₂O₄S₃HCl，化學名為(4S,6S)-6-甲基-4-乙氨基-5,6-二氫-4H-噻吩并[2,3-b]噻喃-2-氨磺酰7,7-二氧化物鹽酸鹽，結構式為：

該分子中含有2個手性中心，4個光學異構體，本合成路線中作為雜質存在在多佐胺反式外消旋體中的非對映體多佐胺順式外消旋體的量極少，主要考察反式多佐胺中的對映異構體(-)(4S,6S)-6-甲基-4-乙氨基-5,6-二氫-4H-噻吩并[2,3-b]噻喃-2-氨磺酰7,7-二氧化物，該雜質可通過后續反應，殘留在藥物中，影響藥品質量。因此，控制鹽酸多佐胺中光學異構體的含量，對提高碳酸酐酶抑制劑類藥物的質量、保證廣大患者用藥的安全性具有重大意義。

對于鹽酸多佐胺的光學異構體雜質，在藥物合成過程當中是需要進行質量控制的。含手性碳原子的光學異構體的分離一直是手性藥物合成和制劑過程中質量控制的難點，經文獻檢索，未見(-)反式鹽酸多佐胺光學異構體檢測方法的報道。

發明內容

本發明的目的在于提供一種分析分離鹽酸多佐胺及其光學異構體雜質的高效液相色譜法，從而實現鹽酸多佐胺與其光學異構體雜質的分離測定。

發明人發現，以纖維素類手性柱，以正相混合溶劑為流動相，可以將鹽酸多佐胺及其光學異構體進行有效分離，從而可以準確控制鹽酸多佐胺的質量。本發明的方法能簡單、快速、準確地分析分離鹽酸多佐胺及其光學異構體雜質。

進一步地，選用纖維素類手性柱AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)，可以獲得更好的分析分離效果。

進一步地，本發明的正相溶劑選用正己烷、無水乙醇和二乙胺的混合溶劑。

本發明的方法中的流動相選用體積比例為80～90:20～10:0.02的正己烷、無水乙醇和二乙胺的混合溶劑。

優選正己烷、無水乙醇和二乙胺的體積比例為為84:16:0.02。

本發明所述的分析分離方法，可按照以下方法實現：

(1)取鹽酸多佐胺樣品適量，用甲醇溶解樣品，配制成每1ml含鹽酸多佐胺0.5～1.5mg的樣品溶液。

(2)設置流動相流速為0.8～1.2ml/min，檢測波長為254nm，色譜柱柱溫箱為25～35℃，色譜柱柱溫的最佳溫度為30℃。

(3)取(1)的樣品溶液5～10μl注入液相色譜儀，完成鹽酸多佐胺及其光學異構體的分析與分離。

其中：

色譜柱：AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)纖維素手性色譜柱；

流動相：正己烷-無水乙醇-二乙胺＝84:16:0.02；

柱溫：30℃；

檢測波長：254nm；

流速：1.0ml/min；

進樣體積：10μl。

本發明采用纖維素類AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)手性色譜柱，能夠有效的分析分離鹽酸多佐胺及其光學異構體(雜質)；選擇流動相溶解樣品，確保了溶液的穩定性；選擇進樣體積10μl，柱溫為30℃，提高了色譜峰的對稱性。本發明解決了含鹽酸多佐胺及其光學異構體的原料的分析與分離問題，從而確保了鹽酸多佐胺的質量可控。

附圖說明

圖1：正己烷-無水乙醇-二乙胺＝84:16:0.02，柱溫30℃的HPLC圖：

圖中1號峰為鹽酸多佐胺，2號峰為異構體(+)鹽酸多佐胺。

圖2：正己烷-無水乙醇-二乙胺＝80:20:0.02，柱溫30℃的HPLC圖：

圖中1號峰為鹽酸多佐胺，2號峰為異構體(+)鹽酸多佐胺。

圖3：正己烷-無水乙醇-二乙胺＝86:14:0.02，柱溫30℃的HPLC圖：

圖中1號峰為鹽酸多佐胺，2號峰為異構體(+)鹽酸多佐胺。

具體實施方式：

實施例1

儀器與條件

色譜柱：AD-H(Daicel，250mm×4.6mm，5μm)；

流動相：正己烷-無水乙醇-二乙胺＝84:16:0.02；

柱溫：30℃；